HPLC法测定盐酸格拉司琼片剂的含量
作者：夏保云 吴强 何广卫
单位：夏保云(中国科学技术大学应用化学系博士)；吴强 何广卫(合肥医工医药研究所 合肥 230031)
关键词：高效液相色谱法；盐酸格拉司琼
药物分析杂志000414 摘要 目的：采用高效液相色谱法测定盐酸格拉司琼片中盐酸格拉司琼的含量。方法：用Spherisorb-CN柱(250 mm×4.6 mm)，以甲醇-0.05 mol.L-1醋酸钠缓冲液-三乙胺(70∶30∶0.25，用冰醋酸调pH至7)为流动相，用紫外检测器于301 nm波长处检测。结果：线性范围为0.005～0.015 mg.mL-1(r=0.999 6)。平均回收率为99.44%，RSD=1.16%(n=3)。检测限为0.05 μg.mL-1。结论：本法具有操作简便，分析快速准确、干扰小等优点。
, 百拇医药
Determination of Granisetron Hydrochloride Tablets by HPLC
Xia Baoyun Wu Qiang He Guangwei
(Hefei Instant Pharmaceutical Institute,Hefei 230031)
Abstract Objective：A HPLC method was established for the determination of granisetron hydrochloride in its tablets.Method:Granisetron hydrochloride can be separated on Spherisorb-CN column with a mixture of methyl alcohol,0.05 mol.L-1 acetate buffer and triethylamine(70∶30∶0.25)as mobile plase and detected at 301 nm.The flow rate was 1.0 mL.min-1.Results:The standard curve was linear in the concentration range 0.005～0.015 mg.mL-1 and the correlation coefficient was 0.999 6.The average recovery was 99.44% and 1.16% respectively.The detection limit was 0.05 μg.mL-1.Conclusion:The method is simple,rapid,accurate and reliable.
, 百拇医药
Key words HPLC,granisetron hydrochloride▲
盐酸格拉司琼(商品名：Kytril)是具有高度选择性的、强有力的5-HT3受体拮抗剂。用于高度催吐化疗药物的止吐，解决化疗、放疗过程中重要的副反应，从而改善患者生活质量。国内已有数家研制成功，其原料、片剂及注射剂均获卫生部批准。
本文采用HPLC法测定盐酸格拉司琼片的含量，操作简便，结果准确可靠，辅料及降解物等不干扰主药测定。
1 仪器与试药
日本岛津高效液相色谱仪(LC-10AT高压泵，SPD-10A紫外检测器，WDL-95色谱工作站)，日本岛津UV-2401PC紫外分光光度计。
甲醇、醋酸钠、三乙胺均为分析纯。
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盐酸格拉司琼对照品，自研原料精制，含量99.82%；盐酸格拉司琼片，自研，批号：980514，980521，980525。
2 色谱条件
色谱柱：Spherisorb-CN(250 mm×4.6 mm);流动相：甲醇-0.05 mol.L-1醋酸钠缓冲液-三乙胺(70∶30∶0.25，用冰醋酸调pH至7)；流速：1 mL.min-1；检测波长：301 nm，理论板数：4 537。
3 实验方法与结果
3.1 线性关系 精密称取盐酸格拉司琼对照品12.5 mg，置50 mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取2.0，3.0，4.0，5.0，6.0 mL分别置100 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。各取溶液10 μL分别注入色谱仪，记录色谱图，量取峰面积，由峰面积(A)对溶液浓度(C)线性回归，得回归方程(n=5)：
, 百拇医药
A=2.469×104C+2.624×104 r=0.999 6
盐酸格拉司琼在0.005～0.015 mg.mL-1浓度范围内呈线性。
3.2 回收率测定 分别精密称取盐酸格拉司琼对照品8，10，12 mg置100 mL容量瓶中，加入处方量辅料(相当于盐酸格拉司琼10 mg)，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取10 mL置100 mL容量瓶中，用水稀释至刻度作为供试品溶液。分别量取10 μL注入色谱仪，量取峰面积，计算回收率。经实验测得平均回收率为99.44%RSD为1.16%，n=3。
3.3 精密度实验 在选定的色谱条件下，对照品溶液连续进样5次，按峰面积计算RSD为0.85%。
3.4 稳定性试验 对照品溶液置无色透明容量瓶中，放置12 h，对照品溶液峰面积基本不变，按峰面积计算RSD为1.14%，溶液稳定。
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3.5 专属性考察 将本品置120 ℃高温下4 h，进行破坏性试验，然后用水配制成每1 mL含盐酸格拉司琼0.01 mg溶液，取10 μL，在预定灵敏度下(用预试溶液调节)，注入液相色谱仪中，考察降解溶液的分离状况；同时改变流动相比例，延长保留时间，对降解溶液进行分析，也未发现有新的杂质峰出现。试验结果表明，盐酸格拉司琼与其降解物质的分离效果令人满意(图1)，空白溶剂(水)、辅料在此条件下无干扰。
图1 对照品(A)与样品降解(B)色谱图
1.格拉司琼
3.6 样品含量测定 取本品研细，精密称取细粉适量(约相当于盐酸格拉司琼1 mg)，置100 mL容量瓶中，加水适量，充分振摇，溶解，用水稀释至刻度，摇匀，用0.45 μm滤膜滤过，以续滤液作为供试品溶液。精密量取10 μL注入液相色谱仪；另取经105 ℃干燥至恒重的盐酸格拉司琼对照品用水制成每1 mL含盐酸格拉司琼10 μg的溶液，作为对照品溶液，同法测定，按外标法计算，结果见表1。
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表1 盐酸格拉司琼片含量测定结果(n=3) 批号
含量/%
RSD/%
980514
100.3
0.56
980521
98.2
0.69
980525
100.5
0.58
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4 讨论
本文先后采用了5种不同组分、比例的流动相，经实验，采用甲醇-0.05 mol.L-1醋酸钠缓冲液-三乙胺(70∶30∶0.25，用冰醋酸调pH至7)为本品含量测定的流动相，所得峰形较好，分离度令人满意。具有专属性强、无干扰、分析快速准确的特点，且操作简便。■
参考文献
1.Pinguet F,Bressolle F,Martel P,et al.High-performance liquid chromatographic determination of granisetron in human plasma.J Chromatogr B,1996,675(1):99
2.安登魁.药物分析.济南出版社.1992.416
(本文于1999年5月4日收到), http://www.100md.com
单位：夏保云(中国科学技术大学应用化学系博士)；吴强 何广卫(合肥医工医药研究所 合肥 230031)
关键词：高效液相色谱法；盐酸格拉司琼
药物分析杂志000414 摘要 目的：采用高效液相色谱法测定盐酸格拉司琼片中盐酸格拉司琼的含量。方法：用Spherisorb-CN柱(250 mm×4.6 mm)，以甲醇-0.05 mol.L-1醋酸钠缓冲液-三乙胺(70∶30∶0.25，用冰醋酸调pH至7)为流动相，用紫外检测器于301 nm波长处检测。结果：线性范围为0.005～0.015 mg.mL-1(r=0.999 6)。平均回收率为99.44%，RSD=1.16%(n=3)。检测限为0.05 μg.mL-1。结论：本法具有操作简便，分析快速准确、干扰小等优点。
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Xia Baoyun Wu Qiang He Guangwei
(Hefei Instant Pharmaceutical Institute,Hefei 230031)
Abstract Objective：A HPLC method was established for the determination of granisetron hydrochloride in its tablets.Method:Granisetron hydrochloride can be separated on Spherisorb-CN column with a mixture of methyl alcohol,0.05 mol.L-1 acetate buffer and triethylamine(70∶30∶0.25)as mobile plase and detected at 301 nm.The flow rate was 1.0 mL.min-1.Results:The standard curve was linear in the concentration range 0.005～0.015 mg.mL-1 and the correlation coefficient was 0.999 6.The average recovery was 99.44% and 1.16% respectively.The detection limit was 0.05 μg.mL-1.Conclusion:The method is simple,rapid,accurate and reliable.
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Key words HPLC,granisetron hydrochloride▲
盐酸格拉司琼(商品名：Kytril)是具有高度选择性的、强有力的5-HT3受体拮抗剂。用于高度催吐化疗药物的止吐，解决化疗、放疗过程中重要的副反应，从而改善患者生活质量。国内已有数家研制成功，其原料、片剂及注射剂均获卫生部批准。
本文采用HPLC法测定盐酸格拉司琼片的含量，操作简便，结果准确可靠，辅料及降解物等不干扰主药测定。
1 仪器与试药
日本岛津高效液相色谱仪(LC-10AT高压泵，SPD-10A紫外检测器，WDL-95色谱工作站)，日本岛津UV-2401PC紫外分光光度计。
甲醇、醋酸钠、三乙胺均为分析纯。
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盐酸格拉司琼对照品，自研原料精制，含量99.82%；盐酸格拉司琼片，自研，批号：980514，980521，980525。
2 色谱条件
色谱柱：Spherisorb-CN(250 mm×4.6 mm);流动相：甲醇-0.05 mol.L-1醋酸钠缓冲液-三乙胺(70∶30∶0.25，用冰醋酸调pH至7)；流速：1 mL.min-1；检测波长：301 nm，理论板数：4 537。
3 实验方法与结果
3.1 线性关系 精密称取盐酸格拉司琼对照品12.5 mg，置50 mL容量瓶中，加水溶解并稀释至刻度，摇匀。精密量取2.0，3.0，4.0，5.0，6.0 mL分别置100 mL容量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀。各取溶液10 μL分别注入色谱仪，记录色谱图，量取峰面积，由峰面积(A)对溶液浓度(C)线性回归，得回归方程(n=5)：
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A=2.469×104C+2.624×104 r=0.999 6
盐酸格拉司琼在0.005～0.015 mg.mL-1浓度范围内呈线性。
3.2 回收率测定 分别精密称取盐酸格拉司琼对照品8，10，12 mg置100 mL容量瓶中，加入处方量辅料(相当于盐酸格拉司琼10 mg)，加水溶解并稀释至刻度，摇匀，滤过，弃去初滤液，精密量取10 mL置100 mL容量瓶中，用水稀释至刻度作为供试品溶液。分别量取10 μL注入色谱仪，量取峰面积，计算回收率。经实验测得平均回收率为99.44%RSD为1.16%，n=3。
3.3 精密度实验 在选定的色谱条件下，对照品溶液连续进样5次，按峰面积计算RSD为0.85%。
3.4 稳定性试验 对照品溶液置无色透明容量瓶中，放置12 h，对照品溶液峰面积基本不变，按峰面积计算RSD为1.14%，溶液稳定。
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3.5 专属性考察 将本品置120 ℃高温下4 h，进行破坏性试验，然后用水配制成每1 mL含盐酸格拉司琼0.01 mg溶液，取10 μL，在预定灵敏度下(用预试溶液调节)，注入液相色谱仪中，考察降解溶液的分离状况；同时改变流动相比例，延长保留时间，对降解溶液进行分析，也未发现有新的杂质峰出现。试验结果表明，盐酸格拉司琼与其降解物质的分离效果令人满意(图1)，空白溶剂(水)、辅料在此条件下无干扰。
图1 对照品(A)与样品降解(B)色谱图
1.格拉司琼
3.6 样品含量测定 取本品研细，精密称取细粉适量(约相当于盐酸格拉司琼1 mg)，置100 mL容量瓶中，加水适量，充分振摇，溶解，用水稀释至刻度，摇匀，用0.45 μm滤膜滤过，以续滤液作为供试品溶液。精密量取10 μL注入液相色谱仪；另取经105 ℃干燥至恒重的盐酸格拉司琼对照品用水制成每1 mL含盐酸格拉司琼10 μg的溶液，作为对照品溶液，同法测定，按外标法计算，结果见表1。
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表1 盐酸格拉司琼片含量测定结果(n=3) 批号
含量/%
RSD/%
980514
100.3
0.56
980521
98.2
0.69
980525
100.5
0.58
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4 讨论
本文先后采用了5种不同组分、比例的流动相，经实验，采用甲醇-0.05 mol.L-1醋酸钠缓冲液-三乙胺(70∶30∶0.25，用冰醋酸调pH至7)为本品含量测定的流动相，所得峰形较好，分离度令人满意。具有专属性强、无干扰、分析快速准确的特点，且操作简便。■
参考文献
1.Pinguet F,Bressolle F,Martel P,et al.High-performance liquid chromatographic determination of granisetron in human plasma.J Chromatogr B,1996,675(1):99
2.安登魁.药物分析.济南出版社.1992.416
(本文于1999年5月4日收到), http://www.100md.com