Bcl－2,bax基因蛋白在乳腺癌中的表达及临床病理学意义
作者：黄建华 吕新生 刘少华 周建华
单位：黄建华(湖南医科大学 附属湘雅医院外科)；吕新生(湖南医科大学 附属湘雅医院外科)；刘少华(湘雅医院肿瘤科)；周建华(病理学都研室；中国湖南 长沙 410008)
关键词：乳腺肿瘤/遗传学；原癌基因蛋白质C-bcl-2/遗传学；癌基因/遗传学；乳腺肿瘤/病理学；脱噬作用
湖南医学000404[摘要]
目的检测bcl-2和 bax基因蛋白在乳癌中的表达，以探讨其在乳癌发生、发展中的作用及其临床病理学意义。方法40例乳癌和31例乳腺良性病变，用免疫组化S-P法检测其bcl-2和bax的表达。结果bcl-2基因蛋白在乳癌中心、癌旁、良性病变表达阳性率分别为72.5%(29/40)，45.0(18/40)和96.8%(30/31)(P<0.01)；按肿瘤细胞分级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级的bcl-2表达强度分别为(2.08±0.29)，(1.23±0.28)和(0.73±0.23)(P<0.01)。bax基因在乳癌中心、癌旁、良性病变中的表达强度分别为(0.88±0.13)，(1.20±0.10)和(1.16±0.17)(P<0.05)。结论bcl-2基因蛋白在乳癌中高表达，bax基因蛋白则为低表达。说明其细胞凋亡受抑制。bcl-2的高表达可部分反映乳癌的生物学行为和预后良好。
, 百拇医药
[中图分类号] R737.9；R730.23+1.3 [文献标识码] A [文章编号] 1001-9421(2000)04-0251-03
Clinico-pathological Significance of the bcl-2 and bax Oncoprotein Expression in the Breast Cancer
HUANG Jian-hua LU Xing-sheng LIU Shao-hua ZHOU Jian-hua
(Dept. of Surgery)
(Dept.of Neoplasm,Affiliated Xiangya Hospital of Hunan Medical University)
, 百拇医药
(Dept. of Pathology,Hunam Medical University,Changsha,410008,China)
[Abstract]
Objective To explore the clinico-pathological significance of bcl-2 and bax oncoprotein exression in the growth and development of breast carcinoma.Methods The expressions of bcl-2 and bax oncoproteins in the specimen from forty cases of primary breast cancers and para-carcinoma as well as thirty-one cases of benign breast lesions were detected by immunohistochemical S-P method.Results The positive expressions of bcl-2 oncoprotein in the primary breast cancers，para-carcinoma tissues and benign lesion tissues were 72.5%(29/40),45.0%(18/40) and 96.8(30/31) respectively;whereas the scores of staining intensity of bcl-2 in the tumors of Grade Ⅰ，Grade Ⅱ and Grade Ⅲ were (2.08±0.29),(1.23±0.28) and (0.73±0.23) respectively(P<0.01).The expression scores of staining intensity from bax gene in the primary breast cancers，para-carcinoma and benign lesion tissues were (0.88±0.13),(1.20±0.10) and (1.16±0.17) correspondingly(P<0.05).Conclusions As compared to the para-carcinoma tissues,the expression of bcl-2 oncoprotein is increased in the breast carcinoma tissues,while that of bax oncoprotein is decreased.It may imply that bcl-2 and bax oncoprotein play an important role in the growth and development of breast carcinoma.High level of Bcl-2 oncoprotein expression may partly reflect the biological behavior of breast cancer and a favorable prognosis.
, http://www.100md.com
[key words] breast neoplasms/GE; oncogenes/GE; proto-oncogene proteins c-bcl-2/GE; breast neoplasms/PA； apoptosis
近年来，有关细胞凋亡及凋亡相关基因在恶性肿瘤的发生、发展中作用的研究日益受到人们的重视[1，2]。bcl-2和bax是目前所知的一对作用相反的凋亡抑制和促进基因之一，两者的平衡对细胞凋亡起着重要作用。本研究通过检测乳腺癌组织的bcl-2，bax的表达，探讨其在乳癌的发生、发展中的作用以及判断预后价值。
1 材料与方法
1.1 病例资料 1998年3月至1998年12月，经病理确诊的乳腺癌40例，平均年龄(48.9±9.3)岁。按TNM分期[3]：Ⅰ期者4例，Ⅱ期者22例，Ⅲ期者12例，Ⅳ期者2例。按Bloom-Richardson[4]进行肿瘤细胞组织学分级：Ⅰ级者12例，Ⅱ级者13例，Ⅲ级者15例。其中，32例术前行1～3次不等的CMF化疗，8例术前未经化疗。乳腺良性病变31例，平均年龄(37.7±8.0)岁。经病理证实乳腺纤维瘤18例，乳腺小叶增生13例。
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1.2 检测方法 bcl-2和bax基因蛋白检测均采用S-P免疫组化法染色。
1.2.1 主要试剂 bcl-2一抗和bax一抗：稀释度均为1/50，美国Santa Cruz公司生产，购自北京中山生物技术有限公司。
1.2.2 方法 链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法(S-P法)免疫组织化学染色。主要步骤：①标本组织经福尔马林固定，常规石蜡包埋；②连续切片4 μm厚，常规脱蜡至无水酒精；②0.1%胰酶消化，微波修复抗原；④滴加稀释一抗(bcl-2 1：50,bax 1：50)，孵育；⑤滴加生物素标记的第二抗体，37℃孵育30 min；⑥滴加链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶溶液；⑦滴加新鲜配制的即用型DAB液，随即显微镜下观察至出现染色。
1.2.3 判断标准及试验对照 bcl-2和bax阳性染色为脑浆黄棕色，以染色的阳性细胞<20%为(-)，>20%为阳性标准[5]。20%～50%为(+)，51%～75%为(
)，>75%为(
)。按评分系统(-)为0分，(+)为1分，()为2分，()为3分。以试剂盒提供的淋巴瘤标本染色切片做阳性对照；省略第一抗原，以PBS代替作阴性对照。
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1.3 统计学处理 bcl-2，bax的阳性率以百分数表示；各阳性率之差别检验用χ2检验。按染色强度计分，组间比较用配对t检验。统计计算用电子计算机SPSS 7.0软件处理。
2 结果
2.1 bcl-2和bax的表达 bcl-2表达的阳性率在良性病变高于乳癌组织，乳癌中心高于癌旁组织(P<0.05)；bcl-2表达强度乳癌中心高于癌旁组织，乳癌中心组织胞浆均染成深棕色，而癌旁组织胞浆染色少而淡(封四图1、图2)，良性病变高于乳癌组织(P＝0.001)。bax表达的阳性率在各病变组中无差别(P>0.05)，按 bax 表达阳性强度在癌中心表达低于癌旁组织(P＝0.022)，乳癌中心组织胞浆染色浅而淡，癌旁组织胞浆染成深棕色(封四图3、图4)，在良性病变的表达低于正常(P＝0.025)。见表1。
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图1 乳腺癌中心组织中乳腺浸润性导管
癌癌细胞胞浆呈bcl-2强阳性(SP×400)
图2 乳腺癌癌旁组织中乳腺浸润性导管
癌癌旁导管上皮细胞胞浆呈bcl-2
弱阳性 ( SP×400 )
图3 乳腺癌中心组织中乳腺单纯癌癌细
胞胞浆呈bax弱阳性 ( SP×400 )
, 百拇医药
图4 乳腺癌癌旁组织中乳腺单纯癌癌旁
导管上皮细胞胞浆呈bax强阳性( SP×400 )
表1 乳腺疾病中的bcl-2和 bax 的表达 取材部位
n
bcl-2
bax
表达强度
阳性数(%)
表达强度
阳性数(%)
乳腺癌中心
, http://www.100md.com 40
1.30±0.17
29(72.5)
0.88±0.13
25(62.5)
乳腺癌癌旁
40
0.60±0.122)
18(45.0)1)
1.20±0.101)
35(87.5)
, http://www.100md.com
乳腺良性病变
31
2.29±0.142)
30(96.8)2)
1.16±0.171)
22(71.0)
乳腺正常组织
31
1.10±0.14
23(74.0)
1.58±0.162)
, 百拇医药
29(93.5)
与乳腺癌中心组比较：1)P<0.05；P<0.001
2.2 乳腺癌bcl-2和bax表达与临床病理因素的关系 按年龄分为≤50岁和>50岁二组，bcl-2、bax在二组间的阳性率无差别。按TNM分期各期乳癌的bcl-2、bax表达阳性率无差异(P>0.05)。表达强度亦无差异(P>0.05)。乳癌的分化程度与bcl-2和bax的关系，按Bloom-Richardson 分级进行比较，结果显示：肿瘤分级越高，bcl-2阳性率越低，表达强度也低(P<0.05)。但是bax表达在不同分级乳癌无差别。见表2。
表2 不同分化级别乳癌的bcl-2，bax表达强度(x±s) 乳癌分级
n
bcl-2强度计分
, http://www.100md.com
bax强度计分
Ⅰ级
12
2.08±0.29
1.00±0.25
Ⅱ级
13
1.23±0.281)
1.00±0.23
Ⅲ级
15
0.73±0.232)
, 百拇医药
0.67±0.21
与肿瘤Ⅰ级比较：1)P<0.05；2)P<0.001
本组中浸润性导管癌、单纯癌、其他类型乳癌三组的bcl-2、bax表达阳性率均无差别；手术切除后病检发现有淋巴结转移者24例，无转移者16例，两组间bcl-2，bax表达无差别(P＝0.467)。按淋巴转移数目≤3个和>3个两组比较，bcl-2，bax表达亦无差别。另外还发现bcl-2表达在ER(+)组与ER(-)组无差异；PR(+)与PR(-)组bcl-2亦无差异。无论术前有无化疗及化疗次数，其bcl-2，bax表达阳性率均无差别。
3 讨论
研究表明，bcl-2和新近发现的bax基因与细胞凋亡的调控甚为密切。本研究发现，bcl-2基因在乳腺癌中的表达(72.5%)，高于旁癌组织的表达(45.0%)，而乳腺良性病变的表达(96.8%)又高于前两组。这与Mustonen 等的结果一致，该作者检测了11例乳腺导管增生、3例乳腺纤维瘤、12例非典型增生、10例原位癌和17例小叶癌，发现良性导管增生、纤维腺瘤的bcl-2表达强度计分最高，非典型增生次之，原位癌和浸润癌最低。提示bcl-2表达的下调在乳腺癌的发生过程中是一个相对早期事件[6]。乳腺癌中bcl-2的表达与生物学行为的关系一直是研究热点。研究发现分化好的乳癌的bcl-2表达高于分化差的乳癌[7，8]。Joensuu等检查分化Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ级的乳癌bcl-2表达分别为83%，54%和19%(P<0.001)[7]。berardo等对979例淋巴结阳性的乳癌进行bcl-2检测并与预后因素相关分析，发现bcl-2表达在淋巴结转移≤3个组高于>3个组，ER阳性组高于ER阴性组，肿块≤20 cm 组高于>20 cm 组。以上结果提示bcl-2高表达者预后较好[8]。本结果发现，乳腺癌的肿瘤细胞分级不同与其bcl-2的阳性表达有相关性。乳腺癌Ⅰ级的bcl-2阳性率为91.75，Ⅱ级为76.9%，Ⅲ级为53.3%。按bcl-2染色强度计分进行比较，在Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ级分化肿瘤的bcI-2表达强度分别是(2.08±0.29)，(1.23±0.28)和(0.73±0.23)。说明乳腺癌分化越好，bcl-2表达越高。
, 百拇医药
宋振川等[9]研究发现术前化疗组bcl-2表达(FI值)高于对照组，认为化疗后组织分级高、增殖活性高的细胞出现凋亡，使组织分级低、增殖活性亦低的细胞聚集，故bcl-2表达升高。说明化疗药物通过细胞凋亡而发挥作用[9]。但本组化疗组与未化疗组比bcl-2表达阳性率未发现明显差别(75%和72.9%)，不同化疗次数之间bcl-2表达也未显示出差异。
Bax和bcl-2是一对正负凋亡调节基因，bax可和bcl-2蛋白形成异二聚体，能使bcl-2蛋白失活，对细胞凋亡有促进作用[5]。本实验发现正常组织的bax表达高于良性病变，乳癌中心组织的表达低于癌旁组织。提示癌组织中凋亡较正常和癌旁组织减少，癌细胞对凋亡的敏感性较低，易于逃避凋亡原的刺激，致使细胞存活期延长，细胞凋亡受抑制。
本实验中乳癌不同分级的乳癌组织其bax表达未发现差异，可能与化疗后凋亡程度发生改变等综合作用有关。本实验还观察了bax与诸多临床病理参数的相关性，未发现明显意义。[作者简介] 黄建华(1962-)，男，湖南长沙人，副教授，医学博士，主要从事肝胆外科及乳腺疾病研究。
, 百拇医药
[参 考 文 献]
[1] Symonds H,Krall L,Remington L,et al.p53 dependent apoptosis suppresses tumor growth and progression in vivo[J].Cell,1994,78:703-711.
[2] Yonish R E,Resnifsky D,Lotem J,et al.Wild type p53 induces apoptosis of myeloid leukemia cells that is intibited by interleukin-6[J].Nature,1991,352:245-247.
[3] Yeatman TJ,Bland KI.Staging of breast cancer.In:Bland KJ,Copel and Ⅲ EM.The breast-comprehensive management benign and malignant disease.Philadelphia[M].Saunders Company,1991.313-330.
, 百拇医药
[4] Bloom HJG,Richardson WW.Histological grading and prognosis in breast cancer[J].Br J Cancer,1997,11:359-377.
[5] Veronese S,Mauri FA,Caffo,O,et al.bax immunohistochemical expression in breast carcinoma:a study with long term follow-up[J].Int J Cancer (pred.Oncol),1998,79:13-18.
[6] Mustonen M,Raunio H,Paakko P,et al.The extent of apoptosis inversely associated with bcl-2 expression in premalignant and maligntnt breast lesions[J].Histopathology,1997,31:347-354.
, http://www.100md.com
[7] Joensuu H,Pylkkanen L,Tokkauen S.Bcl-2 protein expression and long term survival in breast cancer[J].Am J Pathol,1994,145:1191-1198.
[8] Berardo MD,Elledge RM,de Moor C,et al.bcl-2 and apoptosis in lymph node positive breast carcinoma[J].Cancer,1998,28:1296-1302.
[9] 宋振川，吴祥德，王桂兰，等.抗癌药物对乳癌细胞动力学及凋亡基因bcl-2/bax的影响[J].中华实验外科杂志，1999，16(2)：134-135.
[收稿日期]2000-03-23, 百拇医药
单位：黄建华(湖南医科大学 附属湘雅医院外科)；吕新生(湖南医科大学 附属湘雅医院外科)；刘少华(湘雅医院肿瘤科)；周建华(病理学都研室；中国湖南 长沙 410008)
关键词：乳腺肿瘤/遗传学；原癌基因蛋白质C-bcl-2/遗传学；癌基因/遗传学；乳腺肿瘤/病理学；脱噬作用
湖南医学000404[摘要]
目的检测bcl-2和 bax基因蛋白在乳癌中的表达，以探讨其在乳癌发生、发展中的作用及其临床病理学意义。方法40例乳癌和31例乳腺良性病变，用免疫组化S-P法检测其bcl-2和bax的表达。结果bcl-2基因蛋白在乳癌中心、癌旁、良性病变表达阳性率分别为72.5%(29/40)，45.0(18/40)和96.8%(30/31)(P<0.01)；按肿瘤细胞分级Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ级的bcl-2表达强度分别为(2.08±0.29)，(1.23±0.28)和(0.73±0.23)(P<0.01)。bax基因在乳癌中心、癌旁、良性病变中的表达强度分别为(0.88±0.13)，(1.20±0.10)和(1.16±0.17)(P<0.05)。结论bcl-2基因蛋白在乳癌中高表达，bax基因蛋白则为低表达。说明其细胞凋亡受抑制。bcl-2的高表达可部分反映乳癌的生物学行为和预后良好。
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[中图分类号] R737.9；R730.23+1.3 [文献标识码] A [文章编号] 1001-9421(2000)04-0251-03
Clinico-pathological Significance of the bcl-2 and bax Oncoprotein Expression in the Breast Cancer
HUANG Jian-hua LU Xing-sheng LIU Shao-hua ZHOU Jian-hua
(Dept. of Surgery)
(Dept.of Neoplasm,Affiliated Xiangya Hospital of Hunan Medical University)
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(Dept. of Pathology,Hunam Medical University,Changsha,410008,China)
[Abstract]
Objective To explore the clinico-pathological significance of bcl-2 and bax oncoprotein exression in the growth and development of breast carcinoma.Methods The expressions of bcl-2 and bax oncoproteins in the specimen from forty cases of primary breast cancers and para-carcinoma as well as thirty-one cases of benign breast lesions were detected by immunohistochemical S-P method.Results The positive expressions of bcl-2 oncoprotein in the primary breast cancers，para-carcinoma tissues and benign lesion tissues were 72.5%(29/40),45.0%(18/40) and 96.8(30/31) respectively;whereas the scores of staining intensity of bcl-2 in the tumors of Grade Ⅰ，Grade Ⅱ and Grade Ⅲ were (2.08±0.29),(1.23±0.28) and (0.73±0.23) respectively(P<0.01).The expression scores of staining intensity from bax gene in the primary breast cancers，para-carcinoma and benign lesion tissues were (0.88±0.13),(1.20±0.10) and (1.16±0.17) correspondingly(P<0.05).Conclusions As compared to the para-carcinoma tissues,the expression of bcl-2 oncoprotein is increased in the breast carcinoma tissues,while that of bax oncoprotein is decreased.It may imply that bcl-2 and bax oncoprotein play an important role in the growth and development of breast carcinoma.High level of Bcl-2 oncoprotein expression may partly reflect the biological behavior of breast cancer and a favorable prognosis.
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[key words] breast neoplasms/GE; oncogenes/GE; proto-oncogene proteins c-bcl-2/GE; breast neoplasms/PA； apoptosis
近年来，有关细胞凋亡及凋亡相关基因在恶性肿瘤的发生、发展中作用的研究日益受到人们的重视[1，2]。bcl-2和bax是目前所知的一对作用相反的凋亡抑制和促进基因之一，两者的平衡对细胞凋亡起着重要作用。本研究通过检测乳腺癌组织的bcl-2，bax的表达，探讨其在乳癌的发生、发展中的作用以及判断预后价值。
1 材料与方法
1.1 病例资料 1998年3月至1998年12月，经病理确诊的乳腺癌40例，平均年龄(48.9±9.3)岁。按TNM分期[3]：Ⅰ期者4例，Ⅱ期者22例，Ⅲ期者12例，Ⅳ期者2例。按Bloom-Richardson[4]进行肿瘤细胞组织学分级：Ⅰ级者12例，Ⅱ级者13例，Ⅲ级者15例。其中，32例术前行1～3次不等的CMF化疗，8例术前未经化疗。乳腺良性病变31例，平均年龄(37.7±8.0)岁。经病理证实乳腺纤维瘤18例，乳腺小叶增生13例。
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1.2 检测方法 bcl-2和bax基因蛋白检测均采用S-P免疫组化法染色。
1.2.1 主要试剂 bcl-2一抗和bax一抗：稀释度均为1/50，美国Santa Cruz公司生产，购自北京中山生物技术有限公司。
1.2.2 方法 链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶连接法(S-P法)免疫组织化学染色。主要步骤：①标本组织经福尔马林固定，常规石蜡包埋；②连续切片4 μm厚，常规脱蜡至无水酒精；②0.1%胰酶消化，微波修复抗原；④滴加稀释一抗(bcl-2 1：50,bax 1：50)，孵育；⑤滴加生物素标记的第二抗体，37℃孵育30 min；⑥滴加链霉菌抗生物素蛋白-过氧化物酶溶液；⑦滴加新鲜配制的即用型DAB液，随即显微镜下观察至出现染色。
1.2.3 判断标准及试验对照 bcl-2和bax阳性染色为脑浆黄棕色，以染色的阳性细胞<20%为(-)，>20%为阳性标准[5]。20%～50%为(+)，51%～75%为(
)，>75%为()。按评分系统(-)为0分，(+)为1分，()为2分，()为3分。以试剂盒提供的淋巴瘤标本染色切片做阳性对照；省略第一抗原，以PBS代替作阴性对照。, http://www.100md.com
1.3 统计学处理 bcl-2，bax的阳性率以百分数表示；各阳性率之差别检验用χ2检验。按染色强度计分，组间比较用配对t检验。统计计算用电子计算机SPSS 7.0软件处理。
2 结果
2.1 bcl-2和bax的表达 bcl-2表达的阳性率在良性病变高于乳癌组织，乳癌中心高于癌旁组织(P<0.05)；bcl-2表达强度乳癌中心高于癌旁组织，乳癌中心组织胞浆均染成深棕色，而癌旁组织胞浆染色少而淡(封四图1、图2)，良性病变高于乳癌组织(P＝0.001)。bax表达的阳性率在各病变组中无差别(P>0.05)，按 bax 表达阳性强度在癌中心表达低于癌旁组织(P＝0.022)，乳癌中心组织胞浆染色浅而淡，癌旁组织胞浆染成深棕色(封四图3、图4)，在良性病变的表达低于正常(P＝0.025)。见表1。
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图1 乳腺癌中心组织中乳腺浸润性导管
癌癌细胞胞浆呈bcl-2强阳性(SP×400)
图2 乳腺癌癌旁组织中乳腺浸润性导管
癌癌旁导管上皮细胞胞浆呈bcl-2
弱阳性 ( SP×400 )
图3 乳腺癌中心组织中乳腺单纯癌癌细
胞胞浆呈bax弱阳性 ( SP×400 )
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图4 乳腺癌癌旁组织中乳腺单纯癌癌旁
导管上皮细胞胞浆呈bax强阳性( SP×400 )
表1 乳腺疾病中的bcl-2和 bax 的表达 取材部位
n
bcl-2
bax
表达强度
阳性数(%)
表达强度
阳性数(%)
乳腺癌中心
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1.30±0.17
29(72.5)
0.88±0.13
25(62.5)
乳腺癌癌旁
40
0.60±0.122)
18(45.0)1)
1.20±0.101)
35(87.5)
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乳腺良性病变
31
2.29±0.142)
30(96.8)2)
1.16±0.171)
22(71.0)
乳腺正常组织
31
1.10±0.14
23(74.0)
1.58±0.162)
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29(93.5)
与乳腺癌中心组比较：1)P<0.05；P<0.001
2.2 乳腺癌bcl-2和bax表达与临床病理因素的关系 按年龄分为≤50岁和>50岁二组，bcl-2、bax在二组间的阳性率无差别。按TNM分期各期乳癌的bcl-2、bax表达阳性率无差异(P>0.05)。表达强度亦无差异(P>0.05)。乳癌的分化程度与bcl-2和bax的关系，按Bloom-Richardson 分级进行比较，结果显示：肿瘤分级越高，bcl-2阳性率越低，表达强度也低(P<0.05)。但是bax表达在不同分级乳癌无差别。见表2。
表2 不同分化级别乳癌的bcl-2，bax表达强度(x±s) 乳癌分级
n
bcl-2强度计分
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bax强度计分
Ⅰ级
12
2.08±0.29
1.00±0.25
Ⅱ级
13
1.23±0.281)
1.00±0.23
Ⅲ级
15
0.73±0.232)
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0.67±0.21
与肿瘤Ⅰ级比较：1)P<0.05；2)P<0.001
本组中浸润性导管癌、单纯癌、其他类型乳癌三组的bcl-2、bax表达阳性率均无差别；手术切除后病检发现有淋巴结转移者24例，无转移者16例，两组间bcl-2，bax表达无差别(P＝0.467)。按淋巴转移数目≤3个和>3个两组比较，bcl-2，bax表达亦无差别。另外还发现bcl-2表达在ER(+)组与ER(-)组无差异；PR(+)与PR(-)组bcl-2亦无差异。无论术前有无化疗及化疗次数，其bcl-2，bax表达阳性率均无差别。
3 讨论
研究表明，bcl-2和新近发现的bax基因与细胞凋亡的调控甚为密切。本研究发现，bcl-2基因在乳腺癌中的表达(72.5%)，高于旁癌组织的表达(45.0%)，而乳腺良性病变的表达(96.8%)又高于前两组。这与Mustonen 等的结果一致，该作者检测了11例乳腺导管增生、3例乳腺纤维瘤、12例非典型增生、10例原位癌和17例小叶癌，发现良性导管增生、纤维腺瘤的bcl-2表达强度计分最高，非典型增生次之，原位癌和浸润癌最低。提示bcl-2表达的下调在乳腺癌的发生过程中是一个相对早期事件[6]。乳腺癌中bcl-2的表达与生物学行为的关系一直是研究热点。研究发现分化好的乳癌的bcl-2表达高于分化差的乳癌[7，8]。Joensuu等检查分化Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ级的乳癌bcl-2表达分别为83%，54%和19%(P<0.001)[7]。berardo等对979例淋巴结阳性的乳癌进行bcl-2检测并与预后因素相关分析，发现bcl-2表达在淋巴结转移≤3个组高于>3个组，ER阳性组高于ER阴性组，肿块≤20 cm 组高于>20 cm 组。以上结果提示bcl-2高表达者预后较好[8]。本结果发现，乳腺癌的肿瘤细胞分级不同与其bcl-2的阳性表达有相关性。乳腺癌Ⅰ级的bcl-2阳性率为91.75，Ⅱ级为76.9%，Ⅲ级为53.3%。按bcl-2染色强度计分进行比较，在Ⅰ，Ⅱ，Ⅲ级分化肿瘤的bcI-2表达强度分别是(2.08±0.29)，(1.23±0.28)和(0.73±0.23)。说明乳腺癌分化越好，bcl-2表达越高。
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宋振川等[9]研究发现术前化疗组bcl-2表达(FI值)高于对照组，认为化疗后组织分级高、增殖活性高的细胞出现凋亡，使组织分级低、增殖活性亦低的细胞聚集，故bcl-2表达升高。说明化疗药物通过细胞凋亡而发挥作用[9]。但本组化疗组与未化疗组比bcl-2表达阳性率未发现明显差别(75%和72.9%)，不同化疗次数之间bcl-2表达也未显示出差异。
Bax和bcl-2是一对正负凋亡调节基因，bax可和bcl-2蛋白形成异二聚体，能使bcl-2蛋白失活，对细胞凋亡有促进作用[5]。本实验发现正常组织的bax表达高于良性病变，乳癌中心组织的表达低于癌旁组织。提示癌组织中凋亡较正常和癌旁组织减少，癌细胞对凋亡的敏感性较低，易于逃避凋亡原的刺激，致使细胞存活期延长，细胞凋亡受抑制。
本实验中乳癌不同分级的乳癌组织其bax表达未发现差异，可能与化疗后凋亡程度发生改变等综合作用有关。本实验还观察了bax与诸多临床病理参数的相关性，未发现明显意义。[作者简介] 黄建华(1962-)，男，湖南长沙人，副教授，医学博士，主要从事肝胆外科及乳腺疾病研究。
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[参 考 文 献]
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[收稿日期]2000-03-23, 百拇医药