双氯酚酸钾胶囊剂正常人体生物等效性研究
作者：黄桂华 邓树海 王德风 林亚杰 刑淑芳
单位：黄桂华 邓树海 王德风 林亚杰(山东医科大学药学院，济南 250012)；刑淑芳(济南市历下区房管局医院，济南 250100)
关键词：双氯酚酸钾；反相高效液相色谱法；药物动力学；生物等效性
沈阳药科大学学报000404 摘 要 8名健康男性志愿者自身交叉单剂量口服双氯酚酸钾50 mg胶囊剂和片剂，采用反相高效液相色谱法测定经时过程血药浓度.其数据用3P87程序拟合，两制剂的血药浓度-时间曲线符合单室模型特征，求得双氯酚酸钾胶囊剂和片剂的药动学参数：ka分别为(1.583±0.219)和(1.417±0.171)h-1；t1/2分别为(2.348±0.548)和(2.248±0.558)h；Cmax分别为(1.353±0.245)和(1.237±0.290)μg/mL；Tmax分别为(1.061±0.174)和(1.205±0.203)h；AUC分别为(4.117±1.137)和(4.131±0.983)(μg.h)/mL.经统计学处理：两制剂的药动学参数无显著性差异(P>0.05)， 双氯酚酸钾胶囊剂相对于片剂的生物利用度F为(99.66±7.80)%.经方差分析，双单侧t检验分析，证明两制剂具有生物等效性.
, 百拇医药
分类号 R945
Pharmacokinetics and Bioequivalence of Diclofenac Potassium Capsules in Healthy Volunteers
Huang Guihua, Deng Shuhai, Wang Defeng, Lin Yajie, Xing Shufang
(Department of Pharmacology,Shandong Medical University,Ji′nan 250012)
Abstract Plasma diclofenac potassium concentration of 8 male healthy young volunteers after a self-alternative single oral dose (50 mg) of diclofenac potassium capsules and tablets were detected by the HPLC method.The pharmacokinetic parameters were calculated with 3P87 program by a computer.The plasma concentration-time curves fitted to a one-compartment open model with a first order absorpation.ka were(1.583±0.219)and(1.417±0.171)h-1;t1/2 were(2.348±0.548)and(2.248±0.558)h；Cmax were(1.353±0.245)and(1.237±0.290)μg.ml-1；Tmax were (1.061±0.174) and (1.205±0.203)h；AUC were(4.117±1.137)and(4.131±0.983)(μg.h)/mL.The statistical results showed the pharmacokinetic parameters of the two preparations had no significant differences(P>0.05). The relative bioavailabilities of diclofenac potassium capsules compared with tablets were 99.66±7.80%.The results of analysis of variance and tests of single and both sides showed that the two preparations were bioequivalent.
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Key words diclofenac potassium;high pressure liquid chromatography (HPLC);pharmacokinetics;bioequivaient
双氯酚酸钾(diclofenac potassium,DK)为苯乙酸类衍生物，属非甾体抗炎药，具有抗炎、镇痛、退热作用，对于该药治疗风湿性关节炎、骨关节炎和关节强硬形成脊椎炎的疗效已有文献进行评价〔1〕.双氯酚酸目前临床上使用多为钠盐，其药代动力学研究已有报道，本研究采用反相高效液相色谱法测定双氯酚酸钾的血药浓度，通过对双氯酚酸钾胶囊剂与片剂正常人体内药物动力学及生物利用度研究，客观评价该制剂与标准参比制剂的生物等效性，为临床安全、有效用药提供科学依据.
1 材料与试药
双氯酚酸钾片剂(北京汽巴-嘉基制药有限公司，批号：505)；双氯酚酸钾胶囊剂(山东省医药工业研究所，批号：981113)；双氯酚酸钾标准品(山东省医药工业研究所提供).
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Waters Delta prep3000高效液相色谱仪(美国)；745Waters数据处理机( 日本岛津)；481紫外检测器(美国)；Kromasil-C18,粒度5 μm,250 mm×4.5 mm色谱柱(天津)；Fza-2型分析振荡器(江苏泰兴医疗器械厂)；LXJ-Ⅱ型离心机(上海分析仪器厂).
2 实验方法
2.1 实验设计〔2〕
8名男性健康志愿者，体重符合中国人的正常体重标准，年龄20～30岁，经医院体检心、肝、肾功能正常，精神状态正常，试验期间禁烟酒，进食统一低脂标准餐.实验开始前2周及实验期间不得使用任何药物；随机分为2组，每组4名，禁食12 h后，于早晨空腹一组每人口服50 mg双氯酚酸钾胶囊剂；另一组每人口服50 mg片剂，200 mL温开水送服，试验进行2 h后进食统一低脂标准餐.药前取空白血，药后分别于0.25，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0，4.0，6.0，8.0，10.0 h取肘静脉血2.5 mL置肝素抗凝试管中，离心(3 000 r/min)10 min分离血浆.-20℃冰箱保存待测.1周后2组受试者交叉服药，同法取静脉血.
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2.2 血样处理及高效液相色谱法测定
精取血浆0.5 mL置试管中，加1.0 mol/mL的KH2PO4溶液100 μL，混匀后，加乙酸乙酯4.0 mL，涡悬振荡3 min，离心(3 000 r/min)5 min，精取上清液3.0 mL置5 mL离心管中，40℃氮气吹干，残渣用100 μL流动相溶解后进样测定.
采用反相高效液相色谱法测定双氯酚酸钾血药浓度.色谱柱：Kromasil-C18，粒度：5 μm，250 mm×4.5 mmΦ,流动相为80∶20(乙腈∶水)，柱压为 112 kg/m2,流速为0.4 ml/min，检测波长为280 nm，灵敏度为0.005，进样量为10 μL.用上述色谱条件测定，结果见图1.
2.3 双氯酚酸钾血浆标准曲线的绘制
, 百拇医药
Fig.1 Diclofenac potassium high pressure liquid chromatography
A—blank plasma； B—plasma of diclofenac potassium
分别在0.5 mL空白血浆中加双氯酚酸钾标准液，配成0.05，0.1，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5 μg/mL标准血浆溶液，按“2.2”项方法进行血样处理，测定峰面积， 以峰面积为纵坐标，双氯酚酸钾血浆药物浓度为横坐标，作标准曲线，得回归方程为：
A＝2.50 C+0.06，r＝0.998 6.
2.4 回收率测定
按血浆样本标准曲线测定方法配制低、中、高3种不同浓度的双氯酚酸钾血浆标准溶液，提取后进样5次，与直接溶解进样测定浓度比为该法回收率，结果见表1.
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Tab.1 The rate of recovery(n=5) Add
concentration
(μg.mL-1)
Recovery
concentration
(μg.mL-1)
Recovery
rate
(%)
, 百拇医药 Average
recovery rate
(%)
0.1
0.095±
0.056
95.0
1.5
1.41±
0.530
93.2
94.60±1.25
2.5
, 百拇医药
2.39±
0.066
95.6
2.5 精密度试验
日内精密度：配制低、中、高3个不同浓度的双氯酚酸钾血浆样本，按血样预处理操作，于1 d内测定5次，计算日内精密度，结果见表2.
日间精密度：配制低、中、高3个不同浓度的双氯酚酸钾血浆样本，按血样预处理操作，每天测定1次(n=5)，计算日间精密度，结果见表2.Tab.2 The precision tests(n=5) Within day
Day-to-day
Add
concentration
, 百拇医药
(μg.mL-1)
Recovery
concentration
(μg.mL-1)
RSD
(%)
Recovery
concentration
(μg.mL-1)
, 百拇医药
RSD
(%)
0.1
0.087±0.003
3.0
0.095±
0.056
9.2
1.5
1.410±0.530
3.8
1.40±
0.13
, 百拇医药
5.1
2.5
2.360±4.300
4.3
2.39±
0.066
2.8
3 实验结果
a.8名受试者交叉口服单剂量50 mg双氯酚酸钾胶囊剂与片剂，血药浓度测定数据分别见表3、表4.
Tab.3 The plasma drug concentration of taking 50 mg of diclofenac potassium capsules orally(μg.mL-1) Volunteers
, 百拇医药
No
Periods after oral dose(min)
0.25
0.5
1.0
0.5
2.0
2.5
3.0
4.0
6.0
8.0
10.0
, http://www.100md.com
1
0.54
0.84
2.03
1.30
0.85
0.74
0.48
0.34
0.16
0.080
0.040
2
, http://www.100md.com
0.49
1.27
1.69
1.94
1.60
1.03
0.80
0.62
0.31
0.151
0.069
3
0.25
, http://www.100md.com
0.64
1.61
1.20
0.90
0.58
0.42
0.28
0.14
0.069
0.036
4
0.15
0.54
, 百拇医药
1.72
1.18
0.68
0.46
0.34
0.23
0.11
0.052
0.025
5
0.26
0.65
1.68
, 百拇医药
1.08
0.92
0.75
0.60
0.27
0.14
0.073
0.035
6
0.58
1.13
1.77
1.28
, 百拇医药
0.98
0.58
0.36
0.25
0.13
0.062
0.030
7
0.26
0.65
1.88
1.08
0.84
, http://www.100md.com
0.52
0.38
0.27
0.13
0.062
0.031
8
0.15
0.54
1.16
1.92
1.58
1.12
, http://www.100md.com
0.71
0.52
0.26
0.102
0.042
Mean
0.335
0.783
1.693
1.373
1.044
0.723
0.511
, http://www.100md.com
0.348
0.173
0.081
0.039
±sd
0.174
0.276
0.253
0.353
0.348
0.240
0.173
0.143
, 百拇医药
0.072
0.032
0.013
Tab.4 The plasma drug concentration of taking 50 mg of diclofenac potassium tablets orally(μg.mL-1) Volunteers
No
Times after oral dose(min)
0.25
0.5
1.0
, http://www.100md.com
0.5
2.0
2.5
3.0
4.0
6.0
8.0
10.0
1
0.26
0.65
1.08
1.62
, http://www.100md.com
0.98
0.66
0.46
0.37
0.156
0.083
0.041
2
0.44
0.85
1.90
2.46
1.88
, http://www.100md.com
1.11
0.63
0.51
0.231
0.124
0.059
3
0.18
0.41
0.87
1.52
1.00
0.64
, http://www.100md.com
0.41
0.30
0.142
0.073
0.037
4
0.11
0.35
0.68
1.47
1.04
0.66
0.40
, http://www.100md.com
0.26
0.120
0.065
0.028
5
0.54
0.84
2.03
1.30
0.85
0.74
0.48
0.34
, 百拇医药
0.160
0.080
0.040
6
0.27
0.66
1.09
1.63
0.99
0.67
0.47
0.38
0.166
, 百拇医药
0.088
0.043
7
0.19
0.42
0.88
1.53
1.01
0.65
0.42
0.31
0.152
0.078
, http://www.100md.com
0.039
8
0.096
0.33
0.92
1.26
1.69
1.03
0.80
0.62
0.312
0.156
0.069
, 百拇医药
Mean
0.261
0.564
1.181
1.599
1.180
0.770
0.509
0.386
0.180
0.093
0.045
±sd
, 百拇医药
0.156
0.214
0.502
0.373
0.381
0.189
0.138
0.120
0.062
0.031
0.013
b.8名健康志愿者单剂量口服50 mg双氯酚酸钾胶囊剂(A)与片剂(B)后所得药-时数据，经3P87程序处理，符合单室模型，主要药物动力学参数见表5.
, http://www.100md.com
经t检验两制剂以上药物动力学参数比较无显著性差异(P>0.05).
c.双氯酚酸钾胶囊剂与片剂的AUC值及相对生物利用度(F),见表6.Tab.5 The pharmacokinetic parameters Volunteers
No
ka/h-1
t1/2/h
Tmax/h
Cmax/μg.mL-1
A
, 百拇医药
B
A
B
A
B
A
B
1
1.690
1.459
2.559
2.221
0.960
, 百拇医药 1.140
1.379
1.113
2
1.454
1.364
2.384
2.780
1.085
1.150
1.829
1.853
3
, http://www.100md.com
1.618
1.329
2.197
2.089
1.055
1.225
1.330
1.151
4
1.664
1.118
1.996
1.333
, 百拇医药
0.990
1.370
1.071
0.851
5
1.564
1.690
2.057
2.559
1.105
0.960
1.188
1.379
, 百拇医药
6
1.880
1.468
3.007
2.195
0.860
1.140
1.527
1.119
7
1.660
1.560
3.125
, 百拇医药
3.069
0.985
1.045
1.202
1.188
8
1.130
1.344
1.460
1.606
1.445
1.610
1.353
, http://www.100md.com
1.245
Mean
1.583
1.471
2.384
2.248
1.061
1.205
1.353
1.237
±sd
0.219
0.171
, 百拇医药
0.584
0.558
0.174
0.203
1.330
0.290
注：A—capsule；B—tabletTab.6 The AUC and the relative bioavailabilities Volunteers
No
Capsules
AUC/(ng.h).mL-1
, 百拇医药
Tablets
AUC/(ng.h).mL-1
F/%
1
4.090
3.683
111.05
2
6.353
5.973
106.36
, 百拇医药
3
4.034
3.971
101.59
4
2.505
2.900
88.27
5
3.663
4.089
89.58
6
, 百拇医药
3.829
3.762
101.78
7
3.385
3.485
97.13
8
5.017
5.177
96.91
Mean
4.117
, 百拇医药
4.131
99.66
±sd
1.137
0.983
7.80
d.两制剂的AUC值经方差分析的结果见表7.由表中数据可知，两制剂周期间、制剂间均无显著性差异(P>0.05),个体间有显著性差异(P<0.05)，表明两制剂具有生物等效性. 双单侧t检验：
统计量：
其中：
γ1=0.8，γ2=1.25，s=0.193，n=8.
, 百拇医药
结果：T1=4.21，T2=5.04.
查双侧分位表得：t(1-0.05)(6)=2.447.
故T1>2.447，T2>2.447同时成立，证明两制剂生物等效.
Tab.7 The analysis of variance Source
ν
Sum of squares
Mean squares
F value
α=0.05
, http://www.100md.com
Inter-subjects
7
0.854 9
0.122 1
19.69
P< 0.05
Periods
1
0.004 5
0.004 5
0.72
P>0.05
, http://www.100md.com
Formulations
1
0.003 4
0.003 4
0.55
P>0.05
Residuals
6
0.037 2
0.006 2
Total
15
, http://www.100md.com 4 讨论 a.本实验采用高效液相色谱法双氯酚酸钾经乙酸乙酯提取，流动相(乙腈∶水＝80∶20)溶解，Kromasil-C18色谱柱分离，紫外检测器检测.方法简便、灵敏；日内、日间误差分别小于4.30%和9.20%，平均回收率为(94.60±1.25)%，血浆药物浓度在0.05～2.50 μg/mL范围内呈线性关系,最低检测浓度为21 ng/mL(血浆体积为0.5 mL，浓缩5倍进样，S/N≥3).符合人体相对生物利用度要求.
b.用AIC (房室判别指标)和Re(残差平方和)作为识别模型指标，结果表明，双氯酚酸钾胶囊剂和片剂口服给药后血药浓度-时间数据符合单室模型特征〔3〕.
c.血药浓度-时间数据采用3P87程序，经486型计算机处理得药物动力学参数(见表5和图2)，表明口服双氯酚散酸钾胶囊剂和片剂后，ka分别为(1.583±0.291)和(1.417±0.171)h-1；t1/2分别为(2.348±0.548)和(2.248±0.558)h；Cmax分别为(1.353±0.245)和(1.237±0.290)μg/mL；Tmax分别为(1.061±0.174)和(1.205±0.203)h，经统计学处理均无显著性差异(P>0.05).
, 百拇医药
d.采用梯形法计算AUC值，求得双氯酚酸钾胶囊剂相对于片剂的生物利用度为：(99.66±7.80)%，方差分析结果表明：周期间、制剂间均无显著性差异(P>0.05)，个体间有显著性差异(P<0.05)；双单侧t检验结果T1>2.447，T2>2.447同时成立，充分证明两制剂具有生物等效性〔4〕.
Fig.2 The average plasma drug concentration of single dose oral diclofenac potassium capsules(A) and tablets(B)
参考文献
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4，张学中,成村茂.借助实例介绍生物等效性试验计与分析.中国临床药理学杂志，1999，15(3)：216～217
收稿日期:1999-11-10
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单位：黄桂华 邓树海 王德风 林亚杰(山东医科大学药学院，济南 250012)；刑淑芳(济南市历下区房管局医院，济南 250100)
关键词：双氯酚酸钾；反相高效液相色谱法；药物动力学；生物等效性
沈阳药科大学学报000404 摘 要 8名健康男性志愿者自身交叉单剂量口服双氯酚酸钾50 mg胶囊剂和片剂，采用反相高效液相色谱法测定经时过程血药浓度.其数据用3P87程序拟合，两制剂的血药浓度-时间曲线符合单室模型特征，求得双氯酚酸钾胶囊剂和片剂的药动学参数：ka分别为(1.583±0.219)和(1.417±0.171)h-1；t1/2分别为(2.348±0.548)和(2.248±0.558)h；Cmax分别为(1.353±0.245)和(1.237±0.290)μg/mL；Tmax分别为(1.061±0.174)和(1.205±0.203)h；AUC分别为(4.117±1.137)和(4.131±0.983)(μg.h)/mL.经统计学处理：两制剂的药动学参数无显著性差异(P>0.05)， 双氯酚酸钾胶囊剂相对于片剂的生物利用度F为(99.66±7.80)%.经方差分析，双单侧t检验分析，证明两制剂具有生物等效性.
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分类号 R945
Pharmacokinetics and Bioequivalence of Diclofenac Potassium Capsules in Healthy Volunteers
Huang Guihua, Deng Shuhai, Wang Defeng, Lin Yajie, Xing Shufang
(Department of Pharmacology,Shandong Medical University,Ji′nan 250012)
Abstract Plasma diclofenac potassium concentration of 8 male healthy young volunteers after a self-alternative single oral dose (50 mg) of diclofenac potassium capsules and tablets were detected by the HPLC method.The pharmacokinetic parameters were calculated with 3P87 program by a computer.The plasma concentration-time curves fitted to a one-compartment open model with a first order absorpation.ka were(1.583±0.219)and(1.417±0.171)h-1;t1/2 were(2.348±0.548)and(2.248±0.558)h；Cmax were(1.353±0.245)and(1.237±0.290)μg.ml-1；Tmax were (1.061±0.174) and (1.205±0.203)h；AUC were(4.117±1.137)and(4.131±0.983)(μg.h)/mL.The statistical results showed the pharmacokinetic parameters of the two preparations had no significant differences(P>0.05). The relative bioavailabilities of diclofenac potassium capsules compared with tablets were 99.66±7.80%.The results of analysis of variance and tests of single and both sides showed that the two preparations were bioequivalent.
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Key words diclofenac potassium;high pressure liquid chromatography (HPLC);pharmacokinetics;bioequivaient
双氯酚酸钾(diclofenac potassium,DK)为苯乙酸类衍生物，属非甾体抗炎药，具有抗炎、镇痛、退热作用，对于该药治疗风湿性关节炎、骨关节炎和关节强硬形成脊椎炎的疗效已有文献进行评价〔1〕.双氯酚酸目前临床上使用多为钠盐，其药代动力学研究已有报道，本研究采用反相高效液相色谱法测定双氯酚酸钾的血药浓度，通过对双氯酚酸钾胶囊剂与片剂正常人体内药物动力学及生物利用度研究，客观评价该制剂与标准参比制剂的生物等效性，为临床安全、有效用药提供科学依据.
1 材料与试药
双氯酚酸钾片剂(北京汽巴-嘉基制药有限公司，批号：505)；双氯酚酸钾胶囊剂(山东省医药工业研究所，批号：981113)；双氯酚酸钾标准品(山东省医药工业研究所提供).
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Waters Delta prep3000高效液相色谱仪(美国)；745Waters数据处理机( 日本岛津)；481紫外检测器(美国)；Kromasil-C18,粒度5 μm,250 mm×4.5 mm色谱柱(天津)；Fza-2型分析振荡器(江苏泰兴医疗器械厂)；LXJ-Ⅱ型离心机(上海分析仪器厂).
2 实验方法
2.1 实验设计〔2〕
8名男性健康志愿者，体重符合中国人的正常体重标准，年龄20～30岁，经医院体检心、肝、肾功能正常，精神状态正常，试验期间禁烟酒，进食统一低脂标准餐.实验开始前2周及实验期间不得使用任何药物；随机分为2组，每组4名，禁食12 h后，于早晨空腹一组每人口服50 mg双氯酚酸钾胶囊剂；另一组每人口服50 mg片剂，200 mL温开水送服，试验进行2 h后进食统一低脂标准餐.药前取空白血，药后分别于0.25，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5，3.0，4.0，6.0，8.0，10.0 h取肘静脉血2.5 mL置肝素抗凝试管中，离心(3 000 r/min)10 min分离血浆.-20℃冰箱保存待测.1周后2组受试者交叉服药，同法取静脉血.
, 百拇医药
2.2 血样处理及高效液相色谱法测定
精取血浆0.5 mL置试管中，加1.0 mol/mL的KH2PO4溶液100 μL，混匀后，加乙酸乙酯4.0 mL，涡悬振荡3 min，离心(3 000 r/min)5 min，精取上清液3.0 mL置5 mL离心管中，40℃氮气吹干，残渣用100 μL流动相溶解后进样测定.
采用反相高效液相色谱法测定双氯酚酸钾血药浓度.色谱柱：Kromasil-C18，粒度：5 μm，250 mm×4.5 mmΦ,流动相为80∶20(乙腈∶水)，柱压为 112 kg/m2,流速为0.4 ml/min，检测波长为280 nm，灵敏度为0.005，进样量为10 μL.用上述色谱条件测定，结果见图1.
2.3 双氯酚酸钾血浆标准曲线的绘制
, 百拇医药
Fig.1 Diclofenac potassium high pressure liquid chromatography
A—blank plasma； B—plasma of diclofenac potassium
分别在0.5 mL空白血浆中加双氯酚酸钾标准液，配成0.05，0.1，0.5，1.0，1.5，2.0，2.5 μg/mL标准血浆溶液，按“2.2”项方法进行血样处理，测定峰面积， 以峰面积为纵坐标，双氯酚酸钾血浆药物浓度为横坐标，作标准曲线，得回归方程为：
A＝2.50 C+0.06，r＝0.998 6.
2.4 回收率测定
按血浆样本标准曲线测定方法配制低、中、高3种不同浓度的双氯酚酸钾血浆标准溶液，提取后进样5次，与直接溶解进样测定浓度比为该法回收率，结果见表1.
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Tab.1 The rate of recovery(n=5) Add
concentration
(μg.mL-1)
Recovery
concentration
(μg.mL-1)
Recovery
rate
(%)
, 百拇医药 Average
recovery rate
(%)
0.1
0.095±
0.056
95.0
1.5
1.41±
0.530
93.2
94.60±1.25
2.5
, 百拇医药
2.39±
0.066
95.6
2.5 精密度试验
日内精密度：配制低、中、高3个不同浓度的双氯酚酸钾血浆样本，按血样预处理操作，于1 d内测定5次，计算日内精密度，结果见表2.
日间精密度：配制低、中、高3个不同浓度的双氯酚酸钾血浆样本，按血样预处理操作，每天测定1次(n=5)，计算日间精密度，结果见表2.Tab.2 The precision tests(n=5) Within day
Day-to-day
Add
concentration
, 百拇医药
(μg.mL-1)
Recovery
concentration
(μg.mL-1)
RSD
(%)
Recovery
concentration
(μg.mL-1)
, 百拇医药
RSD
(%)
0.1
0.087±0.003
3.0
0.095±
0.056
9.2
1.5
1.410±0.530
3.8
1.40±
0.13
, 百拇医药
5.1
2.5
2.360±4.300
4.3
2.39±
0.066
2.8
3 实验结果
a.8名受试者交叉口服单剂量50 mg双氯酚酸钾胶囊剂与片剂，血药浓度测定数据分别见表3、表4.
Tab.3 The plasma drug concentration of taking 50 mg of diclofenac potassium capsules orally(μg.mL-1) Volunteers
, 百拇医药
No
Periods after oral dose(min)
0.25
0.5
1.0
0.5
2.0
2.5
3.0
4.0
6.0
8.0
10.0
, http://www.100md.com
1
0.54
0.84
2.03
1.30
0.85
0.74
0.48
0.34
0.16
0.080
0.040
2
, http://www.100md.com
0.49
1.27
1.69
1.94
1.60
1.03
0.80
0.62
0.31
0.151
0.069
3
0.25
, http://www.100md.com
0.64
1.61
1.20
0.90
0.58
0.42
0.28
0.14
0.069
0.036
4
0.15
0.54
, 百拇医药
1.72
1.18
0.68
0.46
0.34
0.23
0.11
0.052
0.025
5
0.26
0.65
1.68
, 百拇医药
1.08
0.92
0.75
0.60
0.27
0.14
0.073
0.035
6
0.58
1.13
1.77
1.28
, 百拇医药
0.98
0.58
0.36
0.25
0.13
0.062
0.030
7
0.26
0.65
1.88
1.08
0.84
, http://www.100md.com
0.52
0.38
0.27
0.13
0.062
0.031
8
0.15
0.54
1.16
1.92
1.58
1.12
, http://www.100md.com
0.71
0.52
0.26
0.102
0.042
Mean
0.335
0.783
1.693
1.373
1.044
0.723
0.511
, http://www.100md.com
0.348
0.173
0.081
0.039
±sd
0.174
0.276
0.253
0.353
0.348
0.240
0.173
0.143
, 百拇医药
0.072
0.032
0.013
Tab.4 The plasma drug concentration of taking 50 mg of diclofenac potassium tablets orally(μg.mL-1) Volunteers
No
Times after oral dose(min)
0.25
0.5
1.0
, http://www.100md.com
0.5
2.0
2.5
3.0
4.0
6.0
8.0
10.0
1
0.26
0.65
1.08
1.62
, http://www.100md.com
0.98
0.66
0.46
0.37
0.156
0.083
0.041
2
0.44
0.85
1.90
2.46
1.88
, http://www.100md.com
1.11
0.63
0.51
0.231
0.124
0.059
3
0.18
0.41
0.87
1.52
1.00
0.64
, http://www.100md.com
0.41
0.30
0.142
0.073
0.037
4
0.11
0.35
0.68
1.47
1.04
0.66
0.40
, http://www.100md.com
0.26
0.120
0.065
0.028
5
0.54
0.84
2.03
1.30
0.85
0.74
0.48
0.34
, 百拇医药
0.160
0.080
0.040
6
0.27
0.66
1.09
1.63
0.99
0.67
0.47
0.38
0.166
, 百拇医药
0.088
0.043
7
0.19
0.42
0.88
1.53
1.01
0.65
0.42
0.31
0.152
0.078
, http://www.100md.com
0.039
8
0.096
0.33
0.92
1.26
1.69
1.03
0.80
0.62
0.312
0.156
0.069
, 百拇医药
Mean
0.261
0.564
1.181
1.599
1.180
0.770
0.509
0.386
0.180
0.093
0.045
±sd
, 百拇医药
0.156
0.214
0.502
0.373
0.381
0.189
0.138
0.120
0.062
0.031
0.013
b.8名健康志愿者单剂量口服50 mg双氯酚酸钾胶囊剂(A)与片剂(B)后所得药-时数据，经3P87程序处理，符合单室模型，主要药物动力学参数见表5.
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经t检验两制剂以上药物动力学参数比较无显著性差异(P>0.05).
c.双氯酚酸钾胶囊剂与片剂的AUC值及相对生物利用度(F),见表6.Tab.5 The pharmacokinetic parameters Volunteers
No
ka/h-1
t1/2/h
Tmax/h
Cmax/μg.mL-1
A
, 百拇医药
B
A
B
A
B
A
B
1
1.690
1.459
2.559
2.221
0.960
, 百拇医药 1.140
1.379
1.113
2
1.454
1.364
2.384
2.780
1.085
1.150
1.829
1.853
3
, http://www.100md.com
1.618
1.329
2.197
2.089
1.055
1.225
1.330
1.151
4
1.664
1.118
1.996
1.333
, 百拇医药
0.990
1.370
1.071
0.851
5
1.564
1.690
2.057
2.559
1.105
0.960
1.188
1.379
, 百拇医药
6
1.880
1.468
3.007
2.195
0.860
1.140
1.527
1.119
7
1.660
1.560
3.125
, 百拇医药
3.069
0.985
1.045
1.202
1.188
8
1.130
1.344
1.460
1.606
1.445
1.610
1.353
, http://www.100md.com
1.245
Mean
1.583
1.471
2.384
2.248
1.061
1.205
1.353
1.237
±sd
0.219
0.171
, 百拇医药
0.584
0.558
0.174
0.203
1.330
0.290
注：A—capsule；B—tabletTab.6 The AUC and the relative bioavailabilities Volunteers
No
Capsules
AUC/(ng.h).mL-1
, 百拇医药
Tablets
AUC/(ng.h).mL-1
F/%
1
4.090
3.683
111.05
2
6.353
5.973
106.36
, 百拇医药
3
4.034
3.971
101.59
4
2.505
2.900
88.27
5
3.663
4.089
89.58
6
, 百拇医药
3.829
3.762
101.78
7
3.385
3.485
97.13
8
5.017
5.177
96.91
Mean
4.117
, 百拇医药
4.131
99.66
±sd
1.137
0.983
7.80
d.两制剂的AUC值经方差分析的结果见表7.由表中数据可知，两制剂周期间、制剂间均无显著性差异(P>0.05),个体间有显著性差异(P<0.05)，表明两制剂具有生物等效性. 双单侧t检验：
统计量：
其中：
γ1=0.8，γ2=1.25，s=0.193，n=8., 百拇医药
结果：T1=4.21，T2=5.04.
查双侧分位表得：t(1-0.05)(6)=2.447.
故T1>2.447，T2>2.447同时成立，证明两制剂生物等效.
Tab.7 The analysis of variance Source
ν
Sum of squares
Mean squares
F value
α=0.05
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Inter-subjects
7
0.854 9
0.122 1
19.69
P< 0.05
Periods
1
0.004 5
0.004 5
0.72
P>0.05
, http://www.100md.com
Formulations
1
0.003 4
0.003 4
0.55
P>0.05
Residuals
6
0.037 2
0.006 2
Total
15
, http://www.100md.com 4 讨论 a.本实验采用高效液相色谱法双氯酚酸钾经乙酸乙酯提取，流动相(乙腈∶水＝80∶20)溶解，Kromasil-C18色谱柱分离，紫外检测器检测.方法简便、灵敏；日内、日间误差分别小于4.30%和9.20%，平均回收率为(94.60±1.25)%，血浆药物浓度在0.05～2.50 μg/mL范围内呈线性关系,最低检测浓度为21 ng/mL(血浆体积为0.5 mL，浓缩5倍进样，S/N≥3).符合人体相对生物利用度要求.
b.用AIC (房室判别指标)和Re(残差平方和)作为识别模型指标，结果表明，双氯酚酸钾胶囊剂和片剂口服给药后血药浓度-时间数据符合单室模型特征〔3〕.
c.血药浓度-时间数据采用3P87程序，经486型计算机处理得药物动力学参数(见表5和图2)，表明口服双氯酚散酸钾胶囊剂和片剂后，ka分别为(1.583±0.291)和(1.417±0.171)h-1；t1/2分别为(2.348±0.548)和(2.248±0.558)h；Cmax分别为(1.353±0.245)和(1.237±0.290)μg/mL；Tmax分别为(1.061±0.174)和(1.205±0.203)h，经统计学处理均无显著性差异(P>0.05).
, 百拇医药
d.采用梯形法计算AUC值，求得双氯酚酸钾胶囊剂相对于片剂的生物利用度为：(99.66±7.80)%，方差分析结果表明：周期间、制剂间均无显著性差异(P>0.05)，个体间有显著性差异(P<0.05)；双单侧t检验结果T1>2.447，T2>2.447同时成立，充分证明两制剂具有生物等效性〔4〕.
Fig.2 The average plasma drug concentration of single dose oral diclofenac potassium capsules(A) and tablets(B)
参考文献
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收稿日期:1999-11-10
, 百拇医药