膀胱癌组织p53表达的临床意义
作者：李庆文 承泽农 周文生 胡永泉
单位：李庆文(蚌埠医学院附属医院 泌尿外科，安徽 蚌埠 233004)；承泽农(蚌埠医学院 病理学教研室，安徽 蚌埠 233003)；周文生(蚌埠医学院附属医院 泌尿外科，安徽 蚌埠 233004)；胡永泉(蚌埠医学院附属医院 泌尿外科，安徽 蚌埠 233004)
关键词：膀胱肿瘤；免疫组织化学；p53
蚌埠医学院学报000408
[摘要] 目的：探讨膀胱癌组织p53表达的预后价值。方法：采用免疫组化方法，研究56例膀胱癌组织及10例正常对照粘膜组织 中p53的表达。结果：膀胱癌组织p53表达阳性率为51.79%(29/56)，而正常对照粘膜中均 无表达；p53阳性 率与病理分级、临床分期有关，Ⅰ级20.00%，Ⅱ级45.45%，Ⅲ级70.83%(P<0.05)；T1期15.79%，T2期55.00%，T3期88.24%(P<0.005)。p53阳性率及水平在低 分化及侵 袭性肿瘤中显著增高；p53阳性肿瘤患者比阴性患者肿瘤的复发率及病死率明显增高(P <0.01和P<0.05)。结论：p53过度表达可作为膀胱移行细胞癌预后评估的指标之一。
, 百拇医药
[中国图书资料分类法分类号] R 737.14；R 392.31 [ 文献标识码] A
[文章编号] 1000-2200(2000)04-0250-02
The clinical significance of p53 expression in transitional cell bladder carcinoma
LI Qing-wen,CHENG Ze-nong,ZHOU Wen-sheng,HU Yong-quan
(Department of Urology,Affiliated Hospital of Bengbu Me dical College,Anhui 233004,China)
[Abstract] Objective:To investigate the prognostic valu e of p53 expression in bladder carcinoma.Methods:P53 was detected by immunohistochemical method in 56 specime ns of transitional cell bladder carcinoma and 10 normal bladder mucosa as contro ls.Results:p53 was positive in 29 of the 56(51.79%),while it was negati ve in all the 10 controls.The p53 positive rate in grade Ⅰ,Ⅱ,and Ⅲ tumors was 20.00%,45.45%,and 70.83% respectively(P<0.05),and in stage T1,T2,and T3 tumors was 15.79%,55.00% and 88.24% respectively(P<0.005).The p53 pos itive rate and level was high e r in invasive bladder carcinoma.The recurrence and fatality rates were higher in positive cases than those in negative cases(P<0.01 and P<0.05).Conclusions:The immunohistochemical p53 expression could be used as one of the important prognostic indicators in transitional cell bladder carcinom a.
, 百拇医药
[Key words] bladder neoplasms;immunohistochemistry;p53
p53过度表达与膀胱癌的临床分期、病理分级、肿瘤复发和转移等的关 系甚为密切，但与膀胱癌预后的关系尚未明了。本研究采用免疫组化的方法，并结合临床病 例资料，探讨p53在膀胱癌组织中表达的临床意义。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取我院病理学教研室1992～1994年间获得随访的膀胱癌 手术标 本56例。男48例，女8例；年龄46～78岁。所有病例术前均经膀胱镜检查病理确诊，其中14 例行全膀胱切除术，42例行保留膀胱手术。术后病理均为膀胱移行细胞癌。按WHO标准分级 ，Ⅰ级10例，Ⅱ级22例，Ⅲ级24例；临床分期采用UICC标准，T1期19例，T2期20例，T 3期17例。另取10例正常膀胱粘膜作为阴性对照。
, 百拇医药
1.2 方法 p53单抗由北京中山生物技术有限公司提供， 效价1∶300；ABC试剂，生物素化抗鼠IgG抗体为Vector公司产品；HRP由华美公司提供。采 用ABC法进行石蜡切片，脱蜡脱水，PBS冲洗，p53单抗4℃过夜，PBS冲洗后添加生物素化二 抗等步骤，经DAB和H2O2显色，水洗后苏木素衬染，脱水后常规封片镜检。
1.3 统计学方法 采用χ2检验和p53阴性与阳性患者生存率比较的 u检验。
2 结果
本组56例均获随访，随访时间为38～62个月。肿瘤复发20例，其中伴有肿瘤转移17例 。死 亡16例，其中13例死于肿瘤，2例死于心血管疾病，1例死于糖尿病。显微镜下观察细胞核呈 棕色反应者为阳性，不着色者为阴性。56例膀胱癌标本中29例为阳性核染，阳性率为51.79% ，10例正常膀胱粘膜均为阴性。p53表达与膀胱癌病理分级、临床分期、复发及转移的关系 见表1～3；p53阳性表达与肿瘤预后的关系见图1。结果显示p53阳性患者生存时间较p53阴性 者短(u=2.01,P<0.05)。
, 百拇医药
表1 p53过度表达与膀胱癌病理分级的关系(n) 分级
n
p53
χ2
P
+
-
Ⅰ
10
2
8
Ⅱ
22
, 百拇医药
10
12
7.89
<0.05
Ⅲ
24
17
7
合计
56
29
27
表2 p53过度表达与膀胱癌临床分期的关系(n) 分期
, 百拇医药
n
(p53
χ 2
P
+
-
T1
19
3
16
T2
20
11
, 百拇医药
9
18.99
<0.005
T3
17
15
2
合计
56
29
27
表3 p53过度表达与膀胱癌术后复发和转移的关系(n) p53
, 百拇医药 n
肿瘤复发
肿瘤无复发
肿瘤转移
肿瘤无转移
+
29
15
14
14
15
-
27
5
, 百拇医药
22
3
24
合计
56
20
36
17
39
χ2
-
6.71
9.13
, http://www.100md.com
P
-
<0.01
<0.005
图1 膀胱癌术后生存曲线(0死亡，+存 活)
3 讨论
自Finlay等[1]发现野生型p53基因能抑制细胞恶性转化以来，关于p53基因在 膀胱癌中突变的研究国外近年报道较多，研究方法亦较多，但结果不尽一致[2～4] 。p53基因位于人类染色体17p13-1上，包括11个外显子和10个内含子，其蛋白产物(p53)- 磷酸核蛋白分子量约为53 ku，是细胞周期中G1/S期的调控点，对细胞生长具负调控作用 。当细胞暴露于DNA损伤因素如紫外线照射等时，p53基因容易出现点突变，这时其编码的蛋 白产物为突变型p53[5]。
, 百拇医药
本文采用免疫组化法检测p53在膀胱癌组织中的表达，结果表明膀胱癌组织中p53的阳性率为 51.79%，而正常膀胱粘膜组织均为阴性。p53的表达情况与膀胱癌恶性程度有关。随分化程 度逐渐降低，阳性率逐渐升高，说明突变型p53具有促进细胞恶性转化的作用。同时，笔者 在实验中发现，在T1、T2、T3期的癌肿中，阳性率分别为15.79%、55.00%、 88.24%，差 异有显著性(P<0.005)，说明具有侵袭性的膀胱癌中阳性率较高，基本与文献报道一 致[2，3]。因此，通过检测膀胱癌组织中p53的表达，可了解肿瘤的恶性程度以及 是否为侵袭性生长，有利于治疗方案的选择。
Gaiyrov等[5]研究发现当膀胱癌中p53过度表达时，患者预后相对较差；也有研究 [4]认为p53过度表达可作为膀胱癌的预后指标之一。本文经随访38～62个月发现， p53阳性者平均生存期为39.69±12.32个月，累积生存率为0.81±0.101 3，p53阴性者为50. 41±9.60个月，累积生存率为0.51±0.109 9，从生存率曲线中可看出，p53过度表达者 预后 不良(P<0.05)。同时，本实验显示，p53阳性者肿瘤复发率及转移率明显较p53阴性者 为高(P<0.01和P<0.005)。总之，p53阳性时，肿瘤分化较差，分期较晚，易于 复发及转移，可能是导致预后较差的重要原因。
, 百拇医药
作者简介：李庆文(1959-)，男，安徽砀山县人，副主任医师，讲师.
[参考文献]
[1] Finlay CA,Hinds PW,Levine AJ,et al.The p53 proto-onc ogene can act as a suppressor of transitional[J].Cell,1989,57(6)∶1 083 .
[2] Soini Y,Turpeenniemi-Hujanen T,Kamel D,et al.p 53,Immu-nohistochemistry in transitional cell carcinoma and dysplasi a of the urinary bladder cor relates with disease progression[J].Br J Cancer,1993,68(5)∶1 029.
, 百拇医药
[3] Moch H,Sauter G,Moore MJ,et al.p53 and erbB-2 protein ove re xpression are associated with early invasion and metastasis in bladder cancer[J ].Virchows Arch,1993,423(1)∶329.
[4] Moreno SJ,Chicharro-Almarza J.The molecular biology of bla dder carcinoma[J].Arch Esp Urol,1997,50(8)∶855.
[5] Gaiyrov AG,Romanenko AM,Klimenko IA,et al.The prognostic impor tance of immunohistochemical study of protein p53 in transitional cell bladder t umors[J].Lik Sprava,1998,34(5)∶86.
[6] Romanenko A,Lee CC,Yamamoto A,et al.Urinary bladder lesion s af ter the chemobyl accident:Immunohistochemical assessment of p53,proliferation ce ll nuclear antigen,cyclin D1 and p21 WAF1[J].Jpn J Cancer Res ,1999,90(2)∶144.
收稿日期：2000-01-18, 百拇医药
单位：李庆文(蚌埠医学院附属医院 泌尿外科，安徽 蚌埠 233004)；承泽农(蚌埠医学院 病理学教研室，安徽 蚌埠 233003)；周文生(蚌埠医学院附属医院 泌尿外科，安徽 蚌埠 233004)；胡永泉(蚌埠医学院附属医院 泌尿外科，安徽 蚌埠 233004)
关键词：膀胱肿瘤；免疫组织化学；p53
蚌埠医学院学报000408
[摘要] 目的：探讨膀胱癌组织p53表达的预后价值。方法：采用免疫组化方法，研究56例膀胱癌组织及10例正常对照粘膜组织 中p53的表达。结果：膀胱癌组织p53表达阳性率为51.79%(29/56)，而正常对照粘膜中均 无表达；p53阳性 率与病理分级、临床分期有关，Ⅰ级20.00%，Ⅱ级45.45%，Ⅲ级70.83%(P<0.05)；T1期15.79%，T2期55.00%，T3期88.24%(P<0.005)。p53阳性率及水平在低 分化及侵 袭性肿瘤中显著增高；p53阳性肿瘤患者比阴性患者肿瘤的复发率及病死率明显增高(P <0.01和P<0.05)。结论：p53过度表达可作为膀胱移行细胞癌预后评估的指标之一。
, 百拇医药
[中国图书资料分类法分类号] R 737.14；R 392.31 [ 文献标识码] A
[文章编号] 1000-2200(2000)04-0250-02
The clinical significance of p53 expression in transitional cell bladder carcinoma
LI Qing-wen,CHENG Ze-nong,ZHOU Wen-sheng,HU Yong-quan
(Department of Urology,Affiliated Hospital of Bengbu Me dical College,Anhui 233004,China)
[Abstract] Objective:To investigate the prognostic valu e of p53 expression in bladder carcinoma.Methods:P53 was detected by immunohistochemical method in 56 specime ns of transitional cell bladder carcinoma and 10 normal bladder mucosa as contro ls.Results:p53 was positive in 29 of the 56(51.79%),while it was negati ve in all the 10 controls.The p53 positive rate in grade Ⅰ,Ⅱ,and Ⅲ tumors was 20.00%,45.45%,and 70.83% respectively(P<0.05),and in stage T1,T2,and T3 tumors was 15.79%,55.00% and 88.24% respectively(P<0.005).The p53 pos itive rate and level was high e r in invasive bladder carcinoma.The recurrence and fatality rates were higher in positive cases than those in negative cases(P<0.01 and P<0.05).Conclusions:The immunohistochemical p53 expression could be used as one of the important prognostic indicators in transitional cell bladder carcinom a.
, 百拇医药
[Key words] bladder neoplasms;immunohistochemistry;p53
p53过度表达与膀胱癌的临床分期、病理分级、肿瘤复发和转移等的关 系甚为密切，但与膀胱癌预后的关系尚未明了。本研究采用免疫组化的方法，并结合临床病 例资料，探讨p53在膀胱癌组织中表达的临床意义。
1 资料与方法
1.1 一般资料 选取我院病理学教研室1992～1994年间获得随访的膀胱癌 手术标 本56例。男48例，女8例；年龄46～78岁。所有病例术前均经膀胱镜检查病理确诊，其中14 例行全膀胱切除术，42例行保留膀胱手术。术后病理均为膀胱移行细胞癌。按WHO标准分级 ，Ⅰ级10例，Ⅱ级22例，Ⅲ级24例；临床分期采用UICC标准，T1期19例，T2期20例，T 3期17例。另取10例正常膀胱粘膜作为阴性对照。
, 百拇医药
1.2 方法 p53单抗由北京中山生物技术有限公司提供， 效价1∶300；ABC试剂，生物素化抗鼠IgG抗体为Vector公司产品；HRP由华美公司提供。采 用ABC法进行石蜡切片，脱蜡脱水，PBS冲洗，p53单抗4℃过夜，PBS冲洗后添加生物素化二 抗等步骤，经DAB和H2O2显色，水洗后苏木素衬染，脱水后常规封片镜检。
1.3 统计学方法 采用χ2检验和p53阴性与阳性患者生存率比较的 u检验。
2 结果
本组56例均获随访，随访时间为38～62个月。肿瘤复发20例，其中伴有肿瘤转移17例 。死 亡16例，其中13例死于肿瘤，2例死于心血管疾病，1例死于糖尿病。显微镜下观察细胞核呈 棕色反应者为阳性，不着色者为阴性。56例膀胱癌标本中29例为阳性核染，阳性率为51.79% ，10例正常膀胱粘膜均为阴性。p53表达与膀胱癌病理分级、临床分期、复发及转移的关系 见表1～3；p53阳性表达与肿瘤预后的关系见图1。结果显示p53阳性患者生存时间较p53阴性 者短(u=2.01,P<0.05)。
, 百拇医药
表1 p53过度表达与膀胱癌病理分级的关系(n) 分级
n
p53
χ2
P
+
-
Ⅰ
10
2
8
Ⅱ
22
, 百拇医药
10
12
7.89
<0.05
Ⅲ
24
17
7
合计
56
29
27
表2 p53过度表达与膀胱癌临床分期的关系(n) 分期
, 百拇医药
n
(p53
χ 2
P
+
-
T1
19
3
16
T2
20
11
, 百拇医药
9
18.99
<0.005
T3
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合计
56
29
27
表3 p53过度表达与膀胱癌术后复发和转移的关系(n) p53
, 百拇医药 n
肿瘤复发
肿瘤无复发
肿瘤转移
肿瘤无转移
+
29
15
14
14
15
-
27
5
, 百拇医药
22
3
24
合计
56
20
36
17
39
χ2
-
6.71
9.13
, http://www.100md.com
P
-
<0.01
<0.005
图1 膀胱癌术后生存曲线(0死亡，+存 活)
3 讨论
自Finlay等[1]发现野生型p53基因能抑制细胞恶性转化以来，关于p53基因在 膀胱癌中突变的研究国外近年报道较多，研究方法亦较多，但结果不尽一致[2～4] 。p53基因位于人类染色体17p13-1上，包括11个外显子和10个内含子，其蛋白产物(p53)- 磷酸核蛋白分子量约为53 ku，是细胞周期中G1/S期的调控点，对细胞生长具负调控作用 。当细胞暴露于DNA损伤因素如紫外线照射等时，p53基因容易出现点突变，这时其编码的蛋 白产物为突变型p53[5]。
, 百拇医药
本文采用免疫组化法检测p53在膀胱癌组织中的表达，结果表明膀胱癌组织中p53的阳性率为 51.79%，而正常膀胱粘膜组织均为阴性。p53的表达情况与膀胱癌恶性程度有关。随分化程 度逐渐降低，阳性率逐渐升高，说明突变型p53具有促进细胞恶性转化的作用。同时，笔者 在实验中发现，在T1、T2、T3期的癌肿中，阳性率分别为15.79%、55.00%、 88.24%，差 异有显著性(P<0.005)，说明具有侵袭性的膀胱癌中阳性率较高，基本与文献报道一 致[2，3]。因此，通过检测膀胱癌组织中p53的表达，可了解肿瘤的恶性程度以及 是否为侵袭性生长，有利于治疗方案的选择。
Gaiyrov等[5]研究发现当膀胱癌中p53过度表达时，患者预后相对较差；也有研究 [4]认为p53过度表达可作为膀胱癌的预后指标之一。本文经随访38～62个月发现， p53阳性者平均生存期为39.69±12.32个月，累积生存率为0.81±0.101 3，p53阴性者为50. 41±9.60个月，累积生存率为0.51±0.109 9，从生存率曲线中可看出，p53过度表达者 预后 不良(P<0.05)。同时，本实验显示，p53阳性者肿瘤复发率及转移率明显较p53阴性者 为高(P<0.01和P<0.005)。总之，p53阳性时，肿瘤分化较差，分期较晚，易于 复发及转移，可能是导致预后较差的重要原因。
, 百拇医药
作者简介：李庆文(1959-)，男，安徽砀山县人，副主任医师，讲师.
[参考文献]
[1] Finlay CA,Hinds PW,Levine AJ,et al.The p53 proto-onc ogene can act as a suppressor of transitional[J].Cell,1989,57(6)∶1 083 .
[2] Soini Y,Turpeenniemi-Hujanen T,Kamel D,et al.p 53,Immu-nohistochemistry in transitional cell carcinoma and dysplasi a of the urinary bladder cor relates with disease progression[J].Br J Cancer,1993,68(5)∶1 029.
, 百拇医药
[3] Moch H,Sauter G,Moore MJ,et al.p53 and erbB-2 protein ove re xpression are associated with early invasion and metastasis in bladder cancer[J ].Virchows Arch,1993,423(1)∶329.
[4] Moreno SJ,Chicharro-Almarza J.The molecular biology of bla dder carcinoma[J].Arch Esp Urol,1997,50(8)∶855.
[5] Gaiyrov AG,Romanenko AM,Klimenko IA,et al.The prognostic impor tance of immunohistochemical study of protein p53 in transitional cell bladder t umors[J].Lik Sprava,1998,34(5)∶86.
[6] Romanenko A,Lee CC,Yamamoto A,et al.Urinary bladder lesion s af ter the chemobyl accident:Immunohistochemical assessment of p53,proliferation ce ll nuclear antigen,cyclin D1 and p21 WAF1[J].Jpn J Cancer Res ,1999,90(2)∶144.
收稿日期：2000-01-18, 百拇医药