丹仙康骨胶囊抗炎镇痛作用实验研究
作者：隋艳华 沈冯君 齐敏友 韩继强 安邦权 凌晓午 李贵芳 徐方明
单位：隋艳华 沈冯君 齐敏友 韩继强(贵阳中医学院贵阳 550002)；安邦权 凌晓午 李贵芳 徐方明(贵州省人民医院)
关键词：康骨胶囊；药效学；康骨胶囊；治疗应用；抗炎；药物作用；镇痛；药物作用；实验研究；动物；昆明种小鼠
中医正骨000503 提 要 为探讨丹仙康骨胶囊(康骨胶囊)抗炎、镇痛作用，采用二甲苯致小鼠耳肿、蛋清及角叉菜胶致足肿、棉球致肉芽肿的急、慢性炎症模型以及化学刺激、热刺激致痛模型进行观察。结果显示康骨胶囊能够减轻耳肿、足肿、肉芽肿，对抗化学、热刺激引起的疼痛。表明康骨胶囊具有明显的抗炎镇痛作用，其作用与本组方活血化瘀功效相一致。
中图分类号：R289.5；R242 文献标识码：A 文章编号：1001-6015(2000)05-0007-02
, http://www.100md.com
AN EXPERIMENTAL STUDY ON THE ANTI-INFLAMMATORY AND ANALGESIC EFFECTS OF “DANXIAN KANGGU” CAPSULES
Sui Yanhua，Shen Fengjun，Qi Minyou
(Guiyang College of Traditional Chinese Medicine, Guiyang 550002)
In order to explore the anti-inflammatory and analgesic effects of “DANXIAN KANGGU” (Bone-strengthening, BS) capsules, animal models of acute and chronic inflammations and pains were made, including mice ear edema by xylene, plantar edema by egg white and carrageenin, granuloma by cotton ball and pains by chemical and heat irritations, and observed. The results showed that BS capsules have significant anti-inflammatory and analgesic effects, which were similar to those of the blood-circulation-activating and blood-stasis-eliminating prescription of this group.
, http://www.100md.com
Key Words: “KANGGU” capsule/pharmacodynamics “KANGGU” capsule/therapeutic application anti-inflammation/drug action analgesia/drug action experimental study animal mouse
康骨胶囊是用丹参、川芎、骨碎补、红花等制成的纯中药复方制剂，其方药组成是在本院骨科专家沈冯君教授的经验方化瘀活骨汤的基础上经过进一步筛选而成的，经长期临床应用证实该药具有良好的活血化瘀、疏通血脉、补肾壮骨的功效，为进一步验证其抗炎镇痛作用，我们进行了本次动物实验，现将结果报告如下。
1 材 料
1.1 药物 丹仙康骨胶囊由贵阳中医学院微量元素研究所提供，批号：980928。健骨生由北京匡达制药厂生产，批号：980922。二甲苯、角叉菜胶、伊文思兰等均由贵州省药材公司提供。
, http://www.100md.com
1.2 动物 昆明种小鼠，体重20±2g，由中国人民解放军第3军医大学动物研究所提供，合格证：实动24002012。
1.3 仪器 GJ-8402型热板测痛仪由浙江海宁白石电学医药仪器厂提供，723可见光分光光度计由上海第三医学仪器厂提供。
1.4 数据统计 均以x±s表示，对组间及自身用药前、用药后比较，进行t检验。
2 方法与结果
2.1 丹仙康骨胶囊抗炎作用实验研究
2.1.1 对抗二甲苯致小鼠耳肿作用 仿文献〔1〕取小鼠50只，随机分为生理盐水(NS)组以NS 20ml.kg-1灌胃(PO)；康骨胶囊大、中、小剂量组，剂量分别为临床日用量10、6、3倍(0.84、0.56、0.28g.kg-1合生药1.9、1.1、0.56g.kg-1)；健骨生组以健骨生2.7g.kg-1合生药4.9g.kg-1。为临床日用量的10倍。每组10只，♀各半，给药剂量均为20ml.kg-1。PO给药每日1次共5次，末次给药后1小时，各鼠右耳两面均涂二甲苯0.03ml/只，0.5小时后剪取左右耳片(直径为8mm)，分别称重计算肿胀度(mg)，结果见表1，康骨胶囊三种剂量均可明显减轻鼠耳肿胀，明显降低耳肿胀度，与NS组比较差异显著，表明康骨胶囊具有对抗二甲苯致急性炎症作用，比健骨生作用优。
, http://www.100md.com
2.1.2 对抗蛋清致足肿作用 仿文献2法取小鼠55只，随机分组给药同实验2.1.1项目，末次给药后1小时，各鼠右足跖部皮下注射20%新鲜蛋清每只0.03ml，于1小时后剪取左右足的同一部位，分别称重计算肿胀度(mg)，结果如表1所示，康骨胶囊不同剂量均能减轻蛋清所致的足肿胀，与NS及健骨生比较差异显著，并且量效呈正相关，表明康骨胶囊具有对抗蛋清致急性炎症作用，并且随剂量增加作用加强。
表1 对抗二甲苯致耳肿、蛋清致足肿作用
±s 组 别
(n=10)
剂量
(g.kg-1)
耳肿胀度
, 百拇医药
(mg)
足肿胀度
(mg)
NS对照组
-
3.16±0.96
20.0±9.0
康骨胶囊组
0.84
1.80±0.63△
9.0±5.0△
0.50
, 百拇医药
1.61±0.85△
11.0±8.0
0.28
1.57±0.84△
11.0±5.0
健骨生组
2.70
2.24±0.54
14.0±8.1
注 与NS对照组比较：P<0.05；△P<0.01；▲P<0.001(下同)
, 百拇医药
2.1.3 对抗角叉菜胶致小鼠足肿作用 仿文献3法取小鼠50只，随机分组给药同实验2.1.1项目，末次给药后1小时，以1%角叉菜胶0.03ml注射在各鼠右足跖部皮下，2小时后取左右两足同一部位，分别称重计算左右足肿胀度，结果见表2，康骨胶囊组比NS组足肿胀程度轻，差异极显著，表明该制剂明显的对抗角叉菜胶所致亚急性炎症作用，比健骨生作用优。
2.1.4 抑制小鼠棉球肉芽肿作用 仿文献1法取小鼠60只随机分组同实验2.1.1项目，常规操作于各鼠左右腹股沟部植入消毒无菌10mg棉球，手术当日按表2所示药物及剂量灌胃给药，每日1次，共7次。第8天，取出棉球肉芽肿分别称湿重，减去原棉球10mg，剩余重量为肉芽肿重量，结果如表2所示，康骨胶囊及健骨生组均比NS组肉芽肿轻，差异均极显著，表明以上两种制剂均具有抑制肉芽肿增重。表2 对抗角叉菜胶致足肿、抑制棉球肉芽肿作用±s 组别
, http://www.100md.com
(n=10)
剂量
(g.kg-1)
中肿胀度
(mg)
棉球肉芽肿
(mg)
NS对照组
-
55.96±11.8
56.90±8.52
康骨胶囊组
, 百拇医药
0.84
35.22±10.3
46.69±6.07△
0.50
35.63± 8.4▲
44.85±7.26
0.28
37.26±14.1▲
44.83±7.26△
健骨生组
2.70
, 百拇医药
43.87±10.2
43.80±8.94
2.1.5 抑制大鼠皮内色素渗出作用 仿文献4法取大鼠50只随机分组同实验2.1.1项目，按表3剂量灌胃给药，每日1次，共3次，末次药后用8%硫化钠0.2ml涂各鼠背部3mm2，次日于脱毛区皮内注射0.1%磷酸组织胺，立即尾静脉注射1%伊文思兰，每100g体重0.4ml，15min后处死动物，剪取兰染皮肤，切碎浸入水：丙酮=3∶1溶液内浸泡48h，取其过滤液置723分光光度计比色，记录其光密度(QD)。结果如表3所示康骨胶囊组QD值比NS组小，表示康骨胶囊组色素渗出减少，皮内毛细血管通透性降低，炎症减轻，健骨生作用不明显。表3 对抗大鼠皮内色素渗出作用±s 组别
鼠数
, http://www.100md.com
剂量
(g.kg-1)
QD(光密度)
NS对照组
8
-
0.608±0.362
康骨胶囊组
7
0.50
0.242±0.100△
6
, 百拇医药
0.28
0.284±0.160
7
0.14
0.365±0.103
健骨生组
8
1.35
0.365±0.249
2.2 丹仙康骨胶囊镇痛作用试验研究
2.2.1 对抗热板刺激致痛作用 采用G-8402型热板测痛仪筛选痛阈值在5～30秒的合格♀小鼠50只，随机分组同实验2.1.1项目，记录逐只小鼠痛阈值，按表4所示剂量灌胃给药2次，间隔3小时，末次药后1、2、3小时，分别测定各鼠热板痛阈值，结果见表4各给药组痛阈值均有不同程度提高，与NS组比较差异显著，提示以上两种药物对热刺激所致疼痛均有明显的止痛作用，其止痛作用强度相近似。表4 对热板刺激镇痛作用±s 组别
, http://www.100md.com
(n=10)
剂量
(g.kg-1)
痛阈值S/h
0
1
2
3
NS对照组
-
19.1± 4.7
21.9± 5.9
, http://www.100md.com 21.4± 5.7
22.1± 5.3
康骨胶囊组
0.84
15.6±10.6
24.7± 9.8
40.7±20.8△
4.6±18.3△
0.05
16.4± 5.3
25.0±12.3▲
, 百拇医药
34.6±20.2△
28.3±11.9
0.28
15.3± 3.6
28.4±17.7
40.7±20.8▲
37.9±19.2▲
健骨生组
2.70
13.9± 4.3
24.7± 9.8▲
, 百拇医药
33.7±15.8△
34.6±18.3△
2.2.2 对抗冰醋酸致痛作用(扭体法) 仿文献2法取小鼠50只，按表5分组给药，每天1次，共3次，末次药后1小时各鼠腹腔注射0.7%冰醋酸0.2ml，立即观察各鼠扭体潜伏期、15分钟扭体次数，进行统计学分析，计算各种药物镇痛的百分率。结果如表5所示以上两种药物均延长小鼠扭体潜伏期，提高镇痛百分率，与NS组相比差异显著，但量数关系不显著。表5 对抗化学物质刺激镇痛作用±s 组别
(n=10)
剂量
(g.kg-1)
, http://www.100md.com
扭体潜伏期
(S)
扭体次数
镇痛率
(%)
NS对照组
-
3.77±1.18
18.7±4.7
-
康骨胶囊组
0.84
6.70±1.7△
, 百拇医药
9.5±4.5▲
49
0.50
5.50±1.1△
10.6±5.6△
43
0.28
7.95±3.3△
10.0±4.3▲
47
健骨生组
, 百拇医药
2.70
8.15±3.4△
9.8±3.6▲
48
3 讨 论
康骨胶囊是在经验方化瘀活骨汤的基础上研制而成纯中药制剂，其主治股骨头缺血性坏死，骨质疏松、骨折等骨伤科疾病，其功效为活血化瘀、补肾长骨等，临床疗效良好。根据以上肤浅的实验证实该制剂具有对抗二甲苯致急性炎症、角叉菜胶所致亚急性炎症、棉球所致慢性炎症，提高化学刺激及热板刺激的痛阈值，与该制剂的主治功效相吻合。根据我们另外的实验证实该药具有改善股骨头局部血液循环、减少血钙含量、增加生长激素含量、增加ALP活性、增强机体免疫功能，认为康骨胶囊是一种具有发展前景的新药。
贵州省科委基金资助项目
, http://www.100md.com
作者简介 隋艳华，女，1939年生。1966年山东医学院医疗系本科毕业。现为贵阳中医学院教授、硕士研究生导师。从事医教研工作30余年，主要从事中医药的药理研究与实验研究，主持并参与国家、省级多项攻关项目的研究，发表论文20余篇，现为国家新药评审委员，带研究生2名。
参考文献
1，杨燕军，陈再智，陈小娟，等。口洁素抗炎镇痛及抑菌活性的研究。中药药理与临床 1995；(特刊)：83
2，严梅贞，宋红月，谢念祥，等。咽痛康冲剂的主要药效学研究。中国实验方剂学杂志 1996；2(6)：33
3，隋艳华，谢红，安邦权，等。前列舒片抑制前列腺增生及抗炎作用。山东中医学院学报 1996；20(4)：273
4，李仪奎，王钦茂。中药药理实验方法学。上海：上海科学技术出版社，1991；302
(1999-08-01收稿 1999-11-24修回), 百拇医药
单位：隋艳华 沈冯君 齐敏友 韩继强(贵阳中医学院贵阳 550002)；安邦权 凌晓午 李贵芳 徐方明(贵州省人民医院)
关键词：康骨胶囊；药效学；康骨胶囊；治疗应用；抗炎；药物作用；镇痛；药物作用；实验研究；动物；昆明种小鼠
中医正骨000503 提 要 为探讨丹仙康骨胶囊(康骨胶囊)抗炎、镇痛作用，采用二甲苯致小鼠耳肿、蛋清及角叉菜胶致足肿、棉球致肉芽肿的急、慢性炎症模型以及化学刺激、热刺激致痛模型进行观察。结果显示康骨胶囊能够减轻耳肿、足肿、肉芽肿，对抗化学、热刺激引起的疼痛。表明康骨胶囊具有明显的抗炎镇痛作用，其作用与本组方活血化瘀功效相一致。
中图分类号：R289.5；R242 文献标识码：A 文章编号：1001-6015(2000)05-0007-02
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AN EXPERIMENTAL STUDY ON THE ANTI-INFLAMMATORY AND ANALGESIC EFFECTS OF “DANXIAN KANGGU” CAPSULES
Sui Yanhua，Shen Fengjun，Qi Minyou
(Guiyang College of Traditional Chinese Medicine, Guiyang 550002)
In order to explore the anti-inflammatory and analgesic effects of “DANXIAN KANGGU” (Bone-strengthening, BS) capsules, animal models of acute and chronic inflammations and pains were made, including mice ear edema by xylene, plantar edema by egg white and carrageenin, granuloma by cotton ball and pains by chemical and heat irritations, and observed. The results showed that BS capsules have significant anti-inflammatory and analgesic effects, which were similar to those of the blood-circulation-activating and blood-stasis-eliminating prescription of this group.
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Key Words: “KANGGU” capsule/pharmacodynamics “KANGGU” capsule/therapeutic application anti-inflammation/drug action analgesia/drug action experimental study animal mouse
康骨胶囊是用丹参、川芎、骨碎补、红花等制成的纯中药复方制剂，其方药组成是在本院骨科专家沈冯君教授的经验方化瘀活骨汤的基础上经过进一步筛选而成的，经长期临床应用证实该药具有良好的活血化瘀、疏通血脉、补肾壮骨的功效，为进一步验证其抗炎镇痛作用，我们进行了本次动物实验，现将结果报告如下。
1 材 料
1.1 药物 丹仙康骨胶囊由贵阳中医学院微量元素研究所提供，批号：980928。健骨生由北京匡达制药厂生产，批号：980922。二甲苯、角叉菜胶、伊文思兰等均由贵州省药材公司提供。
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1.2 动物 昆明种小鼠，体重20±2g，由中国人民解放军第3军医大学动物研究所提供，合格证：实动24002012。
1.3 仪器 GJ-8402型热板测痛仪由浙江海宁白石电学医药仪器厂提供，723可见光分光光度计由上海第三医学仪器厂提供。
1.4 数据统计 均以x±s表示，对组间及自身用药前、用药后比较，进行t检验。
2 方法与结果
2.1 丹仙康骨胶囊抗炎作用实验研究
2.1.1 对抗二甲苯致小鼠耳肿作用 仿文献〔1〕取小鼠50只，随机分为生理盐水(NS)组以NS 20ml.kg-1灌胃(PO)；康骨胶囊大、中、小剂量组，剂量分别为临床日用量10、6、3倍(0.84、0.56、0.28g.kg-1合生药1.9、1.1、0.56g.kg-1)；健骨生组以健骨生2.7g.kg-1合生药4.9g.kg-1。为临床日用量的10倍。每组10只，♀各半，给药剂量均为20ml.kg-1。PO给药每日1次共5次，末次给药后1小时，各鼠右耳两面均涂二甲苯0.03ml/只，0.5小时后剪取左右耳片(直径为8mm)，分别称重计算肿胀度(mg)，结果见表1，康骨胶囊三种剂量均可明显减轻鼠耳肿胀，明显降低耳肿胀度，与NS组比较差异显著，表明康骨胶囊具有对抗二甲苯致急性炎症作用，比健骨生作用优。
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2.1.2 对抗蛋清致足肿作用 仿文献2法取小鼠55只，随机分组给药同实验2.1.1项目，末次给药后1小时，各鼠右足跖部皮下注射20%新鲜蛋清每只0.03ml，于1小时后剪取左右足的同一部位，分别称重计算肿胀度(mg)，结果如表1所示，康骨胶囊不同剂量均能减轻蛋清所致的足肿胀，与NS及健骨生比较差异显著，并且量效呈正相关，表明康骨胶囊具有对抗蛋清致急性炎症作用，并且随剂量增加作用加强。
表1 对抗二甲苯致耳肿、蛋清致足肿作用
±s 组 别(n=10)
剂量
(g.kg-1)
耳肿胀度
, 百拇医药
(mg)
足肿胀度
(mg)
NS对照组
-
3.16±0.96
20.0±9.0
康骨胶囊组
0.84
1.80±0.63△
9.0±5.0△
0.50
, 百拇医药
1.61±0.85△
11.0±8.0
0.28
1.57±0.84△
11.0±5.0
健骨生组
2.70
2.24±0.54
14.0±8.1
注 与NS对照组比较：P<0.05；△P<0.01；▲P<0.001(下同)
, 百拇医药
2.1.3 对抗角叉菜胶致小鼠足肿作用 仿文献3法取小鼠50只，随机分组给药同实验2.1.1项目，末次给药后1小时，以1%角叉菜胶0.03ml注射在各鼠右足跖部皮下，2小时后取左右两足同一部位，分别称重计算左右足肿胀度，结果见表2，康骨胶囊组比NS组足肿胀程度轻，差异极显著，表明该制剂明显的对抗角叉菜胶所致亚急性炎症作用，比健骨生作用优。
2.1.4 抑制小鼠棉球肉芽肿作用 仿文献1法取小鼠60只随机分组同实验2.1.1项目，常规操作于各鼠左右腹股沟部植入消毒无菌10mg棉球，手术当日按表2所示药物及剂量灌胃给药，每日1次，共7次。第8天，取出棉球肉芽肿分别称湿重，减去原棉球10mg，剩余重量为肉芽肿重量，结果如表2所示，康骨胶囊及健骨生组均比NS组肉芽肿轻，差异均极显著，表明以上两种制剂均具有抑制肉芽肿增重。表2 对抗角叉菜胶致足肿、抑制棉球肉芽肿作用
±s 组别, http://www.100md.com
(n=10)
剂量
(g.kg-1)
中肿胀度
(mg)
棉球肉芽肿
(mg)
NS对照组
-
55.96±11.8
56.90±8.52
康骨胶囊组
, 百拇医药
0.84
35.22±10.3
46.69±6.07△
0.50
35.63± 8.4▲
44.85±7.26
0.28
37.26±14.1▲
44.83±7.26△
健骨生组
2.70
, 百拇医药
43.87±10.2
43.80±8.94
2.1.5 抑制大鼠皮内色素渗出作用 仿文献4法取大鼠50只随机分组同实验2.1.1项目，按表3剂量灌胃给药，每日1次，共3次，末次药后用8%硫化钠0.2ml涂各鼠背部3mm2，次日于脱毛区皮内注射0.1%磷酸组织胺，立即尾静脉注射1%伊文思兰，每100g体重0.4ml，15min后处死动物，剪取兰染皮肤，切碎浸入水：丙酮=3∶1溶液内浸泡48h，取其过滤液置723分光光度计比色，记录其光密度(QD)。结果如表3所示康骨胶囊组QD值比NS组小，表示康骨胶囊组色素渗出减少，皮内毛细血管通透性降低，炎症减轻，健骨生作用不明显。表3 对抗大鼠皮内色素渗出作用
±s 组别鼠数
, http://www.100md.com
剂量
(g.kg-1)
QD(光密度)
NS对照组
8
-
0.608±0.362
康骨胶囊组
7
0.50
0.242±0.100△
6
, 百拇医药
0.28
0.284±0.160
7
0.14
0.365±0.103
健骨生组
8
1.35
0.365±0.249
2.2 丹仙康骨胶囊镇痛作用试验研究
2.2.1 对抗热板刺激致痛作用 采用G-8402型热板测痛仪筛选痛阈值在5～30秒的合格♀小鼠50只，随机分组同实验2.1.1项目，记录逐只小鼠痛阈值，按表4所示剂量灌胃给药2次，间隔3小时，末次药后1、2、3小时，分别测定各鼠热板痛阈值，结果见表4各给药组痛阈值均有不同程度提高，与NS组比较差异显著，提示以上两种药物对热刺激所致疼痛均有明显的止痛作用，其止痛作用强度相近似。表4 对热板刺激镇痛作用
±s 组别, http://www.100md.com
(n=10)
剂量
(g.kg-1)
痛阈值S/h
0
1
2
3
NS对照组
-
19.1± 4.7
21.9± 5.9
, http://www.100md.com 21.4± 5.7
22.1± 5.3
康骨胶囊组
0.84
15.6±10.6
24.7± 9.8
40.7±20.8△
4.6±18.3△
0.05
16.4± 5.3
25.0±12.3▲
, 百拇医药
34.6±20.2△
28.3±11.9
0.28
15.3± 3.6
28.4±17.7
40.7±20.8▲
37.9±19.2▲
健骨生组
2.70
13.9± 4.3
24.7± 9.8▲
, 百拇医药
33.7±15.8△
34.6±18.3△
2.2.2 对抗冰醋酸致痛作用(扭体法) 仿文献2法取小鼠50只，按表5分组给药，每天1次，共3次，末次药后1小时各鼠腹腔注射0.7%冰醋酸0.2ml，立即观察各鼠扭体潜伏期、15分钟扭体次数，进行统计学分析，计算各种药物镇痛的百分率。结果如表5所示以上两种药物均延长小鼠扭体潜伏期，提高镇痛百分率，与NS组相比差异显著，但量数关系不显著。表5 对抗化学物质刺激镇痛作用
±s 组别(n=10)
剂量
(g.kg-1)
, http://www.100md.com
扭体潜伏期
(S)
扭体次数
镇痛率
(%)
NS对照组
-
3.77±1.18
18.7±4.7
-
康骨胶囊组
0.84
6.70±1.7△
, 百拇医药
9.5±4.5▲
49
0.50
5.50±1.1△
10.6±5.6△
43
0.28
7.95±3.3△
10.0±4.3▲
47
健骨生组
, 百拇医药
2.70
8.15±3.4△
9.8±3.6▲
48
3 讨 论
康骨胶囊是在经验方化瘀活骨汤的基础上研制而成纯中药制剂，其主治股骨头缺血性坏死，骨质疏松、骨折等骨伤科疾病，其功效为活血化瘀、补肾长骨等，临床疗效良好。根据以上肤浅的实验证实该制剂具有对抗二甲苯致急性炎症、角叉菜胶所致亚急性炎症、棉球所致慢性炎症，提高化学刺激及热板刺激的痛阈值，与该制剂的主治功效相吻合。根据我们另外的实验证实该药具有改善股骨头局部血液循环、减少血钙含量、增加生长激素含量、增加ALP活性、增强机体免疫功能，认为康骨胶囊是一种具有发展前景的新药。
贵州省科委基金资助项目
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作者简介 隋艳华，女，1939年生。1966年山东医学院医疗系本科毕业。现为贵阳中医学院教授、硕士研究生导师。从事医教研工作30余年，主要从事中医药的药理研究与实验研究，主持并参与国家、省级多项攻关项目的研究，发表论文20余篇，现为国家新药评审委员，带研究生2名。
参考文献
1，杨燕军，陈再智，陈小娟，等。口洁素抗炎镇痛及抑菌活性的研究。中药药理与临床 1995；(特刊)：83
2，严梅贞，宋红月，谢念祥，等。咽痛康冲剂的主要药效学研究。中国实验方剂学杂志 1996；2(6)：33
3，隋艳华，谢红，安邦权，等。前列舒片抑制前列腺增生及抗炎作用。山东中医学院学报 1996；20(4)：273
4，李仪奎，王钦茂。中药药理实验方法学。上海：上海科学技术出版社，1991；302
(1999-08-01收稿 1999-11-24修回), 百拇医药