黄连上清丸质量控制
作者：张丽娟 宋新波 夏广萍 李锦 郭俊华
单位：张丽娟 宋新波 夏广萍 李锦(天津中医学院 300193)；郭俊华(天津中医研究所)
关键词：
中草药000313 黄连上清丸由天津达仁堂制药厂生产，为传统中成药大蜜丸。用于上焦风热，头晕脑胀，牙龈肿痛，口舌生疮，咽喉红肿，耳痛耳鸣，暴发火眼，大便干燥，小便黄赤等症。对黄连上清丸进行显微鉴定，检出其主要组成药物17种，避开交叉，排除干扰，描述各药具鉴别价值的显微特征，并绘图。同时进行薄层层析，检出其中川芎和甘草，与显微鉴定结论吻合，为黄连上清丸质量控制提供参考。
1 显微鉴定[1]
①黄连：a)石细胞：鲜黄色，类长方形，边缘不平整，直径约31 μm，长65 μm，壁厚10～14 μm，层纹明显，纹孔小，孔沟细。b)韧皮纤维：鲜黄色，较粗短，纺锤形，末端钝圆，长102～105 μm，直径15～20 μm，壁厚，纹孔较稀，孔沟较粗。
, http://www.100md.com
②栀子：a)种皮石细胞：淡黄色，类长方形，直径约61 μm，长约112 μm，壁厚约24 μm，呈瘤状伸入胞腔；孔沟较宽，末端常膨大呈囊状；胞腔不规则，充满棕色物。b)果皮表皮细胞：淡黄色，表面观呈类长方形或方形，垂周壁稍厚，胞腔内含棕色物。
③连翘：石细胞，绿色，胞腔黄棕色，类长方形，直径约34 μm，壁厚12～14 μm，长约71 μm，一侧壁较薄。
④蔓荆子：外果皮细胞，表面观呈类多角形，表面具细密角质条纹，可见圆形毛茸脱落痕。
⑤防风：a)油管：多破碎，管道中含黄棕色条块状分泌物，直径约20 μm，周围薄壁细胞细长而皱缩，细胞界限不明显。b)韧皮薄壁细胞：纵长，末端渐尖，多不完整，直径14～17 μm壁薄。
⑥荆芥穗：a)非腹毛：基部直径约17 μm，长约78 μm，壁稍厚，上部细胞具细小疣状突起，下部一细胞有角质纵条纹。b)果皮石细胞：黄色，表面观呈类多角形，直径约21 μm，垂周壁深波状弯曲，纹孔稀疏。
, 百拇医药
⑦白芷：草酸钙簇晶，存在于薄壁细胞中，呈圆簇状或类圆形，半透明，直径7～9 μm。
⑧黄芩：a)石细胞：淡黄色，呈椭圆形，直径约37 μm，长68 μm，壁厚约11 μm，孔沟有的较宽。b)韧皮纤维：淡黄色，呈梭形，两端稍钝圆，长约68 μm，直径约17 μm，壁甚厚，孔沟明显。
⑨菊花：花粉粒，黄色，类圆形，直径24～25 μm，表面有网状纹饰并有刺，刺长约3 μm。
10薄荷：叶片碎片，下表皮细胞垂周壁弯曲，气孔较多，副卫细胞2个，直轴式。
大黄：草酸钙簇晶，较大，直径37～54 μm，棱角多明显，短钝。
黄柏：a)晶鞘纤维：鲜黄色，成束，直径约24 μm，壁极厚，孔沟一般不明显，胞腔线形。含晶细胞密集。b)石细胞：鲜黄色，呈不规则分枝状，形大，长约149 μm，壁较薄，胞腔甚大，层纹明显，孔沟较少。
桔梗：菊糖，用乙醇装片，菊糖团块类圆形或不规则形，有的有放射状纹理。
川芎：木栓细胞，黄棕色，表面观呈类多角形或长方形，壁薄，微波状弯曲。
旋覆花[2]：a)冠毛：为多列性非腺毛，边缘细胞稍向外突出。b)花粉粒：黄色，类球形，直径约24 μm，外壁有刺，长约3 μm，具3个萌发孔。
甘草：晶鞘纤维，淡黄色，直径约10 μm，壁极厚，孔沟不明显，胞腔线形，包绕有含晶细胞。
石膏[2]：晶体碎片，无色透明，纤维状。见图1。
, 百拇医药
1-a-黄连石细胞 b-韧皮纤维 2-a-栀子种皮石细胞 b-果皮表皮细胞 3-连翘石细胞 4-蔓荆子外果皮细胞 5-a-防风油管碎片 b-韧皮薄壁细胞 6-a-荆芥穗非腺毛 b-果皮石细胞 7-白芷草酸钙簇晶 8-a-黄芩石细胞 b-韧皮纤维 9-菊花花粉粒 10-薄荷叶片碎片 11-大黄草酸钙簇晶 12-a-黄柏晶鞘纤维 b-石细胞 13-桔梗菊糖 14-川芎木栓细胞 15-a-旋覆花冠毛 b-花粉粒 16-甘草晶鞘纤维 17-石膏晶体碎片
图1 黄连上清丸显微特征图
2 薄层色谱鉴别
2.1 川芎：样品液：取黄连上清丸2丸(12 g)，剪碎，加硅藻土18 g，研匀，加乙醚60 mL，超声提取25 min，过滤，滤液挥干乙醚，残渣以乙酸乙酯1 mL溶解，即得。
阴性对照液：按处方量自制缺川芎的成药12 g，与样品平行操作，同法制备。
, 百拇医药
川芎药材对照液：取川芎药材0.5 g，粉碎，加乙醚4 mL，之后与样品同步提取，滤液挥干乙醚，残渣加乙酸乙酯1 mL溶解，即得。
吸取川芎药材对照液、样品液、阴性对照溶各3 mL，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(9∶1)为展开剂，以氨水碱化环境后展开，展距9 cm。取出，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视。结果显示：在样品色谱中，与对照药材色谱相应的位置上有两个相同的亮蓝色荧光斑点，而阴性对照色谱则无[3]。见图2。
川芎：1-对照药材 甘草：1-甘草酸铵 2-对
2-黄连上清丸 照药材 3-黄连上清丸
3-阴性对照药材 4-阴性对照药材
, http://www.100md.com
图2 样品薄层色谱
2.2 甘草：样品液：取黄连上清丸2丸(12 g)，剪碎，加硅藻土18 g，研匀。加石油醚200 mL，加热回流提取2 h，过滤，滤渣以50%的乙醇200 mL加热回流提取3 h，过滤。取滤液50 mL浓缩至20 mL。取浓缩液5 mL，加水2.5 mL，以10%氨水碱化后用氯仿提取3次，每次10 mL。合并氯仿液，蒸干。残渣用乙醇2 mL溶解，即得。
阴性对照液：按处方量自制缺甘草的成药12 g，与样品平行操作，同法制备。
甘草药材对照液：取甘草药材0.2 g，粉碎，加乙醚25 mL，之后与样品同步提取，蒸干氯仿后，残渣用乙醇2 mL溶解，即得。
甘草酸铵对照液：取甘草酸铵标准品2 mg，加乙醇 1 mL溶解，即得。
吸取甘草酸铵对照液、甘草药材对照液、样品液、阴性对照液各3 μL，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(6∶1∶3)为展开剂，展开，展距9 cm，取出，晾干，以1%碘的四氯化碳溶液喷雾显色，烘至斑点显色清晰。在日光下观察，结果显示：样品色谱中，与甘草酸铵色谱相应的位置上有一相同的黄色斑点；与甘草药材色谱相应的位置上有3个相同的黄色斑点，而阴性对照色谱则无[4]。见图2。
参考文
1，徐国钧，等.中药材粉末显微鉴定.北京：人民卫生出版社，1986
2，李家实，等.中药鉴定学.上海：上海科学技术出版社，1997：358、657
3，中华人民共和国药典.一部.广州：广东科技出版社，1995：374
4，沙世炎.中草药有效成分分析法.北京：人民卫生出版社，1982：86
(收稿日期：1999-07-13), http://www.100md.com
单位：张丽娟 宋新波 夏广萍 李锦(天津中医学院 300193)；郭俊华(天津中医研究所)
关键词：
中草药000313 黄连上清丸由天津达仁堂制药厂生产，为传统中成药大蜜丸。用于上焦风热，头晕脑胀，牙龈肿痛，口舌生疮，咽喉红肿，耳痛耳鸣，暴发火眼，大便干燥，小便黄赤等症。对黄连上清丸进行显微鉴定，检出其主要组成药物17种，避开交叉，排除干扰，描述各药具鉴别价值的显微特征，并绘图。同时进行薄层层析，检出其中川芎和甘草，与显微鉴定结论吻合，为黄连上清丸质量控制提供参考。
1 显微鉴定[1]
①黄连：a)石细胞：鲜黄色，类长方形，边缘不平整，直径约31 μm，长65 μm，壁厚10～14 μm，层纹明显，纹孔小，孔沟细。b)韧皮纤维：鲜黄色，较粗短，纺锤形，末端钝圆，长102～105 μm，直径15～20 μm，壁厚，纹孔较稀，孔沟较粗。
, http://www.100md.com
②栀子：a)种皮石细胞：淡黄色，类长方形，直径约61 μm，长约112 μm，壁厚约24 μm，呈瘤状伸入胞腔；孔沟较宽，末端常膨大呈囊状；胞腔不规则，充满棕色物。b)果皮表皮细胞：淡黄色，表面观呈类长方形或方形，垂周壁稍厚，胞腔内含棕色物。
③连翘：石细胞，绿色，胞腔黄棕色，类长方形，直径约34 μm，壁厚12～14 μm，长约71 μm，一侧壁较薄。
④蔓荆子：外果皮细胞，表面观呈类多角形，表面具细密角质条纹，可见圆形毛茸脱落痕。
⑤防风：a)油管：多破碎，管道中含黄棕色条块状分泌物，直径约20 μm，周围薄壁细胞细长而皱缩，细胞界限不明显。b)韧皮薄壁细胞：纵长，末端渐尖，多不完整，直径14～17 μm壁薄。
⑥荆芥穗：a)非腹毛：基部直径约17 μm，长约78 μm，壁稍厚，上部细胞具细小疣状突起，下部一细胞有角质纵条纹。b)果皮石细胞：黄色，表面观呈类多角形，直径约21 μm，垂周壁深波状弯曲，纹孔稀疏。
, 百拇医药
⑦白芷：草酸钙簇晶，存在于薄壁细胞中，呈圆簇状或类圆形，半透明，直径7～9 μm。
⑧黄芩：a)石细胞：淡黄色，呈椭圆形，直径约37 μm，长68 μm，壁厚约11 μm，孔沟有的较宽。b)韧皮纤维：淡黄色，呈梭形，两端稍钝圆，长约68 μm，直径约17 μm，壁甚厚，孔沟明显。
⑨菊花：花粉粒，黄色，类圆形，直径24～25 μm，表面有网状纹饰并有刺，刺长约3 μm。
10薄荷：叶片碎片，下表皮细胞垂周壁弯曲，气孔较多，副卫细胞2个，直轴式。
大黄：草酸钙簇晶，较大，直径37～54 μm，棱角多明显，短钝。黄柏：a)晶鞘纤维：鲜黄色，成束，直径约24 μm，壁极厚，孔沟一般不明显，胞腔线形。含晶细胞密集。b)石细胞：鲜黄色，呈不规则分枝状，形大，长约149 μm，壁较薄，胞腔甚大，层纹明显，孔沟较少。桔梗：菊糖，用乙醇装片，菊糖团块类圆形或不规则形，有的有放射状纹理。川芎：木栓细胞，黄棕色，表面观呈类多角形或长方形，壁薄，微波状弯曲。旋覆花[2]：a)冠毛：为多列性非腺毛，边缘细胞稍向外突出。b)花粉粒：黄色，类球形，直径约24 μm，外壁有刺，长约3 μm，具3个萌发孔。甘草：晶鞘纤维，淡黄色，直径约10 μm，壁极厚，孔沟不明显，胞腔线形，包绕有含晶细胞。石膏[2]：晶体碎片，无色透明，纤维状。见图1。, 百拇医药
1-a-黄连石细胞 b-韧皮纤维 2-a-栀子种皮石细胞 b-果皮表皮细胞 3-连翘石细胞 4-蔓荆子外果皮细胞 5-a-防风油管碎片 b-韧皮薄壁细胞 6-a-荆芥穗非腺毛 b-果皮石细胞 7-白芷草酸钙簇晶 8-a-黄芩石细胞 b-韧皮纤维 9-菊花花粉粒 10-薄荷叶片碎片 11-大黄草酸钙簇晶 12-a-黄柏晶鞘纤维 b-石细胞 13-桔梗菊糖 14-川芎木栓细胞 15-a-旋覆花冠毛 b-花粉粒 16-甘草晶鞘纤维 17-石膏晶体碎片
图1 黄连上清丸显微特征图
2 薄层色谱鉴别
2.1 川芎：样品液：取黄连上清丸2丸(12 g)，剪碎，加硅藻土18 g，研匀，加乙醚60 mL，超声提取25 min，过滤，滤液挥干乙醚，残渣以乙酸乙酯1 mL溶解，即得。
阴性对照液：按处方量自制缺川芎的成药12 g，与样品平行操作，同法制备。
, 百拇医药
川芎药材对照液：取川芎药材0.5 g，粉碎，加乙醚4 mL，之后与样品同步提取，滤液挥干乙醚，残渣加乙酸乙酯1 mL溶解，即得。
吸取川芎药材对照液、样品液、阴性对照溶各3 mL，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以正己烷-乙酸乙酯(9∶1)为展开剂，以氨水碱化环境后展开，展距9 cm。取出，晾干，置紫外光灯(365 nm)下检视。结果显示：在样品色谱中，与对照药材色谱相应的位置上有两个相同的亮蓝色荧光斑点，而阴性对照色谱则无[3]。见图2。
川芎：1-对照药材 甘草：1-甘草酸铵 2-对
2-黄连上清丸 照药材 3-黄连上清丸
3-阴性对照药材 4-阴性对照药材
, http://www.100md.com
图2 样品薄层色谱
2.2 甘草：样品液：取黄连上清丸2丸(12 g)，剪碎，加硅藻土18 g，研匀。加石油醚200 mL，加热回流提取2 h，过滤，滤渣以50%的乙醇200 mL加热回流提取3 h，过滤。取滤液50 mL浓缩至20 mL。取浓缩液5 mL，加水2.5 mL，以10%氨水碱化后用氯仿提取3次，每次10 mL。合并氯仿液，蒸干。残渣用乙醇2 mL溶解，即得。
阴性对照液：按处方量自制缺甘草的成药12 g，与样品平行操作，同法制备。
甘草药材对照液：取甘草药材0.2 g，粉碎，加乙醚25 mL，之后与样品同步提取，蒸干氯仿后，残渣用乙醇2 mL溶解，即得。
甘草酸铵对照液：取甘草酸铵标准品2 mg，加乙醇 1 mL溶解，即得。
吸取甘草酸铵对照液、甘草药材对照液、样品液、阴性对照液各3 μL，分别点于同一高效硅胶G薄层板上，以正丁醇-冰醋酸-水(6∶1∶3)为展开剂，展开，展距9 cm，取出，晾干，以1%碘的四氯化碳溶液喷雾显色，烘至斑点显色清晰。在日光下观察，结果显示：样品色谱中，与甘草酸铵色谱相应的位置上有一相同的黄色斑点；与甘草药材色谱相应的位置上有3个相同的黄色斑点，而阴性对照色谱则无[4]。见图2。
参考文
1，徐国钧，等.中药材粉末显微鉴定.北京：人民卫生出版社，1986
2，李家实，等.中药鉴定学.上海：上海科学技术出版社，1997：358、657
3，中华人民共和国药典.一部.广州：广东科技出版社，1995：374
4，沙世炎.中草药有效成分分析法.北京：人民卫生出版社，1982：86
(收稿日期：1999-07-13), http://www.100md.com