新肝康对乙肝模型鼠免疫功能影响的实验研究
作者：许洪霞 纪传珍 许艳霞 王雅贤
单位：许洪霞(哈尔滨市职工医学院，150080)；纪传珍(鸡西煤炭高等医学专科学校)；许艳霞(哈尔滨市红十字儿童医院)；王雅贤(黑龙江中医药大学免疫室)
关键词：
中国急救医学000330 我院自1992年以来，开始应用新肝康治疗乙型肝炎、肝硬化取得了较为满意的疗效，几年来治愈的病人未见复发。为进一步探求新肝康治疗乙型肝炎的免疫学机理，我们观察了新肝康对乙肝模型鼠T细胞亚群和脾淋巴细胞产生IL-2的影响，以期为临床用药提供科学的理论依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物 昆明种小白鼠30只，体重18～22 g，雌雄兼用，由黑龙江中医药大学动物室提供。小鼠随机分三组，每组10只，分别设为正常对照组、模型对照组、药物组。
, http://www.100md.com
1.2 动物模型 小白鼠环磷酰胺30 mg/kg间日肌注1次，2次后改为5 mg/kg每周1次，注射药物同时经肝脏直接注射纯化HBsAg 0.05 ml。
1.3 给药方式 药物组于造模当日以新肝康灌胃给药，每日1次0.5 ml，用药1个月。另二组分别以生理盐水灌胃。
1.4 实验方法 脱颈椎处死小鼠，无菌取脾，制备脾细胞悬液。调整脾细胞浓度为2×106/ml，进行T细胞亚群检测(APAAP试剂盒购自北京邦定生物医学公司)；另取脾细胞调整浓度为1×107/ml，加ConA 5 μg/ml，于CO2培养箱中37℃孵育48 h，离心收获上清，进行IL-2测定(酶联免疫检测试剂盒购自晶美生物医学公司)。严格按说明书操作。
2 结果
表1和表2结果显示，乙肝模型鼠L3T4+细胞数、L3T4+/Lyt-2+细胞比值及IL-2水平均明显低于正常对照组(P<0.05)；Lyt-2+细胞明显高于正常组(P<0.05)；而药物组模型鼠L3T4+细胞数、L3T4+/Lyt-2+细胞比值及IL-2水平均高于模型对照组(P<0.05)，与正常对照组比值无显著性差异(P>0.05)；Lyt-2+细胞数明显低于乙肝模型鼠(P<0.05)，但与正常组比无显著性差异(P>0.05)。
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表1 新肝康对模型鼠T细胞亚群的影响(
±s)
Thy-1+
细胞(%)
L3T4+
细胞(%)
Lyt-2+
细胞(%)
L3T4+/
Lyt-2+比值
, http://www.100md.com
正常对照组
(n=10)
36.17±5.64
26.78±2.35
13.68±2.56
1.89±0.47
模型对照组
(n=10)
34.96±4.16
22.67±1.58*
15.96±2.14*
, 百拇医药
1.39±0.39*
药物组
(n=10)
35.36±4.28
26.13±2.11△
13.12±1.96△
1.81±0.45△
*与正常对照组比P<0.05 △与模型对照组比P<0.05表2 新肝康对模型鼠IL-2水平的影响(±s)
n(只)
, 百拇医药
IL-2(OD值)
正常对照组
10
0.196±0.012
模型对照组
10
0.142±0.015*
药物组
10
0.188±0.017△
*与正常对照组比P<0.05，△与模型对照组比P<0.05
, 百拇医药
3 讨论
新肝康是复合纯天然中药，具有舒肝理气、滋阴补肾、清热解毒、利胆消实等作用，对慢性肝炎疗效显著，对肝硬化也有明显作用，本项研究结果与临床疗效相一致。
乙型肝炎的临床表现呈多样性，其临床过程的轻重和转归与机体细胞免疫应答的强弱密切相关。机体受到乙型肝炎病毒(HBV)感染后，致使靶细胞的HLA-I类抗原表达低下，则杀伤性T细胞(CTL)作用减弱，以致使感染持续存在，同时淋巴细胞带有HBV导致IL-2、干扰素等产生水平低，也影响对HBV的清除。通过模型鼠已证实，新肝康能使免疫应答低下的机体提高至正常状态。为此我们认为新肝康在调节机体免疫功能方面起重要作用。
基金来源：本课题受自然科学基金资助
收稿日期：1999-02-06
修稿日期：1999-08-21, http://www.100md.com
单位：许洪霞(哈尔滨市职工医学院，150080)；纪传珍(鸡西煤炭高等医学专科学校)；许艳霞(哈尔滨市红十字儿童医院)；王雅贤(黑龙江中医药大学免疫室)
关键词：
中国急救医学000330 我院自1992年以来，开始应用新肝康治疗乙型肝炎、肝硬化取得了较为满意的疗效，几年来治愈的病人未见复发。为进一步探求新肝康治疗乙型肝炎的免疫学机理，我们观察了新肝康对乙肝模型鼠T细胞亚群和脾淋巴细胞产生IL-2的影响，以期为临床用药提供科学的理论依据。
1 材料与方法
1.1 实验动物 昆明种小白鼠30只，体重18～22 g，雌雄兼用，由黑龙江中医药大学动物室提供。小鼠随机分三组，每组10只，分别设为正常对照组、模型对照组、药物组。
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1.2 动物模型 小白鼠环磷酰胺30 mg/kg间日肌注1次，2次后改为5 mg/kg每周1次，注射药物同时经肝脏直接注射纯化HBsAg 0.05 ml。
1.3 给药方式 药物组于造模当日以新肝康灌胃给药，每日1次0.5 ml，用药1个月。另二组分别以生理盐水灌胃。
1.4 实验方法 脱颈椎处死小鼠，无菌取脾，制备脾细胞悬液。调整脾细胞浓度为2×106/ml，进行T细胞亚群检测(APAAP试剂盒购自北京邦定生物医学公司)；另取脾细胞调整浓度为1×107/ml，加ConA 5 μg/ml，于CO2培养箱中37℃孵育48 h，离心收获上清，进行IL-2测定(酶联免疫检测试剂盒购自晶美生物医学公司)。严格按说明书操作。
2 结果
表1和表2结果显示，乙肝模型鼠L3T4+细胞数、L3T4+/Lyt-2+细胞比值及IL-2水平均明显低于正常对照组(P<0.05)；Lyt-2+细胞明显高于正常组(P<0.05)；而药物组模型鼠L3T4+细胞数、L3T4+/Lyt-2+细胞比值及IL-2水平均高于模型对照组(P<0.05)，与正常对照组比值无显著性差异(P>0.05)；Lyt-2+细胞数明显低于乙肝模型鼠(P<0.05)，但与正常组比无显著性差异(P>0.05)。
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表1 新肝康对模型鼠T细胞亚群的影响(
±s)Thy-1+
细胞(%)
L3T4+
细胞(%)
Lyt-2+
细胞(%)
L3T4+/
Lyt-2+比值
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正常对照组
(n=10)
36.17±5.64
26.78±2.35
13.68±2.56
1.89±0.47
模型对照组
(n=10)
34.96±4.16
22.67±1.58*
15.96±2.14*
, 百拇医药
1.39±0.39*
药物组
(n=10)
35.36±4.28
26.13±2.11△
13.12±1.96△
1.81±0.45△
*与正常对照组比P<0.05 △与模型对照组比P<0.05表2 新肝康对模型鼠IL-2水平的影响(
±s)n(只)
, 百拇医药
IL-2(OD值)
正常对照组
10
0.196±0.012
模型对照组
10
0.142±0.015*
药物组
10
0.188±0.017△
*与正常对照组比P<0.05，△与模型对照组比P<0.05
, 百拇医药
3 讨论
新肝康是复合纯天然中药，具有舒肝理气、滋阴补肾、清热解毒、利胆消实等作用，对慢性肝炎疗效显著，对肝硬化也有明显作用，本项研究结果与临床疗效相一致。
乙型肝炎的临床表现呈多样性，其临床过程的轻重和转归与机体细胞免疫应答的强弱密切相关。机体受到乙型肝炎病毒(HBV)感染后，致使靶细胞的HLA-I类抗原表达低下，则杀伤性T细胞(CTL)作用减弱，以致使感染持续存在，同时淋巴细胞带有HBV导致IL-2、干扰素等产生水平低，也影响对HBV的清除。通过模型鼠已证实，新肝康能使免疫应答低下的机体提高至正常状态。为此我们认为新肝康在调节机体免疫功能方面起重要作用。
基金来源：本课题受自然科学基金资助
收稿日期：1999-02-06
修稿日期：1999-08-21, http://www.100md.com