四君子汤加味对烫伤大鼠肠粘膜屏障和血浆细胞因子的影响
作者：郭 力 刘承荣 刘正玉 熊爱兵
单位：泸州医学院附属医院烧伤整形科 四川省泸州市 646000
关键词：烧伤；肠粘膜；肿瘤坏死因子；一氧化氮；丙二醛；四君子汤
严重烫伤可导致肠粘膜的损伤 严重烫伤可导致肠粘膜的损伤，并为引起肠源性感染的重要因素[1]，有学者认为氧自由基、肿瘤坏死因子和一氧化氮在肠粘膜的损伤中起着重要作用[2，3].本研究采用四君子汤加味观察对烫伤大鼠肠粘膜有无保护作用和对肠粘膜及血浆中TNE.NO和MDA含量影响，从机制上探讨该中药煎剂对烫伤大鼠肠粘膜的保护作用。1材料和方法1.1材料健康Wistar大鼠70只，体质量180g～220g，随机分为3组，即烫伤治疗组(32只)，烫伤对照组(32只)和正常对照组(6只)，前2组在实验无始后3，5，7，9d各活杀8只，复制大鼠背部8cmx4.5cmⅢ度烫伤区，单笼喂养，自由进食水.1.2方法①中药制备：将茯苓、炒白术、党参、甘草、大黄按2：2：2：1：1质量比例混合，生药质量80g，加水250mL，水煎30min,过滤浓缩至1kg/L生药的煎剂。②给药方法：动物烫伤后12h开始，烫伤治疗组管饲中药煎剂2mL，烫伤对照组和正常对照组管饲蒸馏水2mL，1次/12h，至动物活杀.③标本采集：在无菌条件下取腹静脉血2mL～2mL，取距盲肠近端约2cm～10cm回肠组织，清洗后部分组织制成100g/L匀浆液，部分用作光、电镜观察。④检测指标：肿瘤坏死因子采用酶联免疫测定，试剂盒虫北京邦定泰克公司提供，一氧化氮和丙二醛测试盒由南京建成生物工程所提供，按照说明操作，回肠粘膜作常规制片光镜、电镜观察。统计学处理所有数据用EXCEL软件和SPSS统计程序包作统计学处理，结果用±S表示。2结果2.1血浆和肠粘膜TNF变化正常对照组分别为(18.1±2.0)ng/L和(7.51±2.7)ng/L，烫伤治疗组血浆和肠粘膜TNT最高值分别为(33.3±5.2)ng/L和(12.5±2.4)ng/L，并随治疗时间延长呈逐渐降低态势，到d9基本接近正常，烫伤对照组肠粘膜TNF最高值为(15.3±2.2)ng/L，并也呈现降低态势，但与烫伤治疗组相比有显著差异(P<0.05)，而烫伤对照组血浆中TNF呈现逐渐增高态势，最高值达(55.8±6.5)ng/L，与烫伤治疗组相比有非常显著差异(P<0.01)。2.2血浆和肠粘膜NO2/NO3含量变化正常对照组分别为(62.3±4.1)μmol/L和(20.2±1.1)μmol/L，烫伤治疗组最高值分别为(51.9±3.8)μmol/L和(72.2±3.7)μmol/L，并随治疗时间延长逐渐降低，烫伤对照组在伤后d3仅为(82.47.9)μmol/L和(81.7±5.3)μmol/L并均呈逐渐升高态势到dg分别达(103±10.3)μmol/L和(201.3±19.0)μmol/L与烫伤治疗组比有非常显著差异(P<0.01)。2.3血浆和肠粘膜MDA含量变化正常对照组血浆和肠粘膜MDA值分别为(8.9±0.7)nm/mL和(56.0±2.2)nm/mL.烫伤治疗组最高仅为(13.4±1.2)nm/mL和(87.7±3.6)nm/mL，并呈降低态势，在7d～9d接近正常，而烫伤对照组则呈逐渐升高趋势最高达(17.5±1.1)nm/mL和(145.1±10.9)nm/mL与烫伤治疗组相比有非常显著差异(P<0.01)。2.4回肠粘膜病理学改变烫伤对照组电镜观察：上皮游离缘绒毛不规则，减少变短，细胞核形态不规则，线粒体增多、断嵴、溶解，粗面均内网扩张脱颗粒；光镜观察：绒毛部分坏死脱落，粘膜层充血水肿，有较多中性白细胞浸润，烫伤治疗组电镜和光镜观察有类似上述改变，但程度明显轻于烫伤对照组。3讨论有学者认为四君子汤有助于维护小肠吸收和屏障功能[4]。而大黄具有攻下泻热，消痞除满，增加肠道蠕动和推进功能的作用，烧伤后可因多种因素致肠粘膜损伤，而TNF是致伤因素中的一重要因子，并且胃肠道是TNF主要靶器官之一，它在组织中含量高低可反映组织损伤程度[3].实验结果表明，烫伤治疗组肠粘膜的损害远较烫伤对照组轻，同时肠粘膜和血浆中TNT因子水平也显著低于烫伤对照组，说明用中药后通过调节营养代谢，促进内脏蛋白质合成，促进肠道平滑肌收缩，从而间接起到减少肠粘膜的损伤，维护肠道功能的作用。NO是一种重要信使分子，参与对胃肠道功能的调节，当机体受到损伤时，组织中的NO含量大大增加[2].MDA为脂质过氧化物的分解产物，测定其含量可间接估计细胞脂质过氧化程度[5]，本研究结果表明，大鼠烫伤后肠粘膜、血浆中MDA和NO值均明显升高，呈逐渐上升趋势，但经中药治疗后，血浆和肠粘膜中的MDA、NO含量在所观察时相内均低于烫伤对照组，并随治疗时间延长，其水平逐渐趋于正常，认为与应用中药煎剂后，肠粘膜屏障得到保护并减少了体内TNF的生成，进而减少了NO和MDA的产生，虽然我们的结果表明，烫伤大鼠管饲中药煎剂后可减少TNF，MDA和NO含量，并可减轻大鼠肠粘膜的损伤，但具体作用机制以及作用环节有待近一步探讨。
, http://www.100md.com
参考文献：
[1]Manson EL,Coenen JM,Klason HJ,Horwitz EH,Bacteria trans-location in experimentally burned mice with wounds colonized by pseudomonas areuginosa.J Trauma,1992;33:654-658
[2]Konturek SK,Konturek PC.Role of nitric oxide in the digestive system.Digestion,1995;56:1-2
[3]Liu XS,Luo ZH,Gang ZC,Huang WH,Li A,The significance of changes in serum TNF activity in severely burned patients.Burns,1994；20：40-44
[4] 阮仕荣，四君子汤对烧伤豚鼠早期代谢营养的影响，中华整形烧伤外科杂志，1994：201-205
[5]Draper H,Hadley M.Malondialdehyde determination as index of lipid peroxidation.Methods Enzymol,1990;186:421-425
收稿日期：1999-12-08, http://www.100md.com
单位：泸州医学院附属医院烧伤整形科 四川省泸州市 646000
关键词：烧伤；肠粘膜；肿瘤坏死因子；一氧化氮；丙二醛；四君子汤
严重烫伤可导致肠粘膜的损伤 严重烫伤可导致肠粘膜的损伤，并为引起肠源性感染的重要因素[1]，有学者认为氧自由基、肿瘤坏死因子和一氧化氮在肠粘膜的损伤中起着重要作用[2，3].本研究采用四君子汤加味观察对烫伤大鼠肠粘膜有无保护作用和对肠粘膜及血浆中TNE.NO和MDA含量影响，从机制上探讨该中药煎剂对烫伤大鼠肠粘膜的保护作用。1材料和方法1.1材料健康Wistar大鼠70只，体质量180g～220g，随机分为3组，即烫伤治疗组(32只)，烫伤对照组(32只)和正常对照组(6只)，前2组在实验无始后3，5，7，9d各活杀8只，复制大鼠背部8cmx4.5cmⅢ度烫伤区，单笼喂养，自由进食水.1.2方法①中药制备：将茯苓、炒白术、党参、甘草、大黄按2：2：2：1：1质量比例混合，生药质量80g，加水250mL，水煎30min,过滤浓缩至1kg/L生药的煎剂。②给药方法：动物烫伤后12h开始，烫伤治疗组管饲中药煎剂2mL，烫伤对照组和正常对照组管饲蒸馏水2mL，1次/12h，至动物活杀.③标本采集：在无菌条件下取腹静脉血2mL～2mL，取距盲肠近端约2cm～10cm回肠组织，清洗后部分组织制成100g/L匀浆液，部分用作光、电镜观察。④检测指标：肿瘤坏死因子采用酶联免疫测定，试剂盒虫北京邦定泰克公司提供，一氧化氮和丙二醛测试盒由南京建成生物工程所提供，按照说明操作，回肠粘膜作常规制片光镜、电镜观察。统计学处理所有数据用EXCEL软件和SPSS统计程序包作统计学处理，结果用±S表示。2结果2.1血浆和肠粘膜TNF变化正常对照组分别为(18.1±2.0)ng/L和(7.51±2.7)ng/L，烫伤治疗组血浆和肠粘膜TNT最高值分别为(33.3±5.2)ng/L和(12.5±2.4)ng/L，并随治疗时间延长呈逐渐降低态势，到d9基本接近正常，烫伤对照组肠粘膜TNF最高值为(15.3±2.2)ng/L，并也呈现降低态势，但与烫伤治疗组相比有显著差异(P<0.05)，而烫伤对照组血浆中TNF呈现逐渐增高态势，最高值达(55.8±6.5)ng/L，与烫伤治疗组相比有非常显著差异(P<0.01)。2.2血浆和肠粘膜NO2/NO3含量变化正常对照组分别为(62.3±4.1)μmol/L和(20.2±1.1)μmol/L，烫伤治疗组最高值分别为(51.9±3.8)μmol/L和(72.2±3.7)μmol/L，并随治疗时间延长逐渐降低，烫伤对照组在伤后d3仅为(82.47.9)μmol/L和(81.7±5.3)μmol/L并均呈逐渐升高态势到dg分别达(103±10.3)μmol/L和(201.3±19.0)μmol/L与烫伤治疗组比有非常显著差异(P<0.01)。2.3血浆和肠粘膜MDA含量变化正常对照组血浆和肠粘膜MDA值分别为(8.9±0.7)nm/mL和(56.0±2.2)nm/mL.烫伤治疗组最高仅为(13.4±1.2)nm/mL和(87.7±3.6)nm/mL，并呈降低态势，在7d～9d接近正常，而烫伤对照组则呈逐渐升高趋势最高达(17.5±1.1)nm/mL和(145.1±10.9)nm/mL与烫伤治疗组相比有非常显著差异(P<0.01)。2.4回肠粘膜病理学改变烫伤对照组电镜观察：上皮游离缘绒毛不规则，减少变短，细胞核形态不规则，线粒体增多、断嵴、溶解，粗面均内网扩张脱颗粒；光镜观察：绒毛部分坏死脱落，粘膜层充血水肿，有较多中性白细胞浸润，烫伤治疗组电镜和光镜观察有类似上述改变，但程度明显轻于烫伤对照组。3讨论有学者认为四君子汤有助于维护小肠吸收和屏障功能[4]。而大黄具有攻下泻热，消痞除满，增加肠道蠕动和推进功能的作用，烧伤后可因多种因素致肠粘膜损伤，而TNF是致伤因素中的一重要因子，并且胃肠道是TNF主要靶器官之一，它在组织中含量高低可反映组织损伤程度[3].实验结果表明，烫伤治疗组肠粘膜的损害远较烫伤对照组轻，同时肠粘膜和血浆中TNT因子水平也显著低于烫伤对照组，说明用中药后通过调节营养代谢，促进内脏蛋白质合成，促进肠道平滑肌收缩，从而间接起到减少肠粘膜的损伤，维护肠道功能的作用。NO是一种重要信使分子，参与对胃肠道功能的调节，当机体受到损伤时，组织中的NO含量大大增加[2].MDA为脂质过氧化物的分解产物，测定其含量可间接估计细胞脂质过氧化程度[5]，本研究结果表明，大鼠烫伤后肠粘膜、血浆中MDA和NO值均明显升高，呈逐渐上升趋势，但经中药治疗后，血浆和肠粘膜中的MDA、NO含量在所观察时相内均低于烫伤对照组，并随治疗时间延长，其水平逐渐趋于正常，认为与应用中药煎剂后，肠粘膜屏障得到保护并减少了体内TNF的生成，进而减少了NO和MDA的产生，虽然我们的结果表明，烫伤大鼠管饲中药煎剂后可减少TNF，MDA和NO含量，并可减轻大鼠肠粘膜的损伤，但具体作用机制以及作用环节有待近一步探讨。
, http://www.100md.com
参考文献：
[1]Manson EL,Coenen JM,Klason HJ,Horwitz EH,Bacteria trans-location in experimentally burned mice with wounds colonized by pseudomonas areuginosa.J Trauma,1992;33:654-658
[2]Konturek SK,Konturek PC.Role of nitric oxide in the digestive system.Digestion,1995;56:1-2
[3]Liu XS,Luo ZH,Gang ZC,Huang WH,Li A,The significance of changes in serum TNF activity in severely burned patients.Burns,1994；20：40-44
[4] 阮仕荣，四君子汤对烧伤豚鼠早期代谢营养的影响，中华整形烧伤外科杂志，1994：201-205
[5]Draper H,Hadley M.Malondialdehyde determination as index of lipid peroxidation.Methods Enzymol,1990;186:421-425
收稿日期：1999-12-08, http://www.100md.com
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