硫普罗宁活化慢性乙型肝炎超氧化物歧化酶的初步研究
作者：陈长寅 覃宗坦 邱绍勤 王淑平 郭超荣 陈行军 张宝玲 罗声香
单位：湖北省宜昌市第三人民医院 宜昌 443003
关键词：肝炎；慢性活动性；超氧化物歧化酶；巯基丙酰甘氨酶；治疗
中华实验和临床病毒学杂志000414 【摘要】 目的 观察硫普罗宁对慢性乙型肝炎氧自由基的清除作用。方法 用黄嘌呤氧化酶法对80例慢性乙型肝炎体内的超氧化物歧化酶(SOD)进行检测，并检测了丙氨酸转氨酶(ALT)、血清总胆红素(TBiL)、血清总蛋白(TP)、A/G比值。40例接受常规护肝，退黄治疗为对照组；40例除接受护肝、退黄治疗外，口服硫普罗宁为治疗组。结果 16例正常人SOD活性检测正常值为165.9±23.36 NU/ml。40例治疗组与40例对照组治疗前年龄、性别无差异，SOD、ALT、TBil、TP、ALB亦无差异，SOD分别为106.57±40.68与105.18±44.59。两组治疗后，SOD、ALT、TBil、ALB的测定值差异有显著性(P<0.01)，SOD分别为187.93±35.24与157.96±47.29；ALT分别为38.41±22.22与68.52±34.19；TBil分别为23.15±12.46与30.38±21.80；ALB分别为43.28±4.21与40.36±5.19。结论 硫普罗宁对治疗慢性乙型肝炎、清除氧自由基有较好疗效，且有改善肝功能的作用。
, 百拇医药
A preliminary study on the activation of superoxide dismutase by Tiopronin in patients with chronic hepatitis B
CHEN Changyin,TAN Zongtan,QIU Shaoqin
(The 3rd People′s Hospital of Yichang City, Hubei,Yichang 443003, China)
【Abstract】 Objective To observe the clearance effect of Tiopronin on oxygen free radicals in chronic hepatitis B patients.Methods The ranthine oxidase assay was used to detect superoxide dismutase (SOD) in 80 chronic hepatitis B patients, the ALT,TBil,TP and A/G ratio of the patients were also tested. The 80 chronic hepatitis B patients were divided into two groups, the control group was treated with routine liver protective and jaundice regressing drugs while the treated group was additionally administered with Tiopromin bsrsides the routine treatment. Results In two groups of patients with similar ages and sexes,there showed no differences in levels of SOD, ALT,TBil,TP and ALB before treatment,as the SOD in lreated group and control group wrre 106.57±40.68 NU/ml and 105.18±44.59 NU/ml respectively, while the normal value for SOD in 16 normal persons was 165.9±23.36 NU/ml. After treatment,there were significant differences (P<0.01) in SOD,ALT,TBil and ALB levels which showed SOD 187.93±35.24 NU/ml, ALT38.41±22.22U/L,TBil 23.15±12.46 μmol/L, ALB 43.28±4.21 g/L in the treated group and SOD 157.96±47.29 NU/ml, ALT 68.52±34.19 U/L,TBil 30.38±21.80 μmol/L and ALB 40.36±5.19 g/L in the control group.Conclusion There showed a good therapeutic effect of Tiopronin on the clearance of oxygen free radicals in chronic hepatitis B patients and also it can improve the liver function.
, http://www.100md.com
【Key words】 Hepatitis,chronic active; Superoxide dismutase; Mercaptorropionylglgine/therapy
近年来，氧自由基在疾病发生、发展过程中的作用日益受到重视。对病毒性肝炎患者血液中氧自由基及检测超氧化物歧化酶(SOD)的报道较多〔1，2〕，但结果不一致。硫普罗宁在治疗病毒性肝炎过程中主要有促进肝细胞再生的作用，其中是否有清除病毒性肝炎氧自由基的作用，有关报道较少，我们对此进行了临床研究。
1 材料和方法
1.1 一般资料 病例为宜昌市第三人民医院1998年1月至1998年12月住院的80例慢性乙型肝炎患者，将其随机分为两组，其中治疗组40例：轻度9例，中度9例，重度22例；HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗-HBc(+)17例；HBsAg(+)、抗-HBe(+)、抗-HBc(+)13例；HBsAg(+)、抗-HBc(+)7例；HBsAg(+)3例；HBV DNA(+)23例；男35例，女5例；年龄20至57岁，平均36±9.0岁。对照组40例：轻度8例，中度10例，重度22例；HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗-HBc(+)15例；HBsAg(+)、抗-HBe(+)、抗-HBc(+)14例；HBsAg(+)、抗-HBc(+)9例；HBsAg(+)2例；HBV DNA(+)21例；男34例，女6例；年龄19至54岁，平均37±10岁。两组年龄、性别差异无显著性。诊断标准参照1995年第五届全国传染病与寄生虫病学术会议修订的诊断标准诊断。
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1.2 治疗方法 对照组给予常规护肝、退黄治疗(如门冬氨酸钾镁、能量合剂、肝太乐等)；治疗组在对照组的基础上每日予硫普罗宁片0.6口服，15 d为一疗程。治疗组仅见2例轻度皮疹，经对症治疗好转，无其他不良反应。两组均不使用丹参、维生素E、C等抗氧化剂。硫普罗宁商品名为凯西莱，由河南新谊医药集团研制生产。
1.3 检测项目及方法 两组分别于入院时、住院第15 d，取抗凝血2 ml分装保存于冰箱中，集中检测SOD活性；同时检测丙氨酸转氨酶(ALT)、血清总胆红素(TBil)、血清总蛋白(TP)、血清白蛋白(ALB)。SOD活性检测用黄嘌呤氧化酶法，操作步骤及原理按说明书要求进行，试剂购自南京聚力生物工程公司。ALT、TBil、TP、ALB检测用半自动生化分析仪检测，以上检测均由同一检验师操作。
2 结果
16例正常人SOD活性检测，正常值为165.69±23.36 NU/ml，与慢性乙型肝炎治疗前的差异有显著性(P<0.05)。治疗后对照组无差异(P>0.05)，治疗组有差异(P<0.05)。见表1。
, 百拇医药
表1 80例慢性乙型肝炎治疗前后SOD的检测结果
Tab.1 SOD test in 80 chronic hepatitis B
patients before and after treatment 组别
Group
检测数
Tested no.
SOD(NU/ml)
治疗前
Before treatment
治疗后
, http://www.100md.com
After treatment
治疗组
Treated
40
106.57±40.68#
187.93±35.24*
对照组
Control
40
105.18±44.59
157.96±47.29
, 百拇医药
#:P>0.05，治疗前两组间的比较;*:P<0.01，治疗后两组间的比较
#:Comparison of the two groups before treatment,P>0.05.*:Comparison of the two groups after treatmest,P<0.01
慢性乙型肝炎治疗前后ALT、TBil、TP、ALB变化情况见表2、3。两组治疗后乙肝二对半、HBV DNA均无改变。
表2 80例慢性乙型肝炎治疗前后ALT、TBil的检测结果
Tab.2 Test of ALT and TBil in 80 chronic hepatitis B patients before and after treatment 组别
, 百拇医药 Group
检测数
Tested no.
ALT(U/L)
TBil(μmol/L)
治疗前
Before treatment
治疗后
After treatment
治疗前
Before treatment
治疗后
, 百拇医药
After treatment
治疗组
Treated
40
266.95±220.59#
38.41±22.22*
63.37±45.73#
23.15±12.46*
对照组
Control
40
, http://www.100md.com
234.43±201.40
68.52±34.19
66.37±45.09
30.38±21.80
#：P>0.05，治疗前两组间的比较； *：P<0.01，治疗后两组间的比较
#：The same as that in Table 1.*:The same as that in Table 1表3 80例慢性乙型肝炎治疗前后TP、ALB检测结果
Tab.3 Test of TP and ALB in 80 chronic hepatitis B patients before and after treatment 组别
, http://www.100md.com
Group
检测数
Tested no.
TP(g/L)
ALB(g/L)
治疗前
Before treatment
治疗后
After treatment
治疗前
Before treatment
治疗后
, 百拇医药
After treatment
治疗组
Treated
40
70.74±4.05#
75.14±4.56#
40.32±4.87#
43.28±4.21*
对照组
Control
40
, 百拇医药
71.78±5.46
73.98±4.55
41.01±7.69
40.36±5.19
#：P>0.05，治疗前后两组的比较； *：P<0.01，治疗前后两组的比较
#：The same as that in Table 1.*:The same as that in Table 1
3 讨论
人体新陈代谢过程中可产生对机体有害的代谢产物如超氧自由基(O-2)及过氧自由基(O＝2)等，这些氧自由基对肝细胞膜有很强的破坏作用，它与肝细胞膜磷脂中的不饱和脂肪酸结合，形成脂质过氧化物，这是一组很强的毒性物质，改变膜磷脂的分子结构及细胞膜的流动性与通透性〔3〕。肝脏疾病时肝脏解毒功能降低和缺血缺氧，可引起SOD活性下降，导致氧自由基增多〔4〕。SOD是目前已知体内唯一以自由基为底物的酶，它的活力大小可以间接反应体内氧自由基数量。硫普罗宁改善肝功能及降酶的机理认为硫普罗宁是含游离巯基的甘氨酸衍生物，能有效对抗各种生物、化学毒物质对肝脏细胞尤其膜系统的损伤，保护肝细胞。而且它能够降低肝细胞线粒体膜ATP酶活性，升高细胞内ATP含量，改善肝细胞线粒体形态和功能。再者，ATP能够活化肝细胞物质、能量代谢，维持肝细胞内还原型谷胱甘肽浓度，保护肝细胞膜〔5〕。硫普罗宁治疗慢性乙型肝炎无论是在SOD活性，还是在ALT值均与治疗前相比较，差异有显著性，并且对提高血清白蛋白及改善A/G比值的比较结果，差异亦有显著性。从而提示本药具有促进蛋白合成，改善A/G比值的作用。本研究结果显示硫普罗宁在保护肝细胞膜方面和利胆作用明显。治疗组治疗后SOD活性与正常人相比，差异有显著性，可能为用药后机体的一种代偿反应，能持续多长时间及是否与肝纤维化有关，有待进一步研究。从而显示，在肝功能受损时，氧自由基增多，SOD值低于正常人，在肝功能恢复正常时，SOD值增加，氧自由基减少。由此可见肝脏是体内物质及能量代谢极为重要的脏器，耗氧量大，产生的氧自由基也相应增多，事实上，氧自由基参与了肝胆疾病的发生和发展过程。SOD值的变化，提示硫普罗宁的作用机制之一是提高慢性肝炎患者体内的SOD，从而加强对氧自由基的清除，起到改善肝功能的作用。为肝病的恢复及预后提供了可靠依据。
, 百拇医药
参 考 文 献
1，张国梁，高复安，李明，等.软肝饮对肝硬化患者红细胞SOD、血浆LPO与LH、HA影响.中西医结合杂志，1996，6：8.
2，张景云，李淑真，吴坚美，等.肝硬化患者氧自由基水平及抗氧化酶活性的临床观察.中国实用内科杂志，1994，14：21.
3，梁扩寰，主编.肝脏病学.北京：人民卫生出版社出版，1995，435.
4，张常然，郭超荣，覃宗坦，等.丹参清除病毒性肝炎氧自由基的初步研究.中西医结合肝病杂志，1997，7：236.
5，杨波，牛正先，王萍，等.硫普罗宁随机对照治疗慢性病毒性肝炎108例.中国新药杂志，1997，6：94.
(收稿日期：2000-06-21), 百拇医药
单位：湖北省宜昌市第三人民医院 宜昌 443003
关键词：肝炎；慢性活动性；超氧化物歧化酶；巯基丙酰甘氨酶；治疗
中华实验和临床病毒学杂志000414 【摘要】 目的 观察硫普罗宁对慢性乙型肝炎氧自由基的清除作用。方法 用黄嘌呤氧化酶法对80例慢性乙型肝炎体内的超氧化物歧化酶(SOD)进行检测，并检测了丙氨酸转氨酶(ALT)、血清总胆红素(TBiL)、血清总蛋白(TP)、A/G比值。40例接受常规护肝，退黄治疗为对照组；40例除接受护肝、退黄治疗外，口服硫普罗宁为治疗组。结果 16例正常人SOD活性检测正常值为165.9±23.36 NU/ml。40例治疗组与40例对照组治疗前年龄、性别无差异，SOD、ALT、TBil、TP、ALB亦无差异，SOD分别为106.57±40.68与105.18±44.59。两组治疗后，SOD、ALT、TBil、ALB的测定值差异有显著性(P<0.01)，SOD分别为187.93±35.24与157.96±47.29；ALT分别为38.41±22.22与68.52±34.19；TBil分别为23.15±12.46与30.38±21.80；ALB分别为43.28±4.21与40.36±5.19。结论 硫普罗宁对治疗慢性乙型肝炎、清除氧自由基有较好疗效，且有改善肝功能的作用。
, 百拇医药
A preliminary study on the activation of superoxide dismutase by Tiopronin in patients with chronic hepatitis B
CHEN Changyin,TAN Zongtan,QIU Shaoqin
(The 3rd People′s Hospital of Yichang City, Hubei,Yichang 443003, China)
【Abstract】 Objective To observe the clearance effect of Tiopronin on oxygen free radicals in chronic hepatitis B patients.Methods The ranthine oxidase assay was used to detect superoxide dismutase (SOD) in 80 chronic hepatitis B patients, the ALT,TBil,TP and A/G ratio of the patients were also tested. The 80 chronic hepatitis B patients were divided into two groups, the control group was treated with routine liver protective and jaundice regressing drugs while the treated group was additionally administered with Tiopromin bsrsides the routine treatment. Results In two groups of patients with similar ages and sexes,there showed no differences in levels of SOD, ALT,TBil,TP and ALB before treatment,as the SOD in lreated group and control group wrre 106.57±40.68 NU/ml and 105.18±44.59 NU/ml respectively, while the normal value for SOD in 16 normal persons was 165.9±23.36 NU/ml. After treatment,there were significant differences (P<0.01) in SOD,ALT,TBil and ALB levels which showed SOD 187.93±35.24 NU/ml, ALT38.41±22.22U/L,TBil 23.15±12.46 μmol/L, ALB 43.28±4.21 g/L in the treated group and SOD 157.96±47.29 NU/ml, ALT 68.52±34.19 U/L,TBil 30.38±21.80 μmol/L and ALB 40.36±5.19 g/L in the control group.Conclusion There showed a good therapeutic effect of Tiopronin on the clearance of oxygen free radicals in chronic hepatitis B patients and also it can improve the liver function.
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【Key words】 Hepatitis,chronic active; Superoxide dismutase; Mercaptorropionylglgine/therapy
近年来，氧自由基在疾病发生、发展过程中的作用日益受到重视。对病毒性肝炎患者血液中氧自由基及检测超氧化物歧化酶(SOD)的报道较多〔1，2〕，但结果不一致。硫普罗宁在治疗病毒性肝炎过程中主要有促进肝细胞再生的作用，其中是否有清除病毒性肝炎氧自由基的作用，有关报道较少，我们对此进行了临床研究。
1 材料和方法
1.1 一般资料 病例为宜昌市第三人民医院1998年1月至1998年12月住院的80例慢性乙型肝炎患者，将其随机分为两组，其中治疗组40例：轻度9例，中度9例，重度22例；HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗-HBc(+)17例；HBsAg(+)、抗-HBe(+)、抗-HBc(+)13例；HBsAg(+)、抗-HBc(+)7例；HBsAg(+)3例；HBV DNA(+)23例；男35例，女5例；年龄20至57岁，平均36±9.0岁。对照组40例：轻度8例，中度10例，重度22例；HBsAg(+)、HBeAg(+)、抗-HBc(+)15例；HBsAg(+)、抗-HBe(+)、抗-HBc(+)14例；HBsAg(+)、抗-HBc(+)9例；HBsAg(+)2例；HBV DNA(+)21例；男34例，女6例；年龄19至54岁，平均37±10岁。两组年龄、性别差异无显著性。诊断标准参照1995年第五届全国传染病与寄生虫病学术会议修订的诊断标准诊断。
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1.2 治疗方法 对照组给予常规护肝、退黄治疗(如门冬氨酸钾镁、能量合剂、肝太乐等)；治疗组在对照组的基础上每日予硫普罗宁片0.6口服，15 d为一疗程。治疗组仅见2例轻度皮疹，经对症治疗好转，无其他不良反应。两组均不使用丹参、维生素E、C等抗氧化剂。硫普罗宁商品名为凯西莱，由河南新谊医药集团研制生产。
1.3 检测项目及方法 两组分别于入院时、住院第15 d，取抗凝血2 ml分装保存于冰箱中，集中检测SOD活性；同时检测丙氨酸转氨酶(ALT)、血清总胆红素(TBil)、血清总蛋白(TP)、血清白蛋白(ALB)。SOD活性检测用黄嘌呤氧化酶法，操作步骤及原理按说明书要求进行，试剂购自南京聚力生物工程公司。ALT、TBil、TP、ALB检测用半自动生化分析仪检测，以上检测均由同一检验师操作。
2 结果
16例正常人SOD活性检测，正常值为165.69±23.36 NU/ml，与慢性乙型肝炎治疗前的差异有显著性(P<0.05)。治疗后对照组无差异(P>0.05)，治疗组有差异(P<0.05)。见表1。
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表1 80例慢性乙型肝炎治疗前后SOD的检测结果
Tab.1 SOD test in 80 chronic hepatitis B
patients before and after treatment 组别
Group
检测数
Tested no.
SOD(NU/ml)
治疗前
Before treatment
治疗后
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After treatment
治疗组
Treated
40
106.57±40.68#
187.93±35.24*
对照组
Control
40
105.18±44.59
157.96±47.29
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#:P>0.05，治疗前两组间的比较;*:P<0.01，治疗后两组间的比较
#:Comparison of the two groups before treatment,P>0.05.*:Comparison of the two groups after treatmest,P<0.01
慢性乙型肝炎治疗前后ALT、TBil、TP、ALB变化情况见表2、3。两组治疗后乙肝二对半、HBV DNA均无改变。
表2 80例慢性乙型肝炎治疗前后ALT、TBil的检测结果
Tab.2 Test of ALT and TBil in 80 chronic hepatitis B patients before and after treatment 组别
, 百拇医药 Group
检测数
Tested no.
ALT(U/L)
TBil(μmol/L)
治疗前
Before treatment
治疗后
After treatment
治疗前
Before treatment
治疗后
, 百拇医药
After treatment
治疗组
Treated
40
266.95±220.59#
38.41±22.22*
63.37±45.73#
23.15±12.46*
对照组
Control
40
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234.43±201.40
68.52±34.19
66.37±45.09
30.38±21.80
#：P>0.05，治疗前两组间的比较； *：P<0.01，治疗后两组间的比较
#：The same as that in Table 1.*:The same as that in Table 1表3 80例慢性乙型肝炎治疗前后TP、ALB检测结果
Tab.3 Test of TP and ALB in 80 chronic hepatitis B patients before and after treatment 组别
, http://www.100md.com
Group
检测数
Tested no.
TP(g/L)
ALB(g/L)
治疗前
Before treatment
治疗后
After treatment
治疗前
Before treatment
治疗后
, 百拇医药
After treatment
治疗组
Treated
40
70.74±4.05#
75.14±4.56#
40.32±4.87#
43.28±4.21*
对照组
Control
40
, 百拇医药
71.78±5.46
73.98±4.55
41.01±7.69
40.36±5.19
#：P>0.05，治疗前后两组的比较； *：P<0.01，治疗前后两组的比较
#：The same as that in Table 1.*:The same as that in Table 1
3 讨论
人体新陈代谢过程中可产生对机体有害的代谢产物如超氧自由基(O-2)及过氧自由基(O＝2)等，这些氧自由基对肝细胞膜有很强的破坏作用，它与肝细胞膜磷脂中的不饱和脂肪酸结合，形成脂质过氧化物，这是一组很强的毒性物质，改变膜磷脂的分子结构及细胞膜的流动性与通透性〔3〕。肝脏疾病时肝脏解毒功能降低和缺血缺氧，可引起SOD活性下降，导致氧自由基增多〔4〕。SOD是目前已知体内唯一以自由基为底物的酶，它的活力大小可以间接反应体内氧自由基数量。硫普罗宁改善肝功能及降酶的机理认为硫普罗宁是含游离巯基的甘氨酸衍生物，能有效对抗各种生物、化学毒物质对肝脏细胞尤其膜系统的损伤，保护肝细胞。而且它能够降低肝细胞线粒体膜ATP酶活性，升高细胞内ATP含量，改善肝细胞线粒体形态和功能。再者，ATP能够活化肝细胞物质、能量代谢，维持肝细胞内还原型谷胱甘肽浓度，保护肝细胞膜〔5〕。硫普罗宁治疗慢性乙型肝炎无论是在SOD活性，还是在ALT值均与治疗前相比较，差异有显著性，并且对提高血清白蛋白及改善A/G比值的比较结果，差异亦有显著性。从而提示本药具有促进蛋白合成，改善A/G比值的作用。本研究结果显示硫普罗宁在保护肝细胞膜方面和利胆作用明显。治疗组治疗后SOD活性与正常人相比，差异有显著性，可能为用药后机体的一种代偿反应，能持续多长时间及是否与肝纤维化有关，有待进一步研究。从而显示，在肝功能受损时，氧自由基增多，SOD值低于正常人，在肝功能恢复正常时，SOD值增加，氧自由基减少。由此可见肝脏是体内物质及能量代谢极为重要的脏器，耗氧量大，产生的氧自由基也相应增多，事实上，氧自由基参与了肝胆疾病的发生和发展过程。SOD值的变化，提示硫普罗宁的作用机制之一是提高慢性肝炎患者体内的SOD，从而加强对氧自由基的清除，起到改善肝功能的作用。为肝病的恢复及预后提供了可靠依据。
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参 考 文 献
1，张国梁，高复安，李明，等.软肝饮对肝硬化患者红细胞SOD、血浆LPO与LH、HA影响.中西医结合杂志，1996，6：8.
2，张景云，李淑真，吴坚美，等.肝硬化患者氧自由基水平及抗氧化酶活性的临床观察.中国实用内科杂志，1994，14：21.
3，梁扩寰，主编.肝脏病学.北京：人民卫生出版社出版，1995，435.
4，张常然，郭超荣，覃宗坦，等.丹参清除病毒性肝炎氧自由基的初步研究.中西医结合肝病杂志，1997，7：236.
5，杨波，牛正先，王萍，等.硫普罗宁随机对照治疗慢性病毒性肝炎108例.中国新药杂志，1997，6：94.
(收稿日期：2000-06-21), 百拇医药