谷氨酰胺与巨噬细胞的代谢及免疫调节作用
作者：施鑫 黎介寿
单位：(南京军区南京总医院解放军普通外科研究所，江苏南京 210002)
关键词：谷氨酰胺；巨噬细胞；代谢；免疫调节
肠外与肠内营养000318 摘要：谷氨酰胺(Gln)是循环和体内氨基酸池中含量最丰富的氨基酸：创伤后机体免疫功能损害与血中谷氨酰胺浓度下降密切相关。单核巨噬细胞是免疫系统的组成部分，在免疫反应中起重要作用。研究表明谷氨酰胺是单核巨噬细胞主要的代谢底物，通过谷氨酰胺酵解途径，为细胞代谢提供能量；为细胞合成DNA和mRNA提供嘌呤、嘧啶、核苷酸生物合成前体；提供氨基葡萄糖，GTP和NAD+合成的氮前体。单核巨噬细胞的免疫功能依赖于谷氨酰胺的含量，包括吞噬功能、细胞因子合成和分泌以及抗原提呈等功能。通过特殊的营养支持以增加肌肉和血中Gln浓度，改善应激状态下的免疫功能抑制，为临床营养支持治疗可提供有益的途径。
, 百拇医药
中图分类号： 文献标识码：A 文章编号：1007-810X(2000)03-0166-05
The metabolism and immunomodulatery effects of glutamine in macrophage
SHI Xin
(Research Insititute of Gengeral Surgery,Jinling Hospital,Nanjing 210002,Jiangsu,China)
Abstract:Glutamine is the most abundant amino acid in the blood and in the free amino acid pool of body.Macrophage is the major cellular component of the immune system,and plays several important roles in the immune response.Decrease in plasma glutamine resulting from trauma may be responsible for the impairment of immune function.Most of the studies have demonstr ated that glutamine serves metabolic roles for macrophage.By glutamiolysis pat hway,glutamine provides ATP for the cellular metabolism,intermediates for the biosyn thesis of parine,pyrimidine and nuclecotides,and nitrogen for the formation of glucosamine,GTP and NAD+.The immune function of macrophage including phagocytos is,synthesis of cytokines,and antigen processing and present ation depends on glutamine.Administration of glutamine is beneficial in stress situations.
, 百拇医药
Key words:Glutamine;Macrophage;Metabolism;Immunomodulation
0 引 言
谷氨酰胺(Gln)是血液循环和体内游离氨基酸池中含量最丰富的氨基酸，健康成人血浆Gln浓 度接 近于 1 mmol/L，大鼠约为0.6 mmol/L[1]。一些组织和细胞是Gln的主要代谢场所 。 愈来愈多的体外研究表明，即使不具备增殖、分化特征的单核巨噬细胞系统(MΦ)对Gln也有 很高 的利用率[2]。单核巨噬细胞系统是机体免疫系统的组成部分，是调节各种免疫紊 乱的 重要环节，不仅具有非特异炎症反应能力(趋化、吞噬、杀菌)，而且具有特异性免疫应答功 能。
1 谷氨酰胺的生物化学特性
1.1 性质与特征 Gln是5碳氨基酸，含有两个氨基(α- 氨基和酰胺基 )。在生理pH条件下，羧基带负电荷，氨基带正电荷，分子净电荷为零，属于中性氨基酸。 由于它含两个氨基特性，决定了它在器官之间氮的运输和作为氨载体的重要性，循环中30%～ 35% 的氨基酸转运依靠Gln完成，故Gln被称之为“氮梭(nitrogen shuttle)[3]。Gln具 有生糖作用，组织细胞摄取循环中的Gln经氧化释放能量，每克分子Gln通过α-酮戊二酸进 入三羧酸循环(the kerb,scycle)完全氧化可产生30克分子的ATP[4]，与葡萄糖(36 molATP/mol)一样是高效的能源底物。Gln所含的酰胺氮对所有细胞的生物合成是绝对必需 的，体内细胞利用Gln可合成嘌呤、嘧啶、氨基糖以及其他氨基酸[5]。因此，Gln 是蛋白质代谢的重要调节因子，促进细胞内蛋白质的合成，减少骨骼肌蛋白的分解，被认为 是机体在应激状态下的条件必需氨基酸，对于调节应激状态下的细胞代谢和调节免疫细胞的 功能具有重要的意义。
, http://www.100md.com
1.2 巨噬细胞内Gln代谢 1995年，Eagle等[6] 研究了组织培 养中的营养需要，注意到Gln的需要量远远超过其他氨基酸。若培养基中缺乏Gln将导致细胞 死亡。一些以快速增殖为特征的细胞对Gln具有很高摄取率，如肠粘膜细胞、免疫细胞、成 纤维细胞等。巨噬细胞是终末细胞，不再具有增殖、分化能力，然而它是代谢活性细胞，以 分泌蛋白质、膜蛋白再循环为特征，对Gln同样具有很高的利用率和代谢率[7]。巨 噬细胞内不含谷氨酰胺合成酶，胞内Gln主要来源于骨骼肌的合成、释放，从血液循环中摄 取，经跨膜转运进入细胞内。Gln跨膜转运需要通过胞膜上的吸收载体系统，主要有两大类 ：①N系统：属于Na+依赖的Gln转运系统；②ASC系统：是Na+依赖的中性氨基酸转运系 统，可转运丝氨酸、天冬酰胺和组氨酸等。N系统受细胞内pH值的调节，ASC系统依赖于激素 调节，共同维持胞内Gln平衡和代谢需要[8，9]。
葡萄糖曾被认为是免疫细胞的唯一能源底物，随着对Gln代谢作用的深入研究，发现Gln也是 免疫细胞的重要能源物质，即使是在静息状态下，巨噬细胞的Gln利用率也很高，甚至高于 对葡萄糖的利用率(表1)。
, 百拇医药
表1 巨噬细胞对Gln的利用率
Table 1 The use of Gln by macrophage 细胞来源
条件
利用率(μmol/h*mg)
文献
小鼠腹腔巨噬细胞
静息
190
7
小鼠腹腔巨噬细胞
静息
90
, 百拇医药
10
大鼠肝Kupffer细胞
静息
6.1
11
巨噬细胞内含有多种Gln的代谢酶，其中涉及几个主要关键酶：如谷氨酰胺酶、谷氨酰胺脱 氢酶、天冬氨酸转氨酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶、苹果酸脱氢酶和酮戊二酸脱氢酶等。谷 氨酰胺酶是催化Gln分解成谷氨酸和氨的起始酶，在调节细胞内Gln代谢中负主要责任。对大 鼠巨噬细胞关键酶的研究表明，巨噬细胞能够大量利用Gln，其谷氨酰胺酶的活性是淋巴细 胞的4倍[12]，提示Gln对巨噬细胞的重要性。巨噬细胞中Gln的代谢主要是以不完 全氧化方式进行，Gln分解成谷氨酸后，通过天冬氨酸转氨酶的转氨基作用，而不是经过谷 氨酸脱氢酶的氧化脱氨基作用产生α-酮戊二酸进入三羧酸循环，丙氨酸经天冬氨酸转氨酶 的转氨基作用产生α-酮戊二酸进入三羧酸循环[13]。McKeehan[14]将Gl n部分氧化代谢途径命名为Gln酵解，其主要代谢产物有谷氨酸、天冬氨酸和氨；其次为丙氨 酸、乳酸和丙酮酸。通过酵解途径产生的中间代谢产物，为高活性的巨噬细胞蛋白合成提供 必需的代谢底物，是巨噬细胞行使其免疫功能所必需的。巨噬细胞对Gln连续不断的高代 谢率，为其快速、有效的免疫应答反应提供适宜的条件。Gln在巨噬细胞的代谢特征，至少 有 三个意义：①为巨噬细胞提供能量ATP，维持其高代谢活性；②为细胞合成DNA和mRNA提供嘌 呤、嘧啶、核苷酸生物合成的前体物质；③提供氨基葡萄糖、GTP和NAD+合成的氮前体物 质。
, http://www.100md.com
2 谷氨酰胺代谢调节
2.1 激素 感染、创伤等 应激状态下，血浆糖皮质激素、甲状腺素分泌增加，胰岛素分泌减少，机体处于高代谢状态 ，谷氨酰胺酶是Gln分解代谢的起始酶，其活性受激素的调节。Coast等[15]研究胰 岛素、糖皮质激素、甲状腺素对培养大鼠巨噬细胞酶活性的影响，巨噬细胞来自大鼠腹腔， 在含上述激素的培养液中培养48 h，测定己糖激酶、6-磷酸葡萄糖脱氢酶、谷氨酰胺酶、 枸 橼酸合成酶的最大活性，发现胰岛素增加枸橼酸合成酶和己糖激酶的活性，降低谷氨酰胺酶 和6-磷酸葡萄糖脱氢酶的活性。地塞米松对谷氨酰胺酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶的活性影响与 胰岛素相似，而甲状腺素能增加谷氨酰胺酶和己糖激酶的活性。Rosa等[16]研究指 出，胰岛素对Gln在巨噬细胞代谢中的作用，通过测定谷氨酰胺酶的活性、Gln代谢利用率， 结果显示胰岛素增加糖代谢，减低谷氨酰胺酶的活性，减少Gln代谢利用率。提示机体在应 激状态下，一些激素能够通过调节谷氨酰胺酶的活性，促进Gln的代谢，增加巨噬细胞对Gln 的利用率，调节巨噬细胞的功能。
, http://www.100md.com
2.2 自身调节 巨噬细胞被激活后，代谢活性明显增加 ，表现为细胞 内对Gln的摄取和利用比静息状态下显著升高。在其活化的早期，伴随着巨噬细胞体积明显 增大[17，18]。Wu等[19]推测巨噬细胞体积改变能够调节胞内Gln代谢， 实验观察了渗透浓度和蔗糖介导的巨噬细胞体积改变对Gln代谢的影响，在37℃条件下，用K rebs-Henseleit碳酸氢盐缓冲液(pH7.4)孵育巨噬细胞10～16 min，通过减少NaCl(从119～84 mmol/L)来降低细胞外液的渗透浓度(336～286 mmol/L)使细胞体积增大，结果随着细胞的体 积 增大，Gln的代谢增强；相反增加细胞外渗透浓度，细胞体积缩小和Gln代谢减弱。在相同渗 透 浓度下(336 mmol/L)加蔗糖50 mmol/L，比单纯添加25 mmol/L NaCl，Gln的代谢要高得多。 提示巨噬细胞能够通过吞饮摄取蔗糖来诱导细胞体积增大，达到增加Gln代谢的目的。当巨 噬细胞受免疫激活时，Gln代谢的增强，其原因至少有部分与相伴随的细胞体积增大有关。
, http://www.100md.com
3 谷氨酰胺与巨噬细胞的免疫功能
3.1 Gln是巨噬细胞的重要能源底物 巨噬细胞是高代谢 活性细胞，能 源底物的提供是维持其高代谢活性的基本条件。Nemsholm等[7]观察培养条件下 小鼠腹腔巨噬细胞内ATP含量的变化，发现巨噬细胞内ATP的周转率是每分钟10次，而体外灌 注的大鼠心肌细胞内ATP的周转率，在最大工作量时是22次，表明为维持巨噬细胞的高代谢 活性功能，提供充足的代谢能源底物是极其重要的。Spolarics等[11]采用同位素 示踪法，观察葡萄糖、Gln、精氨酸等在大鼠肝Kupffer细胞内的代谢状况，发现约35%的ATP 来源于Gln的氧化，而不到20%的ATP来源于葡萄糖。对小鼠腹腔巨噬细胞的研究，也获得相 同的实验结果。Spittler等[20]人的外周血单核巨噬细胞的体外培养表明，随培养 液中Gln的浓度下降，细胞内ATP含量随之降低。巨噬细胞对Gln高利用率研究结果表明，Gln 是提供和维持巨噬细胞内三羧酸循环的重要代谢底物，是巨噬细胞的主要能量来源。
, http://www.100md.com
3.2 Gln与巨噬细胞吞噬功能 吞噬和吞饮作用是巨噬细 胞的重要功能 ，通过吞噬和吞饮作用清除微生物、外源性颗粒以及肿瘤细胞。体外研究表明，巨噬细胞的 吞噬功能是依赖Gln的浓度，通过摄取合适的颗粒来测定其吞噬功能。Parry-Billings等 [21]用125I标记的酵母细胞，在体外观察小鼠腹腔巨噬细胞摄取125I标 记的酵母细胞能力，当培养液中Gln的浓度大于0.03 mmol/L时，吞噬能力明显增强，Gln的 浓度超过1 mmol/L(相当小鼠血浆浓度)其吞噬能力趋于饱和。Wallace[22]用5 1Cr标记的绵羊红细胞(SRBC)，在体外实验中获得同样的结果。Kweon等[23]在体 内实验中发现，给予患肿瘤的大鼠灌注Gln，能够改善大鼠肾上腺巨噬细胞吞噬SRBC的能力 。
吞噬功能是巨噬细胞能量消耗的过程，涉及底物氧化利用、磷脂和膜蛋白的合成。巨噬细胞 的吞噬和吞饮运动依赖于细胞骨架的完整，细胞骨架结构的损伤将导致细胞的吞噬和吞饮功 能下降。Hinshaw等发现细胞内ATP水平降低，细胞的骨架结构发生改变，影响了细胞的吞噬 功能。同时描述了Gln对细胞内ATP的保护作用，表明细胞内ATP含量是影响巨噬细胞吞噬功 能的因素之一[24]。提示Gln可以通过改变细胞内ATP含量的途径，影响巨噬细胞 的吞噬功能。
, 百拇医药
巨噬细胞的免疫吞噬功能是依赖于细胞表面受体的表达。Dini等[18]研究了大鼠肝 Kupffer细胞的形态学和特异性受体介导的吞噬功能之间的关系，采用LaCBSA标记的胶体金 颗粒测定其吞噬功能，应用三维图像和超微结构的分析结果，显示Kupffer细胞受体介导的 吞噬功能明显受细胞形态的影响(细胞的体积、表面微绒毛和伪足)，随着细胞体积增大、微 绒毛和伪足的数量增加，表面受体的表达增多，其粘附和摄取胶体金颗粒的能力增强。Spit ter等[20]对外周血单核巨噬细胞的研究表明，低浓度的Gln可下调细胞表面受体的 表达，特别是高亲和性IgG(FCrRI/CD64)和CR3(CD11b/CD18)的表达，导致其吞噬致敏的IgG 的能力下降。
3.3 Gln与巨噬细胞的分泌功能 单核巨噬细胞RNA的合 成是调节蛋白 质生成的重要步骤，包括膜蛋白、分泌性蛋白(TNF-α、IL-1和IL-6等)以及合成溶酶体 酶 ，也是免疫应答的基本功能[25]。Gln在巨噬细胞内的代谢大约5%～25%是被完全 氧化，而大部Gln经酶解途径产生谷氨酸、天冬氨酸、氨和CO2。因此，巨噬细胞对Gln的 高利用率，除了提供细胞活动的燃料外，还能为细胞合成RNA和DNA所需的嘌呤提供氮源。Wa llace和Keas[22]研究发现，体外培养的大鼠腹腔巨噬细胞的RNA合成依赖于培养基 中的Gln，当浓度自0.5 mmol/L下降至0.125 mmol/L时，掺入到RNA中的3H-尿嘧啶下降25 % 。表明尿嘧啶的合成过程是需要Gln的，当细胞外的Gln供应不足时，尿嘧啶的含量下 降，导致细胞的RNA合成障碍。Moskovitz等证实在巨噬细胞的最后分化阶段，Gln对于膜磷 脂的mRNA的合成是必需的[26]。
, 百拇医药
细胞因子(TNF-α和IL-1等)是免疫反应的主要调节因子，主要来源于被激活的巨噬细胞， 不同的巨噬细胞亚群分泌细胞因子的种类和能力存在明显差异。Wallace和Keas[22] 研究了体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞，在不同浓度的Gln培养液中，观察巨噬细胞分泌IL - 1的能力，结果当Gln浓度从2 mmol/L降至0.03 mmol/L时，IL-1的分泌量减少了35%；缺乏G l n的培养液中，IL-1的分泌下降60%，表明巨噬细胞合成和分泌IL-1的能力是依赖Gln的。 同样Mos kovitz等[26]也观察到在巨噬细胞的最后分化阶段，Gln对于合成TNF-α和IL-1 是必需的。
3.4 巨噬细胞的抗原呈递功能 巨噬细胞是机体主要的 抗原呈递细胞 ，能够表达大多数Ⅱ型组织相容性抗原复合体(MHC-Ⅱ)，人类MHC-Ⅱ基本基因产物主要是 HLA-DR、HLA-DQ、HLA-DP，大鼠是与MHC-Ⅱ相关联的Ia,在向辅助T淋巴细胞(CD4+)呈 递 抗原起关键作用。外来抗原必需经巨噬细胞的加工后，与MHC-Ⅱ分子结合成复合物表达于 胞膜上，才能特异性地与T淋巴细胞受体(TCR)结合。最近研究表明，单核巨噬细胞MHC-Ⅱ 表达的改变能够预测外科手术后感染的发展，感染和脓毒症死亡率与HLA-DR表达是一致的 [27]。Spittler A等[20]研究正常人外周血单核巨噬细胞在体外培养中 ，Gln浓度对细胞表面抗原表达的影响。当Gln浓度从2 mmol/L(正常细胞培养浓度)下降到50 μmol/L时，使HLA-DR表达下降了58%。当Gln从600 μmol/L浓度(血浆生理浓度)降至20 0 μmol/L浓度(重危病人浓度)时，HLA-DR表达显著下降，同时观察低浓度Gln对细胞表面 抗 原印迹的影响，如IgG的Fc受体(Fc RI/CD64)、补体受体型(CR3/CD11b)、补体受体型(CR4/C D11c)，均有不同程度的下降。这些体外实验结果表明，单核巨噬细胞的抗原呈递功能是依 赖于Gln。巨抗原呈递功能降低，直接影响巨噬细胞的特异性免疫功能，进而波及体液免疫 ，导致机体特异性免疫应答能力的低下。
, http://www.100md.com
许多临床资料表明，创伤、烧伤、脓毒症、外科手术等应激状态下出现的机体免疫功能抑 制，伴随肌肉和血浆Gln浓度的显著下降[28～30]，Gln供应不足可影响单核巨噬细 胞免疫功能的表达，机体的细胞和体液免疫受抑制。因此，维持肌肉和血浆Gln的水平将有 利于改善机体的免疫功能。血浆Gln来源于小肠对食物蛋白质的吸收，体内几种组织如肝、 肌 肉、脂肪和肺等能够合成、释放Gln，其中最重要的是骨骼肌，不仅能合成Gln，而且能够像 肝贮存糖原一样储存Gln，并通过膜表面的特殊载体释放。Newshlme认为在严重创伤、大手 术后和脓毒症期间，蛋白质分解代谢产生的中间产物，除了为糖异生和肝合成蛋白质提供前 体外，还通过维持肌肉内的有效氨基酸池(缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、谷氨酸、天冬氨酸 等)，为肌肉合成Gln提供氮源。因此，在应激状态下，单纯改善机体的氮平衡，而不维持血 浆Gln的浓度，可能是没有价值的，甚至可能损害机体的免疫系统，不利于病人的康复 [31]。术后给予生长激素能够维持肌肉内游离Gln的水平、改善总体的氮平衡。Mjaalan d等观察了胃肠手术后给予TPN支持应用生长激素的效果，发现生长激素能够阻止Gln和氨基 酸从前臂肌肉组织中丢失[32]。
, 百拇医药
综上所述，Gln的高利用率对维持和精确调节巨噬细胞的免疫功能是十分必要的，应激状态 下出现的免疫抑制与低血浆浓度的Gln有关。因此，维持血浆Gln的浓度有利于改善单核巨噬 细胞的功能，是调节机体免疫紊乱的重要环节。提示能够通过特殊的营养支持以增加肌肉和 血浆Gln的浓度，改善机体应激时的免疫功能抑制状态，为临床营养支持治疗提供了一个有 益的途径。
作者简介：施鑫(1963-)，男，江苏南京人，主治医师，医学硕士，从事骨科及创伤外科专业。
参考文献：
[1]Alexader JW.Specific nutrients and the immune response[J] .Nutrition,1995,11:229.
[2]Neu J,Shenoy V,Chakrabarti R.Gluamine nutrition and metabolism:Where do we go from here[J]?FASEB,1996,10:829.
, 百拇医药
[3]Heel TC,McCauley R.Glutamine[J].Arch J Surgery,1996,83:305.
[4]Smith RJ.Glutamine metabolism and its physiologic importance[J].JPEN,1990,14:40s-44s.
[5]Nurjhan N,Bucci A,Perriello G,et al.Glutamine:a major gluconeo genic precursor and vehicle for inter-organ carbon transport in man[J].J Clin Invest,1995,95:272.
[6]Eagle H.Nutrition needs of mammalian cells in tissue culture[J].Science,1955,122:501.
, 百拇医药
[7]Newsholme P,Newsholme EA.Rates of utilization of glucose,glutamine and oleate and formation of end products by mouse pertitoneal macrophages[J].Biochem J,1989,261:211-218.
[8]Pacitti AJ,Inoue Y,Souba WW.Characterization of Na+-independent glutamine trasport[J].JPEN,1990,14:51s-57s.
[9]Rennie MJ,Tadros L,Wilson E.Glutaine transport and its metabolic effects[J].J Nutri,1994,124(8suppl):1530s.
, 百拇医药
[10]Newsholme P,Gorden S,Newsholme EA.Rates of utilization and fates of glucose,glutamine,pyruvate,fatty acids and ketone bodies by mouse macrophages[J].B iochem J,1987,242:631.
[11]Spolarics Z,Lang CH,Bagby GL,et al.Glutamine and fatty acid oxidation are the mai n sources of energy for kupffer and endothelial cells[J].Am J Physiol,1991,261 :G185.
[12]Newsholme P,Newsholme EA.Rates of utilization of glucose,glutamine and oleate and formation of end products by mouse peritoneal macrophages[J].Biochem J,1989,261:211.
, http://www.100md.com
[13]Moskovitz B,Katz Y,Fujita H,et al.Glutamine metabolism and utilizati on relevance to major problems in health care[J].Pharmacol Res,1998,30:61.
[14]McKeehan WL.Glycolysis,glutaminolysis,and cell proliferation[J].Cell Biol Int Rep,1982,6:635.
[15]Costa-Rosa LF.The effect of insulin on macrophage metabolism and function[J].Cell Biochem Funct,1996,14:33.
[16]Rosa LF,Cury Y,Curi R.Effects of insulin,glucocriticoids and thyroid hormones on the activities of key enzymes of glycolysis,glutaminolysis the pentose phosphate pathway and the Krebs cycle in rat macrophages[J].J Edocrinol,1992,135:213.
, 百拇医药
[17]Nibering PH,Zomerdijk TPL.Mean cell volume of human blood leucocytes and resident and activated murine macrophages[J].J Immunol Methods,1990,129:143.
[18]Dini L,Ruzittu M,Carla EC,et al.Relationship between cellar shape and receptor-mediated endocytosis:an ultrastructural and morphometric study in rat kupffer cells[J].Liver,1998,18:99.
[19]Wu G,Flynn NE.Regulation of glutamine and glucose metabolism by cell volume in lumphocytes and macrophages[J].Biochem Biophs Acta,1995,1243:343.
, 百拇医药
[20]Spittler A,Winkoer S.Influence of glutamine on the phenotype and function of human monocytes[J].Blood,1995,86:1564.
[21]Parry-billings M,Evans J,Calder PC,et al.Does glutamine contribute to immunosuppression after major burns[J]?Lancet,1990,336:523.
[22]Wallace C,Keast D.Glutamine and macrophage function[J].Metabolism.1992,41:1016.
[23]Kweon MN,Moriguchi S,Mukai K,et al.Effect of alanylglutamine enriched in fusion on tumor growth and cellular immune function in rats[J].Amino Acids,199 1,16:30s.
, 百拇医药
[24]Hinshaw P,Burger JM,Miller MT.ATP depletion induces and increase in the assembly of a labile pool of polymerized actin in endothelial cells[J].Am J Ph ysiol,1993,c1171-c1179.
[25]Newsholme EA,Calder PC.The proposed role of glutamine in some cells of the immune system and speculative consequences for the whole animal[J].Nutritio n,1997,13:728-730.
[26]Moskovitz B,Katz Y,Singer P,et al.Glutamine metabolism and utilizati on relevance to major problems in health care[J].Pharmacol Res,1994,132:26.
, 百拇医药
[27]Hershman MJ,Chesdle WG,Lindemann A,et al.Monocyte HLA-DR antigen ex pression ch aracterizes clinical outcome in the trauma patient[J].Br J Surg,1990,77:204.
[28]Parry-Billings M,Baigrie RJ,Lamont PM,et al.Effects of major and minor surgery on plasma glutamine and cytokine levels[J].Arch,1992,127:1237.
[29]Lund J,Stjernstrom H,Bergholm U,et al.The exchange of blood borne amino acids in the led during abdominal surgical trauma[J].Clin Sci,1986,71:487.
, 百拇医药
[30]Parry-Ballings M,Evans J,Calder PC,et al.Does glutamine contribute to immunosuppression after major burns[J]?Lancet,1990,336:523-525.
[31]Newshole EA,Colder PC.The proposed role of glutamine in some cells of the immune system and speculative consequences for the whole animal[J].Nutrition,1997,13:729.
[32]Mjaaland M,Unneberg K,Larsson J,et al.Growth hormone after abdominal surgery attenuated forearm glutamine,3-methylhistidine,and total amino acid effux in patients receiving total parenteral nutrition[J].Ann Surg,1993,217:413.
收稿日期：2000-02-23, http://www.100md.com
单位：(南京军区南京总医院解放军普通外科研究所，江苏南京 210002)
关键词：谷氨酰胺；巨噬细胞；代谢；免疫调节
肠外与肠内营养000318 摘要：谷氨酰胺(Gln)是循环和体内氨基酸池中含量最丰富的氨基酸：创伤后机体免疫功能损害与血中谷氨酰胺浓度下降密切相关。单核巨噬细胞是免疫系统的组成部分，在免疫反应中起重要作用。研究表明谷氨酰胺是单核巨噬细胞主要的代谢底物，通过谷氨酰胺酵解途径，为细胞代谢提供能量；为细胞合成DNA和mRNA提供嘌呤、嘧啶、核苷酸生物合成前体；提供氨基葡萄糖，GTP和NAD+合成的氮前体。单核巨噬细胞的免疫功能依赖于谷氨酰胺的含量，包括吞噬功能、细胞因子合成和分泌以及抗原提呈等功能。通过特殊的营养支持以增加肌肉和血中Gln浓度，改善应激状态下的免疫功能抑制，为临床营养支持治疗可提供有益的途径。
, 百拇医药
中图分类号： 文献标识码：A 文章编号：1007-810X(2000)03-0166-05
The metabolism and immunomodulatery effects of glutamine in macrophage
SHI Xin
(Research Insititute of Gengeral Surgery,Jinling Hospital,Nanjing 210002,Jiangsu,China)
Abstract:Glutamine is the most abundant amino acid in the blood and in the free amino acid pool of body.Macrophage is the major cellular component of the immune system,and plays several important roles in the immune response.Decrease in plasma glutamine resulting from trauma may be responsible for the impairment of immune function.Most of the studies have demonstr ated that glutamine serves metabolic roles for macrophage.By glutamiolysis pat hway,glutamine provides ATP for the cellular metabolism,intermediates for the biosyn thesis of parine,pyrimidine and nuclecotides,and nitrogen for the formation of glucosamine,GTP and NAD+.The immune function of macrophage including phagocytos is,synthesis of cytokines,and antigen processing and present ation depends on glutamine.Administration of glutamine is beneficial in stress situations.
, 百拇医药
Key words:Glutamine;Macrophage;Metabolism;Immunomodulation
0 引 言
谷氨酰胺(Gln)是血液循环和体内游离氨基酸池中含量最丰富的氨基酸，健康成人血浆Gln浓 度接 近于 1 mmol/L，大鼠约为0.6 mmol/L[1]。一些组织和细胞是Gln的主要代谢场所 。 愈来愈多的体外研究表明，即使不具备增殖、分化特征的单核巨噬细胞系统(MΦ)对Gln也有 很高 的利用率[2]。单核巨噬细胞系统是机体免疫系统的组成部分，是调节各种免疫紊 乱的 重要环节，不仅具有非特异炎症反应能力(趋化、吞噬、杀菌)，而且具有特异性免疫应答功 能。
1 谷氨酰胺的生物化学特性
1.1 性质与特征 Gln是5碳氨基酸，含有两个氨基(α- 氨基和酰胺基 )。在生理pH条件下，羧基带负电荷，氨基带正电荷，分子净电荷为零，属于中性氨基酸。 由于它含两个氨基特性，决定了它在器官之间氮的运输和作为氨载体的重要性，循环中30%～ 35% 的氨基酸转运依靠Gln完成，故Gln被称之为“氮梭(nitrogen shuttle)[3]。Gln具 有生糖作用，组织细胞摄取循环中的Gln经氧化释放能量，每克分子Gln通过α-酮戊二酸进 入三羧酸循环(the kerb,scycle)完全氧化可产生30克分子的ATP[4]，与葡萄糖(36 molATP/mol)一样是高效的能源底物。Gln所含的酰胺氮对所有细胞的生物合成是绝对必需 的，体内细胞利用Gln可合成嘌呤、嘧啶、氨基糖以及其他氨基酸[5]。因此，Gln 是蛋白质代谢的重要调节因子，促进细胞内蛋白质的合成，减少骨骼肌蛋白的分解，被认为 是机体在应激状态下的条件必需氨基酸，对于调节应激状态下的细胞代谢和调节免疫细胞的 功能具有重要的意义。
, http://www.100md.com
1.2 巨噬细胞内Gln代谢 1995年，Eagle等[6] 研究了组织培 养中的营养需要，注意到Gln的需要量远远超过其他氨基酸。若培养基中缺乏Gln将导致细胞 死亡。一些以快速增殖为特征的细胞对Gln具有很高摄取率，如肠粘膜细胞、免疫细胞、成 纤维细胞等。巨噬细胞是终末细胞，不再具有增殖、分化能力，然而它是代谢活性细胞，以 分泌蛋白质、膜蛋白再循环为特征，对Gln同样具有很高的利用率和代谢率[7]。巨 噬细胞内不含谷氨酰胺合成酶，胞内Gln主要来源于骨骼肌的合成、释放，从血液循环中摄 取，经跨膜转运进入细胞内。Gln跨膜转运需要通过胞膜上的吸收载体系统，主要有两大类 ：①N系统：属于Na+依赖的Gln转运系统；②ASC系统：是Na+依赖的中性氨基酸转运系 统，可转运丝氨酸、天冬酰胺和组氨酸等。N系统受细胞内pH值的调节，ASC系统依赖于激素 调节，共同维持胞内Gln平衡和代谢需要[8，9]。
葡萄糖曾被认为是免疫细胞的唯一能源底物，随着对Gln代谢作用的深入研究，发现Gln也是 免疫细胞的重要能源物质，即使是在静息状态下，巨噬细胞的Gln利用率也很高，甚至高于 对葡萄糖的利用率(表1)。
, 百拇医药
表1 巨噬细胞对Gln的利用率
Table 1 The use of Gln by macrophage 细胞来源
条件
利用率(μmol/h*mg)
文献
小鼠腹腔巨噬细胞
静息
190
7
小鼠腹腔巨噬细胞
静息
90
, 百拇医药
10
大鼠肝Kupffer细胞
静息
6.1
11
巨噬细胞内含有多种Gln的代谢酶，其中涉及几个主要关键酶：如谷氨酰胺酶、谷氨酰胺脱 氢酶、天冬氨酸转氨酶、磷酸烯醇式丙酮酸羧激酶、苹果酸脱氢酶和酮戊二酸脱氢酶等。谷 氨酰胺酶是催化Gln分解成谷氨酸和氨的起始酶，在调节细胞内Gln代谢中负主要责任。对大 鼠巨噬细胞关键酶的研究表明，巨噬细胞能够大量利用Gln，其谷氨酰胺酶的活性是淋巴细 胞的4倍[12]，提示Gln对巨噬细胞的重要性。巨噬细胞中Gln的代谢主要是以不完 全氧化方式进行，Gln分解成谷氨酸后，通过天冬氨酸转氨酶的转氨基作用，而不是经过谷 氨酸脱氢酶的氧化脱氨基作用产生α-酮戊二酸进入三羧酸循环，丙氨酸经天冬氨酸转氨酶 的转氨基作用产生α-酮戊二酸进入三羧酸循环[13]。McKeehan[14]将Gl n部分氧化代谢途径命名为Gln酵解，其主要代谢产物有谷氨酸、天冬氨酸和氨；其次为丙氨 酸、乳酸和丙酮酸。通过酵解途径产生的中间代谢产物，为高活性的巨噬细胞蛋白合成提供 必需的代谢底物，是巨噬细胞行使其免疫功能所必需的。巨噬细胞对Gln连续不断的高代 谢率，为其快速、有效的免疫应答反应提供适宜的条件。Gln在巨噬细胞的代谢特征，至少 有 三个意义：①为巨噬细胞提供能量ATP，维持其高代谢活性；②为细胞合成DNA和mRNA提供嘌 呤、嘧啶、核苷酸生物合成的前体物质；③提供氨基葡萄糖、GTP和NAD+合成的氮前体物 质。
, http://www.100md.com
2 谷氨酰胺代谢调节
2.1 激素 感染、创伤等 应激状态下，血浆糖皮质激素、甲状腺素分泌增加，胰岛素分泌减少，机体处于高代谢状态 ，谷氨酰胺酶是Gln分解代谢的起始酶，其活性受激素的调节。Coast等[15]研究胰 岛素、糖皮质激素、甲状腺素对培养大鼠巨噬细胞酶活性的影响，巨噬细胞来自大鼠腹腔， 在含上述激素的培养液中培养48 h，测定己糖激酶、6-磷酸葡萄糖脱氢酶、谷氨酰胺酶、 枸 橼酸合成酶的最大活性，发现胰岛素增加枸橼酸合成酶和己糖激酶的活性，降低谷氨酰胺酶 和6-磷酸葡萄糖脱氢酶的活性。地塞米松对谷氨酰胺酶和6-磷酸葡萄糖脱氢酶的活性影响与 胰岛素相似，而甲状腺素能增加谷氨酰胺酶和己糖激酶的活性。Rosa等[16]研究指 出，胰岛素对Gln在巨噬细胞代谢中的作用，通过测定谷氨酰胺酶的活性、Gln代谢利用率， 结果显示胰岛素增加糖代谢，减低谷氨酰胺酶的活性，减少Gln代谢利用率。提示机体在应 激状态下，一些激素能够通过调节谷氨酰胺酶的活性，促进Gln的代谢，增加巨噬细胞对Gln 的利用率，调节巨噬细胞的功能。
, http://www.100md.com
2.2 自身调节 巨噬细胞被激活后，代谢活性明显增加 ，表现为细胞 内对Gln的摄取和利用比静息状态下显著升高。在其活化的早期，伴随着巨噬细胞体积明显 增大[17，18]。Wu等[19]推测巨噬细胞体积改变能够调节胞内Gln代谢， 实验观察了渗透浓度和蔗糖介导的巨噬细胞体积改变对Gln代谢的影响，在37℃条件下，用K rebs-Henseleit碳酸氢盐缓冲液(pH7.4)孵育巨噬细胞10～16 min，通过减少NaCl(从119～84 mmol/L)来降低细胞外液的渗透浓度(336～286 mmol/L)使细胞体积增大，结果随着细胞的体 积 增大，Gln的代谢增强；相反增加细胞外渗透浓度，细胞体积缩小和Gln代谢减弱。在相同渗 透 浓度下(336 mmol/L)加蔗糖50 mmol/L，比单纯添加25 mmol/L NaCl，Gln的代谢要高得多。 提示巨噬细胞能够通过吞饮摄取蔗糖来诱导细胞体积增大，达到增加Gln代谢的目的。当巨 噬细胞受免疫激活时，Gln代谢的增强，其原因至少有部分与相伴随的细胞体积增大有关。
, http://www.100md.com
3 谷氨酰胺与巨噬细胞的免疫功能
3.1 Gln是巨噬细胞的重要能源底物 巨噬细胞是高代谢 活性细胞，能 源底物的提供是维持其高代谢活性的基本条件。Nemsholm等[7]观察培养条件下 小鼠腹腔巨噬细胞内ATP含量的变化，发现巨噬细胞内ATP的周转率是每分钟10次，而体外灌 注的大鼠心肌细胞内ATP的周转率，在最大工作量时是22次，表明为维持巨噬细胞的高代谢 活性功能，提供充足的代谢能源底物是极其重要的。Spolarics等[11]采用同位素 示踪法，观察葡萄糖、Gln、精氨酸等在大鼠肝Kupffer细胞内的代谢状况，发现约35%的ATP 来源于Gln的氧化，而不到20%的ATP来源于葡萄糖。对小鼠腹腔巨噬细胞的研究，也获得相 同的实验结果。Spittler等[20]人的外周血单核巨噬细胞的体外培养表明，随培养 液中Gln的浓度下降，细胞内ATP含量随之降低。巨噬细胞对Gln高利用率研究结果表明，Gln 是提供和维持巨噬细胞内三羧酸循环的重要代谢底物，是巨噬细胞的主要能量来源。
, http://www.100md.com
3.2 Gln与巨噬细胞吞噬功能 吞噬和吞饮作用是巨噬细 胞的重要功能 ，通过吞噬和吞饮作用清除微生物、外源性颗粒以及肿瘤细胞。体外研究表明，巨噬细胞的 吞噬功能是依赖Gln的浓度，通过摄取合适的颗粒来测定其吞噬功能。Parry-Billings等 [21]用125I标记的酵母细胞，在体外观察小鼠腹腔巨噬细胞摄取125I标 记的酵母细胞能力，当培养液中Gln的浓度大于0.03 mmol/L时，吞噬能力明显增强，Gln的 浓度超过1 mmol/L(相当小鼠血浆浓度)其吞噬能力趋于饱和。Wallace[22]用5 1Cr标记的绵羊红细胞(SRBC)，在体外实验中获得同样的结果。Kweon等[23]在体 内实验中发现，给予患肿瘤的大鼠灌注Gln，能够改善大鼠肾上腺巨噬细胞吞噬SRBC的能力 。
吞噬功能是巨噬细胞能量消耗的过程，涉及底物氧化利用、磷脂和膜蛋白的合成。巨噬细胞 的吞噬和吞饮运动依赖于细胞骨架的完整，细胞骨架结构的损伤将导致细胞的吞噬和吞饮功 能下降。Hinshaw等发现细胞内ATP水平降低，细胞的骨架结构发生改变，影响了细胞的吞噬 功能。同时描述了Gln对细胞内ATP的保护作用，表明细胞内ATP含量是影响巨噬细胞吞噬功 能的因素之一[24]。提示Gln可以通过改变细胞内ATP含量的途径，影响巨噬细胞 的吞噬功能。
, 百拇医药
巨噬细胞的免疫吞噬功能是依赖于细胞表面受体的表达。Dini等[18]研究了大鼠肝 Kupffer细胞的形态学和特异性受体介导的吞噬功能之间的关系，采用LaCBSA标记的胶体金 颗粒测定其吞噬功能，应用三维图像和超微结构的分析结果，显示Kupffer细胞受体介导的 吞噬功能明显受细胞形态的影响(细胞的体积、表面微绒毛和伪足)，随着细胞体积增大、微 绒毛和伪足的数量增加，表面受体的表达增多，其粘附和摄取胶体金颗粒的能力增强。Spit ter等[20]对外周血单核巨噬细胞的研究表明，低浓度的Gln可下调细胞表面受体的 表达，特别是高亲和性IgG(FCrRI/CD64)和CR3(CD11b/CD18)的表达，导致其吞噬致敏的IgG 的能力下降。
3.3 Gln与巨噬细胞的分泌功能 单核巨噬细胞RNA的合 成是调节蛋白 质生成的重要步骤，包括膜蛋白、分泌性蛋白(TNF-α、IL-1和IL-6等)以及合成溶酶体 酶 ，也是免疫应答的基本功能[25]。Gln在巨噬细胞内的代谢大约5%～25%是被完全 氧化，而大部Gln经酶解途径产生谷氨酸、天冬氨酸、氨和CO2。因此，巨噬细胞对Gln的 高利用率，除了提供细胞活动的燃料外，还能为细胞合成RNA和DNA所需的嘌呤提供氮源。Wa llace和Keas[22]研究发现，体外培养的大鼠腹腔巨噬细胞的RNA合成依赖于培养基 中的Gln，当浓度自0.5 mmol/L下降至0.125 mmol/L时，掺入到RNA中的3H-尿嘧啶下降25 % 。表明尿嘧啶的合成过程是需要Gln的，当细胞外的Gln供应不足时，尿嘧啶的含量下 降，导致细胞的RNA合成障碍。Moskovitz等证实在巨噬细胞的最后分化阶段，Gln对于膜磷 脂的mRNA的合成是必需的[26]。
, 百拇医药
细胞因子(TNF-α和IL-1等)是免疫反应的主要调节因子，主要来源于被激活的巨噬细胞， 不同的巨噬细胞亚群分泌细胞因子的种类和能力存在明显差异。Wallace和Keas[22] 研究了体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞，在不同浓度的Gln培养液中，观察巨噬细胞分泌IL - 1的能力，结果当Gln浓度从2 mmol/L降至0.03 mmol/L时，IL-1的分泌量减少了35%；缺乏G l n的培养液中，IL-1的分泌下降60%，表明巨噬细胞合成和分泌IL-1的能力是依赖Gln的。 同样Mos kovitz等[26]也观察到在巨噬细胞的最后分化阶段，Gln对于合成TNF-α和IL-1 是必需的。
3.4 巨噬细胞的抗原呈递功能 巨噬细胞是机体主要的 抗原呈递细胞 ，能够表达大多数Ⅱ型组织相容性抗原复合体(MHC-Ⅱ)，人类MHC-Ⅱ基本基因产物主要是 HLA-DR、HLA-DQ、HLA-DP，大鼠是与MHC-Ⅱ相关联的Ia,在向辅助T淋巴细胞(CD4+)呈 递 抗原起关键作用。外来抗原必需经巨噬细胞的加工后，与MHC-Ⅱ分子结合成复合物表达于 胞膜上，才能特异性地与T淋巴细胞受体(TCR)结合。最近研究表明，单核巨噬细胞MHC-Ⅱ 表达的改变能够预测外科手术后感染的发展，感染和脓毒症死亡率与HLA-DR表达是一致的 [27]。Spittler A等[20]研究正常人外周血单核巨噬细胞在体外培养中 ，Gln浓度对细胞表面抗原表达的影响。当Gln浓度从2 mmol/L(正常细胞培养浓度)下降到50 μmol/L时，使HLA-DR表达下降了58%。当Gln从600 μmol/L浓度(血浆生理浓度)降至20 0 μmol/L浓度(重危病人浓度)时，HLA-DR表达显著下降，同时观察低浓度Gln对细胞表面 抗 原印迹的影响，如IgG的Fc受体(Fc RI/CD64)、补体受体型(CR3/CD11b)、补体受体型(CR4/C D11c)，均有不同程度的下降。这些体外实验结果表明，单核巨噬细胞的抗原呈递功能是依 赖于Gln。巨抗原呈递功能降低，直接影响巨噬细胞的特异性免疫功能，进而波及体液免疫 ，导致机体特异性免疫应答能力的低下。
, http://www.100md.com
许多临床资料表明，创伤、烧伤、脓毒症、外科手术等应激状态下出现的机体免疫功能抑 制，伴随肌肉和血浆Gln浓度的显著下降[28～30]，Gln供应不足可影响单核巨噬细 胞免疫功能的表达，机体的细胞和体液免疫受抑制。因此，维持肌肉和血浆Gln的水平将有 利于改善机体的免疫功能。血浆Gln来源于小肠对食物蛋白质的吸收，体内几种组织如肝、 肌 肉、脂肪和肺等能够合成、释放Gln，其中最重要的是骨骼肌，不仅能合成Gln，而且能够像 肝贮存糖原一样储存Gln，并通过膜表面的特殊载体释放。Newshlme认为在严重创伤、大手 术后和脓毒症期间，蛋白质分解代谢产生的中间产物，除了为糖异生和肝合成蛋白质提供前 体外，还通过维持肌肉内的有效氨基酸池(缬氨酸、亮氨酸、异亮氨酸、谷氨酸、天冬氨酸 等)，为肌肉合成Gln提供氮源。因此，在应激状态下，单纯改善机体的氮平衡，而不维持血 浆Gln的浓度，可能是没有价值的，甚至可能损害机体的免疫系统，不利于病人的康复 [31]。术后给予生长激素能够维持肌肉内游离Gln的水平、改善总体的氮平衡。Mjaalan d等观察了胃肠手术后给予TPN支持应用生长激素的效果，发现生长激素能够阻止Gln和氨基 酸从前臂肌肉组织中丢失[32]。
, 百拇医药
综上所述，Gln的高利用率对维持和精确调节巨噬细胞的免疫功能是十分必要的，应激状态 下出现的免疫抑制与低血浆浓度的Gln有关。因此，维持血浆Gln的浓度有利于改善单核巨噬 细胞的功能，是调节机体免疫紊乱的重要环节。提示能够通过特殊的营养支持以增加肌肉和 血浆Gln的浓度，改善机体应激时的免疫功能抑制状态，为临床营养支持治疗提供了一个有 益的途径。
作者简介：施鑫(1963-)，男，江苏南京人，主治医师，医学硕士，从事骨科及创伤外科专业。
参考文献：
[1]Alexader JW.Specific nutrients and the immune response[J] .Nutrition,1995,11:229.
[2]Neu J,Shenoy V,Chakrabarti R.Gluamine nutrition and metabolism:Where do we go from here[J]?FASEB,1996,10:829.
, 百拇医药
[3]Heel TC,McCauley R.Glutamine[J].Arch J Surgery,1996,83:305.
[4]Smith RJ.Glutamine metabolism and its physiologic importance[J].JPEN,1990,14:40s-44s.
[5]Nurjhan N,Bucci A,Perriello G,et al.Glutamine:a major gluconeo genic precursor and vehicle for inter-organ carbon transport in man[J].J Clin Invest,1995,95:272.
[6]Eagle H.Nutrition needs of mammalian cells in tissue culture[J].Science,1955,122:501.
, 百拇医药
[7]Newsholme P,Newsholme EA.Rates of utilization of glucose,glutamine and oleate and formation of end products by mouse pertitoneal macrophages[J].Biochem J,1989,261:211-218.
[8]Pacitti AJ,Inoue Y,Souba WW.Characterization of Na+-independent glutamine trasport[J].JPEN,1990,14:51s-57s.
[9]Rennie MJ,Tadros L,Wilson E.Glutaine transport and its metabolic effects[J].J Nutri,1994,124(8suppl):1530s.
, 百拇医药
[10]Newsholme P,Gorden S,Newsholme EA.Rates of utilization and fates of glucose,glutamine,pyruvate,fatty acids and ketone bodies by mouse macrophages[J].B iochem J,1987,242:631.
[11]Spolarics Z,Lang CH,Bagby GL,et al.Glutamine and fatty acid oxidation are the mai n sources of energy for kupffer and endothelial cells[J].Am J Physiol,1991,261 :G185.
[12]Newsholme P,Newsholme EA.Rates of utilization of glucose,glutamine and oleate and formation of end products by mouse peritoneal macrophages[J].Biochem J,1989,261:211.
, http://www.100md.com
[13]Moskovitz B,Katz Y,Fujita H,et al.Glutamine metabolism and utilizati on relevance to major problems in health care[J].Pharmacol Res,1998,30:61.
[14]McKeehan WL.Glycolysis,glutaminolysis,and cell proliferation[J].Cell Biol Int Rep,1982,6:635.
[15]Costa-Rosa LF.The effect of insulin on macrophage metabolism and function[J].Cell Biochem Funct,1996,14:33.
[16]Rosa LF,Cury Y,Curi R.Effects of insulin,glucocriticoids and thyroid hormones on the activities of key enzymes of glycolysis,glutaminolysis the pentose phosphate pathway and the Krebs cycle in rat macrophages[J].J Edocrinol,1992,135:213.
, 百拇医药
[17]Nibering PH,Zomerdijk TPL.Mean cell volume of human blood leucocytes and resident and activated murine macrophages[J].J Immunol Methods,1990,129:143.
[18]Dini L,Ruzittu M,Carla EC,et al.Relationship between cellar shape and receptor-mediated endocytosis:an ultrastructural and morphometric study in rat kupffer cells[J].Liver,1998,18:99.
[19]Wu G,Flynn NE.Regulation of glutamine and glucose metabolism by cell volume in lumphocytes and macrophages[J].Biochem Biophs Acta,1995,1243:343.
, 百拇医药
[20]Spittler A,Winkoer S.Influence of glutamine on the phenotype and function of human monocytes[J].Blood,1995,86:1564.
[21]Parry-billings M,Evans J,Calder PC,et al.Does glutamine contribute to immunosuppression after major burns[J]?Lancet,1990,336:523.
[22]Wallace C,Keast D.Glutamine and macrophage function[J].Metabolism.1992,41:1016.
[23]Kweon MN,Moriguchi S,Mukai K,et al.Effect of alanylglutamine enriched in fusion on tumor growth and cellular immune function in rats[J].Amino Acids,199 1,16:30s.
, 百拇医药
[24]Hinshaw P,Burger JM,Miller MT.ATP depletion induces and increase in the assembly of a labile pool of polymerized actin in endothelial cells[J].Am J Ph ysiol,1993,c1171-c1179.
[25]Newsholme EA,Calder PC.The proposed role of glutamine in some cells of the immune system and speculative consequences for the whole animal[J].Nutritio n,1997,13:728-730.
[26]Moskovitz B,Katz Y,Singer P,et al.Glutamine metabolism and utilizati on relevance to major problems in health care[J].Pharmacol Res,1994,132:26.
, 百拇医药
[27]Hershman MJ,Chesdle WG,Lindemann A,et al.Monocyte HLA-DR antigen ex pression ch aracterizes clinical outcome in the trauma patient[J].Br J Surg,1990,77:204.
[28]Parry-Billings M,Baigrie RJ,Lamont PM,et al.Effects of major and minor surgery on plasma glutamine and cytokine levels[J].Arch,1992,127:1237.
[29]Lund J,Stjernstrom H,Bergholm U,et al.The exchange of blood borne amino acids in the led during abdominal surgical trauma[J].Clin Sci,1986,71:487.
, 百拇医药
[30]Parry-Ballings M,Evans J,Calder PC,et al.Does glutamine contribute to immunosuppression after major burns[J]?Lancet,1990,336:523-525.
[31]Newshole EA,Colder PC.The proposed role of glutamine in some cells of the immune system and speculative consequences for the whole animal[J].Nutrition,1997,13:729.
[32]Mjaaland M,Unneberg K,Larsson J,et al.Growth hormone after abdominal surgery attenuated forearm glutamine,3-methylhistidine,and total amino acid effux in patients receiving total parenteral nutrition[J].Ann Surg,1993,217:413.
收稿日期：2000-02-23, http://www.100md.com