糖克灵颗粒质量标准研究
作者：吕凌
单位：吕凌(安徽省药物研究所，安徽 合肥 230022)
关键词：糖克灵颗粒剂；薄层色谱；总黄酮；比色法
时珍国医国药000317 提要 采用薄层色谱法对糖克灵颗粒中枸杞子、山药、山楂、决明子进行鉴别，并采用比色法对其中总黄酮的含量进行了测定。方法简便可靠，可作为该制剂的质量标准控制。
中图分类号：R284.1 文献标识码：B 文章编号：1008-0805(2000)03-0211-01
糖克灵颗粒剂由枸杞子、山药、山楂、决明子等14味中药组成，具有益气养阴、生津润燥、健脾补肾、活血祛湿之功效。我们采用薄层色谱法对其中的枸杞子、山药、山楂、决明子进行定性鉴别，并运用比色法测定了总黄酮的含量。
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1 仪器与试药
1.1 仪器：UV-240紫外分光光度计(日本岛津)。
1.2 药物：大黄素、大黄酚、熊果酸、芦丁对照品、山药、枸杞子对照药材，均由中国药品生物制品检定所提供；硅胶G、硅胶H，由青岛海洋化工厂提供；实验所用试剂均为分析纯。
2 定性鉴别
2.1 山药的鉴别：取本品5 g，加无水乙醇30 ml，加热回流1 h，滤过，滤液蒸干，残渣加水20 ml，盐酸0.5 ml，水浴上蒸干，放冷，残渣加乙醚20 ml溶解，滤过，洗涤，挥干乙醚，残渣加甲醇0.5 ml使溶解，作为供试品溶液；另取缺味配制的模拟制剂，按同法制备作为阴性对照品溶液；再取山药对照药材2 g，同法制成对照药材溶液。吸取上述溶液各5 μl，分别点于同一硅胶G板上，以苯-丙酮(10∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇液，105℃烘5 min。结果见图1。
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图1 山药TLC图谱
1 阴性对照品
2 山药药材
3 样品
2.2 决明子的鉴别：取本品5 g，加甲醇30 ml浸渍1 h，滤过，滤液蒸干，残渣加水10 ml溶解，加盐酸1 ml置水浴上加热30 min，冷却，用乙醚提取两次，20 ml/次合并醚液，蒸干，残渣加氯仿1 ml使溶解，作为供试品溶液；另取缺味配制的模拟制剂，按同法制备作为阴性对照品溶液；再取大黄素和大黄酚对照品加甲醇制成每ml中各含1 mg的混合溶液，作为对照品溶液。吸取上述溶液各5 μl，点于同一硅胶H板上，以石油醚(30-60)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，置紫外光灯(365 nm)下检视。结果见图2。
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图2 决明子TLC图谱
1 阴性对照品
2 阳性对照品
3 样品
2.3 山楂的鉴别：取本品5 g，加乙醚30 ml，置水浴上加热回流1 h，滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮1 ml使溶解，作为供试品溶液；另取缺味配制的模拟制剂，按同法制备作为阴性对照品溶液；再取熊果酸对照品加无水乙醇制成1 ml中含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述溶液各2 μl，点于同一硅胶G板上，以环己烷-氯仿-醋酸乙酯(20∶5∶8)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇液，105℃烘5 min，结果见图3。
图3 山楂TLC图谱
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1 阴性对照品
2 熊果酸对照品
3 样品
2.4 枸杞子鉴别：取本品10 g，加乙醇25 ml，置水浴上加热回流2 h，滤过，滤液浓缩至1 ml，作为供试品溶液；另取缺味配制的模拟制剂，按同法制备作为阴性对照品溶液；再取枸杞子对照药材5 g，同法制成对照药材溶液。吸取上述溶液各4 μl，点于同一硅胶G板上，以醋酸乙酯-氯仿-甲酸(3∶2∶1)为展开剂，展开，取出，晾出，置紫外光灯(365 nm)下检视。结果见图4。
图4 枸杞子TLC图谱
1 阴性对照品
2 枸杞子对照药材
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3 样品
3 总黄酮的含量测定
3.1 样品溶液及对照品溶液的制备：精密称取样品3.2 g，置圆底烧瓶中，加30%乙醇50 ml，回流提取1 h，滤过，弃去初滤液，取续滤液5 ml，置25 ml的量瓶中，加30%乙醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取芦丁对照品0.2 g，置100 ml量瓶中，加甲醇70 ml置水浴上微热使溶解，放冷，加甲醇定容至刻度，摇匀。精密吸取10ml，置100 ml量瓶中，加水稀释置刻度，摇匀，作为对照品溶液。
3.2 标准曲线的制备：精密吸取对照品溶液1，2，3，4，5，6 ml分别置25 ml瓶中，加水至6 ml，加5%亚硝酸钠溶液1 ml，摇匀，放置6 min，加10%硝酸铝溶液1 ml，摇匀，放置6 min，加氢氧化钠试液10 ml，加水至刻度，摇匀，放置15 min，500 nm波长处测定，结果经计算得回归方程为：
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C=0.090 9 A-0.000 5， γ=0.999 9。
结果表明，芦丁的量在8～48 μg/ml范围内与吸收值，具有良好的线性关系。
3.3 稳定性实验：精密量取对照品溶液2 ml，按上述方法操作制备样品液，每隔10 min重复测定吸收值 A，结果1 h内较稳定。
3.4 回收率实验：精密称取已知含量的同批样品5份，分别加入一定量的芦丁对照品，按上述方法操作制备样品液，取溶液5 ml按标准曲线项下的方法操作，结果其平均回收率为96.9%。 RSD=2.21%。
3.5 精密度实验：精密量取同一批号的供试品溶液6份，依法测定吸收值，结果 RSD=1.17%。
4 小结
实验结果表明，采用 TLC 法鉴别四味主药，方法特异性强，空白无干扰，采用 UV-Vis 法检测总黄酮，简便快速。
作者简介：吕 凌(1966-)，女(汉族)，安徽巢湖人，现任安徽省药物研究所分析室副主任，主要从事药物分析工作.
收稿日期：1999-09-07
修订日期：1999-11-18, 百拇医药
单位：吕凌(安徽省药物研究所，安徽 合肥 230022)
关键词：糖克灵颗粒剂；薄层色谱；总黄酮；比色法
时珍国医国药000317 提要 采用薄层色谱法对糖克灵颗粒中枸杞子、山药、山楂、决明子进行鉴别，并采用比色法对其中总黄酮的含量进行了测定。方法简便可靠，可作为该制剂的质量标准控制。
中图分类号：R284.1 文献标识码：B 文章编号：1008-0805(2000)03-0211-01
糖克灵颗粒剂由枸杞子、山药、山楂、决明子等14味中药组成，具有益气养阴、生津润燥、健脾补肾、活血祛湿之功效。我们采用薄层色谱法对其中的枸杞子、山药、山楂、决明子进行定性鉴别，并运用比色法测定了总黄酮的含量。
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1 仪器与试药
1.1 仪器：UV-240紫外分光光度计(日本岛津)。
1.2 药物：大黄素、大黄酚、熊果酸、芦丁对照品、山药、枸杞子对照药材，均由中国药品生物制品检定所提供；硅胶G、硅胶H，由青岛海洋化工厂提供；实验所用试剂均为分析纯。
2 定性鉴别
2.1 山药的鉴别：取本品5 g，加无水乙醇30 ml，加热回流1 h，滤过，滤液蒸干，残渣加水20 ml，盐酸0.5 ml，水浴上蒸干，放冷，残渣加乙醚20 ml溶解，滤过，洗涤，挥干乙醚，残渣加甲醇0.5 ml使溶解，作为供试品溶液；另取缺味配制的模拟制剂，按同法制备作为阴性对照品溶液；再取山药对照药材2 g，同法制成对照药材溶液。吸取上述溶液各5 μl，分别点于同一硅胶G板上，以苯-丙酮(10∶1)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇液，105℃烘5 min。结果见图1。
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图1 山药TLC图谱
1 阴性对照品
2 山药药材
3 样品
2.2 决明子的鉴别：取本品5 g，加甲醇30 ml浸渍1 h，滤过，滤液蒸干，残渣加水10 ml溶解，加盐酸1 ml置水浴上加热30 min，冷却，用乙醚提取两次，20 ml/次合并醚液，蒸干，残渣加氯仿1 ml使溶解，作为供试品溶液；另取缺味配制的模拟制剂，按同法制备作为阴性对照品溶液；再取大黄素和大黄酚对照品加甲醇制成每ml中各含1 mg的混合溶液，作为对照品溶液。吸取上述溶液各5 μl，点于同一硅胶H板上，以石油醚(30-60)-甲酸乙酯-甲酸(15∶5∶1)的上层溶液为展开剂，展开，取出，置紫外光灯(365 nm)下检视。结果见图2。
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图2 决明子TLC图谱
1 阴性对照品
2 阳性对照品
3 样品
2.3 山楂的鉴别：取本品5 g，加乙醚30 ml，置水浴上加热回流1 h，滤过，滤液蒸干，残渣加丙酮1 ml使溶解，作为供试品溶液；另取缺味配制的模拟制剂，按同法制备作为阴性对照品溶液；再取熊果酸对照品加无水乙醇制成1 ml中含0.5 mg的溶液，作为对照品溶液。吸取上述溶液各2 μl，点于同一硅胶G板上，以环己烷-氯仿-醋酸乙酯(20∶5∶8)为展开剂，展开，取出，晾干，喷以10%硫酸乙醇液，105℃烘5 min，结果见图3。
图3 山楂TLC图谱
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1 阴性对照品
2 熊果酸对照品
3 样品
2.4 枸杞子鉴别：取本品10 g，加乙醇25 ml，置水浴上加热回流2 h，滤过，滤液浓缩至1 ml，作为供试品溶液；另取缺味配制的模拟制剂，按同法制备作为阴性对照品溶液；再取枸杞子对照药材5 g，同法制成对照药材溶液。吸取上述溶液各4 μl，点于同一硅胶G板上，以醋酸乙酯-氯仿-甲酸(3∶2∶1)为展开剂，展开，取出，晾出，置紫外光灯(365 nm)下检视。结果见图4。
图4 枸杞子TLC图谱
1 阴性对照品
2 枸杞子对照药材
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3 样品
3 总黄酮的含量测定
3.1 样品溶液及对照品溶液的制备：精密称取样品3.2 g，置圆底烧瓶中，加30%乙醇50 ml，回流提取1 h，滤过，弃去初滤液，取续滤液5 ml，置25 ml的量瓶中，加30%乙醇至刻度，摇匀，作为供试品溶液。另取芦丁对照品0.2 g，置100 ml量瓶中，加甲醇70 ml置水浴上微热使溶解，放冷，加甲醇定容至刻度，摇匀。精密吸取10ml，置100 ml量瓶中，加水稀释置刻度，摇匀，作为对照品溶液。
3.2 标准曲线的制备：精密吸取对照品溶液1，2，3，4，5，6 ml分别置25 ml瓶中，加水至6 ml，加5%亚硝酸钠溶液1 ml，摇匀，放置6 min，加10%硝酸铝溶液1 ml，摇匀，放置6 min，加氢氧化钠试液10 ml，加水至刻度，摇匀，放置15 min，500 nm波长处测定，结果经计算得回归方程为：
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C=0.090 9 A-0.000 5， γ=0.999 9。
结果表明，芦丁的量在8～48 μg/ml范围内与吸收值，具有良好的线性关系。
3.3 稳定性实验：精密量取对照品溶液2 ml，按上述方法操作制备样品液，每隔10 min重复测定吸收值 A，结果1 h内较稳定。
3.4 回收率实验：精密称取已知含量的同批样品5份，分别加入一定量的芦丁对照品，按上述方法操作制备样品液，取溶液5 ml按标准曲线项下的方法操作，结果其平均回收率为96.9%。 RSD=2.21%。
3.5 精密度实验：精密量取同一批号的供试品溶液6份，依法测定吸收值，结果 RSD=1.17%。
4 小结
实验结果表明，采用 TLC 法鉴别四味主药，方法特异性强，空白无干扰，采用 UV-Vis 法检测总黄酮，简便快速。
作者简介：吕 凌(1966-)，女(汉族)，安徽巢湖人，现任安徽省药物研究所分析室副主任，主要从事药物分析工作.
收稿日期：1999-09-07
修订日期：1999-11-18, 百拇医药