磷酸苯丙哌林缓释片药物动力学初步研究
作者：付桂英 李三鸣 马春娟
单位：付桂英 李三鸣(沈阳药科大学基础部，沈阳 110015)马春娟(沈阳第六制药厂，沈阳 110015)
关键词：磷酸苯丙哌林；缓释片；药代动力学；高效液相色谱法
沈阳药科大学学报000402 摘 要 建立了测定苯丙哌林血浆浓度的高效液相色谱法，并研究了该药的药动学行为.测定了3条家犬口服80 mg磷酸苯丙哌林2种制剂后的血药浓度.药动学参数如下：T12=3.8 h，tmax=4.0 h，AUC0→∞=11.6 mmol/L，MRT=6.5 h，F=91.8%.
分类号 R963
A Preliminany Study on the Pharmacokinetics of Benproperine Phosphate Sustained-Released Tablets
, http://www.100md.com
Fu Guiying,Li Sanming,Ma Chunjuan
(Department of Basic Courses,Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110015)
Abstract：A new HPLC method was established to determine the concentrations of benproperine in plasma,following oral administration.Three dogs were selected and two formulations were given respectively.The results indicated that the pharmacokinetic parameters for the sustained-released tablets were：T1/2=3.8 h,tmax=4.0 h，AUC0→∞=11.6(mmol.h)/L，MRT=6.5 h，F=91.8%.
, 百拇医药
Key words:benproperine phosphate;sustained-released tablets;pharmacokinetics;HPLC
磷酸苯丙哌林(benproperine phosphate)是一种非成瘾性镇咳药，能阻断自肺-胸膜的牵张感受器刺激而产生的迷走神经反射，镇咳作用较可待因强2～4倍，且毒性较小〔1〕，该药已作为基本的镇咳药物使用.就检测方法而言，制剂使用紫外分光光度计来进行检测，但体内检测方法报道很少.有人采用比色法测定尿中苯丙哌林的量〔2〕，但此法灵敏度低，不能用来测定血中苯丙哌林的量.本文建立了测定苯丙哌林血浆浓度的高效液相色谱法，并研究了该药的药动学行为.
1 仪器与试药
磷酸苯丙哌林对照品(山东平原制药厂)；磷酸苯丙哌林糖衣片(大连奥森制药厂，批号980603)；LC-10A高效液相色谱仪(日本岛津株式会社).
, 百拇医药
2 方法与结果
2.1 色谱条件
Hypersil ODS色谱柱(200 mm×4.6 mm,5 μm)；流动相为乙腈-磷酸盐缓冲液(0.3%磷酸加三乙胺调pH至3.0)=55∶45；流速为1.0 ml/min；检测波长UV-225 nm.
2.2 血浆样品的处理
取血浆0.5 mL，加入5 μL内标溶液(桂利嗪cinnarizine,0.06 mg/mL)，混匀，加入1 mol/L氢氧化钠溶液0.2 mL，再加入5 mL乙醚，涡流振荡5 min，3 000 r/min离心15 min，转移有机层置10 mL试管中，40℃水浴中氮气流下挥干溶剂，加流动相100 μL使残渣溶解，取20 μL注入液相色谱仪.
2.3 方法的确定
, 百拇医药
2.3.1 专属性
按上述色谱条件，磷酸苯丙哌林与内标及其它杂质分离良好，磷酸苯丙哌林和桂利嗪的保留时间分别为5.5 min，8.7 min，色谱图见图1.
2.3.2 标准曲线的制备
取空白血浆0.5 mL于10 mL具塞试管中，精密称取磷酸苯丙哌林配成的适当系列浓度溶液，使之成为相当于浓度为245，490，980，1 470，2 450 μmol/L的血浆样品.按“血浆样品的处理”项下操作法处理，取20 μL注入液相色谱仪.以样品浓度与样品和内标的峰面积比进行线性回归，标准曲线为A/Ai=0.025+1.65C×103，线性范围为245～2 450 μmol/L，最低定量浓度为245 μmol/L.
2.3.3 方法的精密度和回收率
, http://www.100md.com
取空白血浆0.5 mL，按“血浆样品的处理”项目配制低、中、高3个浓度(分别为122.5，245，2 450 μmol/L)计算血浆中磷酸苯丙哌林的回收率，结果分为70.1%，73.3%，74.2%，RSD为4.08%～8.03%，日内及日间RSD分别小于6.7%和9.2%.
3 磷酸苯丙哌林药动学研究
3.1 给药方案与血样采集
试验对象 家犬3条，与试验前一天禁食12 h，给药4 h后进食.
给药方案 采用以自身为对照，分别口服磷酸苯丙哌林缓释片和咳快好糖衣片80 mg(以苯丙哌林计)，清水送下，两次给药间隔一周，给药后0.5，1，2，3，4，5，6，8，10，12 h由后腿静脉取血5 mL，并立即移入涂有肝素的试管中，离心，分离血浆，取0.5 mL血浆备用.
, 百拇医药
Fig.1 Representative chromatograms of benproperine
A—blank plasma;B—benproperine and cinnarizine added to plasma;C—a sample 4.0 h after oral administration of 100 mg benproperine.Peak 1 and 2 are benproperine and cinnarizine.
3.2 试验结果
梯型法所得平均血药浓度-时间曲线见图2，主要药动学参数见表1.
3.3 生物等效性评价
根据下式可得磷酸苯丙哌林缓释片的相对生物利用度为
, http://www.100md.com
F%=AUC0→∞(缓释片)/AUC0→∞(参比)=91.8%.
Fig.2 Profile of mean plasma concentration versus time after oral administration of two formulations in 3 dogs
A—sustained-release tablets;B—reference tablets
Tab.1 Pharmacokinetic parameters of two benproperine formulations after an oral dose of 100 mg benproperine in 3 dogs Parameters
, 百拇医药
tmax/h
Cmax/mmol.L-1
MRT/h
AUC0→∞/mmol.h.L-1
t1/2
F/%
Sustained-release
4.0
2.0
6.5
, http://www.100md.com
11.6
3.8
91.8
Reference tablets
2.0
2.6
3.5
12.6
2.7
4 结果与讨论
a.建立了HPLC法测定磷酸苯丙哌林的血药浓度.
b.体内分析结果表明，磷酸苯丙哌林缓释片的体内平均滞留时间较普通制剂的大，且2种制剂生物等效.
, 百拇医药
c.缓释制剂的Tmax较普通制剂长，表明缓释制剂的给药时间延长；Cmax较普通制剂低，表明缓释制剂毒副作用较小；缓释制剂消除半衰期较参比制剂长，在较长时间内维持较高血药浓度，缓释效果明显.
d.该方法为人体药动学研究提供了参考和依据.
参考文献
1 Yamatsu K,Ohsu K,Kese Y,et al.The site of antitussive action of 1-(2-benzylphenoxy)-2-piperidinopropane phosphate.Japanese Journal of Pharmacology.1967，17：538～549
2 叶丽卡，李国秀，吴秀英，等.人尿中苯丙哌林的比色法测定及其应用.沈阳药学院学报，1991，8：109～111
(下转至第262页)
收稿日期:1999-12-14
, http://www.100md.com
单位：付桂英 李三鸣(沈阳药科大学基础部，沈阳 110015)马春娟(沈阳第六制药厂，沈阳 110015)
关键词：磷酸苯丙哌林；缓释片；药代动力学；高效液相色谱法
沈阳药科大学学报000402 摘 要 建立了测定苯丙哌林血浆浓度的高效液相色谱法，并研究了该药的药动学行为.测定了3条家犬口服80 mg磷酸苯丙哌林2种制剂后的血药浓度.药动学参数如下：T12=3.8 h，tmax=4.0 h，AUC0→∞=11.6 mmol/L，MRT=6.5 h，F=91.8%.
分类号 R963
A Preliminany Study on the Pharmacokinetics of Benproperine Phosphate Sustained-Released Tablets
, http://www.100md.com
Fu Guiying,Li Sanming,Ma Chunjuan
(Department of Basic Courses,Shenyang Pharmaceutical University,Shenyang 110015)
Abstract：A new HPLC method was established to determine the concentrations of benproperine in plasma,following oral administration.Three dogs were selected and two formulations were given respectively.The results indicated that the pharmacokinetic parameters for the sustained-released tablets were：T1/2=3.8 h,tmax=4.0 h，AUC0→∞=11.6(mmol.h)/L，MRT=6.5 h，F=91.8%.
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Key words:benproperine phosphate;sustained-released tablets;pharmacokinetics;HPLC
磷酸苯丙哌林(benproperine phosphate)是一种非成瘾性镇咳药，能阻断自肺-胸膜的牵张感受器刺激而产生的迷走神经反射，镇咳作用较可待因强2～4倍，且毒性较小〔1〕，该药已作为基本的镇咳药物使用.就检测方法而言，制剂使用紫外分光光度计来进行检测，但体内检测方法报道很少.有人采用比色法测定尿中苯丙哌林的量〔2〕，但此法灵敏度低，不能用来测定血中苯丙哌林的量.本文建立了测定苯丙哌林血浆浓度的高效液相色谱法，并研究了该药的药动学行为.
1 仪器与试药
磷酸苯丙哌林对照品(山东平原制药厂)；磷酸苯丙哌林糖衣片(大连奥森制药厂，批号980603)；LC-10A高效液相色谱仪(日本岛津株式会社).
, 百拇医药
2 方法与结果
2.1 色谱条件
Hypersil ODS色谱柱(200 mm×4.6 mm,5 μm)；流动相为乙腈-磷酸盐缓冲液(0.3%磷酸加三乙胺调pH至3.0)=55∶45；流速为1.0 ml/min；检测波长UV-225 nm.
2.2 血浆样品的处理
取血浆0.5 mL，加入5 μL内标溶液(桂利嗪cinnarizine,0.06 mg/mL)，混匀，加入1 mol/L氢氧化钠溶液0.2 mL，再加入5 mL乙醚，涡流振荡5 min，3 000 r/min离心15 min，转移有机层置10 mL试管中，40℃水浴中氮气流下挥干溶剂，加流动相100 μL使残渣溶解，取20 μL注入液相色谱仪.
2.3 方法的确定
, 百拇医药
2.3.1 专属性
按上述色谱条件，磷酸苯丙哌林与内标及其它杂质分离良好，磷酸苯丙哌林和桂利嗪的保留时间分别为5.5 min，8.7 min，色谱图见图1.
2.3.2 标准曲线的制备
取空白血浆0.5 mL于10 mL具塞试管中，精密称取磷酸苯丙哌林配成的适当系列浓度溶液，使之成为相当于浓度为245，490，980，1 470，2 450 μmol/L的血浆样品.按“血浆样品的处理”项下操作法处理，取20 μL注入液相色谱仪.以样品浓度与样品和内标的峰面积比进行线性回归，标准曲线为A/Ai=0.025+1.65C×103，线性范围为245～2 450 μmol/L，最低定量浓度为245 μmol/L.
2.3.3 方法的精密度和回收率
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取空白血浆0.5 mL，按“血浆样品的处理”项目配制低、中、高3个浓度(分别为122.5，245，2 450 μmol/L)计算血浆中磷酸苯丙哌林的回收率，结果分为70.1%，73.3%，74.2%，RSD为4.08%～8.03%，日内及日间RSD分别小于6.7%和9.2%.
3 磷酸苯丙哌林药动学研究
3.1 给药方案与血样采集
试验对象 家犬3条，与试验前一天禁食12 h，给药4 h后进食.
给药方案 采用以自身为对照，分别口服磷酸苯丙哌林缓释片和咳快好糖衣片80 mg(以苯丙哌林计)，清水送下，两次给药间隔一周，给药后0.5，1，2，3，4，5，6，8，10，12 h由后腿静脉取血5 mL，并立即移入涂有肝素的试管中，离心，分离血浆，取0.5 mL血浆备用.
, 百拇医药
Fig.1 Representative chromatograms of benproperine
A—blank plasma;B—benproperine and cinnarizine added to plasma;C—a sample 4.0 h after oral administration of 100 mg benproperine.Peak 1 and 2 are benproperine and cinnarizine.
3.2 试验结果
梯型法所得平均血药浓度-时间曲线见图2，主要药动学参数见表1.
3.3 生物等效性评价
根据下式可得磷酸苯丙哌林缓释片的相对生物利用度为
, http://www.100md.com
F%=AUC0→∞(缓释片)/AUC0→∞(参比)=91.8%.
Fig.2 Profile of mean plasma concentration versus time after oral administration of two formulations in 3 dogs
A—sustained-release tablets;B—reference tablets
Tab.1 Pharmacokinetic parameters of two benproperine formulations after an oral dose of 100 mg benproperine in 3 dogs Parameters
, 百拇医药
tmax/h
Cmax/mmol.L-1
MRT/h
AUC0→∞/mmol.h.L-1
t1/2
F/%
Sustained-release
4.0
2.0
6.5
, http://www.100md.com
11.6
3.8
91.8
Reference tablets
2.0
2.6
3.5
12.6
2.7
4 结果与讨论
a.建立了HPLC法测定磷酸苯丙哌林的血药浓度.
b.体内分析结果表明，磷酸苯丙哌林缓释片的体内平均滞留时间较普通制剂的大，且2种制剂生物等效.
, 百拇医药
c.缓释制剂的Tmax较普通制剂长，表明缓释制剂的给药时间延长；Cmax较普通制剂低，表明缓释制剂毒副作用较小；缓释制剂消除半衰期较参比制剂长，在较长时间内维持较高血药浓度，缓释效果明显.
d.该方法为人体药动学研究提供了参考和依据.
参考文献
1 Yamatsu K,Ohsu K,Kese Y,et al.The site of antitussive action of 1-(2-benzylphenoxy)-2-piperidinopropane phosphate.Japanese Journal of Pharmacology.1967，17：538～549
2 叶丽卡，李国秀，吴秀英，等.人尿中苯丙哌林的比色法测定及其应用.沈阳药学院学报，1991，8：109～111
(下转至第262页)
收稿日期:1999-12-14
, http://www.100md.com