褐圆孔牛肝菌化学成分的研究
作者：万辉
单位：华东理工大学制药工程学院 上海 200237
关键词：褐圆孔牛肝菌；麦角甾醇；麦角甾醇衍生物
中草药000504摘 要 从褐圆孔牛肝菌Gyropous castaneus中分离得到6 种化合物，分别鉴定为β-麦角甾醇(β-ergosterol，Ⅰ)，5α，8α-过氧麦角甾-6，22-双烯-3β-醇(5α，8α-epidioxyergosta-6，22-dien-3β-ol，Ⅱ)，麦角甾-6，22-双烯-3β，5β，8β-三醇(ergosta-6，22-dien-3β，5β，8β-triol，Ⅲ)，烟酸(nicotic acid，Ⅳ)，反-肉桂酸(trans-cinnamic acid，Ⅴ)，亚油酸(linoleic acid，Ⅵ)。以上物质均是首次从褐圆孔牛肝菌中获得，其中化合物Ⅲ的构型未见有其它文献报道。
, 百拇医药
褐圆孔牛肝菌是圆孔牛肝菌属(Gyropous Quél)的一种真菌，主要分布在我国的云南、江苏和四川等省。我国是生物资源大国，充分利用这些宝贵的自然资源有十分重大而实际的意义。现在真菌资源已广泛地用于食品、保健品和药品等领域。但真菌种类很多，到目前为止，我们对圆孔牛肝菌这一种属的真菌了解得还很少。本文着重研究了褐圆孔牛肝菌脂溶性部分的化学成分，分离鉴定出6 种化合物。
化合物Ⅲ为白色片状结晶，Rf0.19(CHCl3，5%CH3OH)。TLC上用5%硫酸的乙醇溶液显色为蓝色。熔点245 ℃～249 ℃。13CNMR(见表1)表明共有28 个C。将其碳谱数据与Ⅰ、Ⅱ和麦角甾-6，22-双烯-3β，5α，8α-三醇(ergosta-6，22-dien-3β，5α，8α-triol，a)[1]的碳谱数据相比较，Ⅲ的C-15～C-28化学位移和Ⅰ、Ⅱ、(a)的C-15～C-28化学位移几乎完全一样，而且它们的C-1～C-14位移值也有很多相同之处，这表明化合物Ⅲ的结构与Ⅰ、Ⅱ以及(a)非常相似，很可能也是一种麦角甾醇的衍生物，其结构的不同由官能团引起。化合物Ⅲ的C-6～和C-7化学位移值表明6，7位是双键，其C-3化学位移值与Ⅱ及(a)的C-3化学位移值相差很小，故Ⅲ的3 位碳也应是-OH(β)。其C-5和C-8化学位移值分别是76.08和73.23，也位于和羟基相连碳的化学位移范围，而且化合物Ⅲ的极性比Ⅰ和Ⅱ的明显要大，与一种麦角甾双烯三醇的极性很相近[2]，因此我们推测Ⅲ的C-5和C-8应是-OH。故化合物Ⅲ的结构可能是麦角甾-6，22-双烯3β，5，8-三醇(C28H46O3)，分子量是430。质谱在412(25%)和394(14%)出峰，这表明我们推测的结构是合理的，因为连有3 个羟基的甾醇在70 eV电子轰击下极易失去1 个H2O和2 个H2O。文献[1]指出(a)的熔点为178 ℃～180 ℃，文献[3]指出麦角甾-6，22-双烯-3α，5α，8α-三醇(b)的熔点为178 ℃～181 ℃。化合物Ⅲ的C-5和C-8化学位移值与(a)的C-5和C-8化学位移值不同，其熔点和(a)、(b)的熔点相差甚远，故化合物Ⅲ的5，8位羟基不应是α，文献[4]指出有一种麦角甾双烯三醇的熔点是241 ℃～242 ℃，文献[2]也指出，一种未定出构型，但可能是化合物(a)异构体的甾醇，熔点是257 ℃，这与化合物Ⅲ的熔点相近。综合以上分析，我们确定化合物Ⅲ的结构是麦角甾-6，22-双烯-3β，5β，8β-三醇(ergosta-6，22-dien-3β，5β，8β-triol，C28H46O3)。化合物Ⅰ～Ⅲ的结构式见图1。
, 百拇医药
图1 化合物Ⅰ～Ⅲ的化学结构式
表1 化合物Ⅰ～Ⅲ 的碳谱数据(CDCl3，TMS为内标) C-No.
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
C-No.
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
1
39.19
37.05
, 百拇医药
38.93
15
23.09
23.48
22.87
2
32.07
30.14
30.41
16
28.36
28.71
27.89
, 百拇医药
3
70.54
66.46
67.41
17
55.85
56.29
55.96
4
37.12
34.79
36.99
18
, 百拇医药
12.13
12.95
12.18
5
139.87
82.27
76.08
19
16.37
18.25
18.29
6
119.69
, 百拇医药
135.29
143.43
20
40.87
39.78
40.36
7
116.39
130.70
117.67
21
21.20
20.96
, 百拇医药
21.02
8
141.41
79.52
73.23
22
135.65
135.53
135.43
9
46.36
51.19
43.12
, http://www.100md.com
23
132.08
132.39
132.06
10
38.47
37.05
32.75
24
42.96
42.86
42.78
11
, 百拇医药
21.20
20.71
21.93
25
33.18
33.15
33.03
12
40.49
39.43
39.23
26
19.73
, http://www.100md.com
19.72
19.55
13
42.92
44.65
43.62
27
20.03
20.03
19.85
14
54.65
51.77
, 百拇医药
54.69
28
17.69
17.64
17.50
1 仪器和材料
X-4型显微熔点仪，未校正；HP5989A型质谱仪，70 eV，EI；IR-408型红外光谱仪；DPX300型核磁共振仪，氢谱300 MHz，碳谱75 MHz，TMS内标；硅胶H(10～40 μm)为青岛海洋化工厂产品。
实验采用的真菌样品由昆明植物研究所提供，上海有机化学研究所岳健民教授鉴定。
2 提取与分离
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将370 g干燥的褐圆孔牛肝菌切碎，用95%的工业酒精在70 ℃下抽提4 h，抽提液浓缩至粘稠状，再用乙酸乙酯在同样的温度下提取此粘稠状物3 h。乙酸乙酯抽提液浓缩后得到7 g褐圆孔牛肝菌的脂溶性部分。将这一脂溶性部分用硅胶H(10～40 μm)通过石油醚(60 ℃～90 ℃)-丙酮的梯度柱层析分离(80∶1～1∶2)，得到21个组分(组分1～21)。组分6 经浓缩蒸干得化合物Ⅰ(80 mg)，组分12 和组分20 经同样的处理分别得到化合物Ⅱ(40 mg)和化合物Ⅲ(12 mg)。将组分13～18合并、浓缩，再用硅胶H(10～40μm)通过石油醚-丙酮的梯度柱层析(15∶1～1∶1)得到6 个组分(组分1′～6′)。组分6′蒸去溶剂得化合物Ⅳ(8 mg)；将组分13～18合并、浓缩，也用硅胶H(10～40 μm)通过石油醚-丙酮的梯度柱层析(20∶1～3∶1)得4 个组分(组分1″～4″)。组分2″浓缩后得化合物Ⅴ(8 mg)；组分7～8合并、浓缩，用自制的制备性TLC，石油醚(60 ℃～90 ℃)-丙酮(2∶1)为展开剂分得化合物Ⅵ(60 mg)。
, 百拇医药
3 鉴定
化合物Ⅰ：白色针晶，mp 153 ℃～155 ℃，其mp、IR、MS、1H，13CNMR光谱数据与文献[5，6]中的β-ergosterol的相应值完全一致，故鉴定化合物Ⅰ为β-ergosterol。
化合物Ⅱ：白色松针状结晶，mp 177 ℃～179 ℃，其mp、IR、MS、1H，13CNMR光谱数据与文献[7，8]中的5α，8α-epidioxyergosta-6，22-dien-3β-ol相应值完全一致，故鉴定化合物Ⅱ为5α，8α-epidioxyergosta-6，22-dien-3β-ol。
化合物Ⅲ：白色片状结晶；mp 245 ℃～249 ℃，Rf0.19(CHCl3，5%CH3OH)；MS (70 eV) m/z(%)：412[M-H2O]+(5)，394[M-H2O]+(3)，382(35)，378(87)，376(15)，364(10)，336(10)，312(4)，287(7)，268(38)，250(61)，241(17)，227(23)，215(22)，197(24)；13CNMR(CDCl3，TMS)见表1。
, 百拇医药
化合物Ⅳ：白色结晶，MS、1H，13CNMR数据与文献[9，10]报道一致，鉴定为Ⅳ为烟酸。
化合物Ⅴ：无色结晶，mp 128 ℃～133 ℃，MS、1H，13CNMR光谱数据与文献[11]报道一致，故鉴定Ⅴ为反式-肉桂酸。
化合物Ⅵ：淡黄色油状物，mp -3 ℃～-5 ℃。13CNMR数据与文献[12]报道的一致，鉴定Ⅵ为亚油酸。
Address: Wan Hui, College of Pharmaceutical Engineering, East Chi na University of Sciences and Technology, Shanghai
, 百拇医药
参 考 文 献
1，Hou ZF, et al. Indian J of Chem,1997,36B:293
2，Heinz D, et al. Z Physiol Chem,1965,342(4):199
3，Irmscher K. Naturwissenchaften, 1960,47:425
4，Windaus A, et al. Ann,1930,481:119
5，Chiang H C, et al. J Chin Chem Soc, 1991,38:71
6，Robert J, et al. Organic Magnetic Resonance, 1976,8:308
, 百拇医药
7，Marina D G, et al. Gazzetta Chmica Italiana, 1990,120:391
8，Kirsti K, et al. Planta Med, 1989,55:389
9，Sadtler Research Laboratories INC. Sadtler Standard Carbon-13 NMR Spectra, vols.69-72,13806C
10，Sadtler Research Laboratories INC. Nuclear magnetic Resonance spectra, vols.22,14671M
11，Sadtler Research Laboratories INC. Sadtler Standard Carbon-13 NMR Spectra, vols.45-48,8955C
12，Sadtler Research Laboratories INC. Sadtler Standard Carbon-13 NMR Spectra, vols.49-52,9608C
(收稿1999-04-15), http://www.100md.com
单位：华东理工大学制药工程学院 上海 200237
关键词：褐圆孔牛肝菌；麦角甾醇；麦角甾醇衍生物
中草药000504摘 要 从褐圆孔牛肝菌Gyropous castaneus中分离得到6 种化合物，分别鉴定为β-麦角甾醇(β-ergosterol，Ⅰ)，5α，8α-过氧麦角甾-6，22-双烯-3β-醇(5α，8α-epidioxyergosta-6，22-dien-3β-ol，Ⅱ)，麦角甾-6，22-双烯-3β，5β，8β-三醇(ergosta-6，22-dien-3β，5β，8β-triol，Ⅲ)，烟酸(nicotic acid，Ⅳ)，反-肉桂酸(trans-cinnamic acid，Ⅴ)，亚油酸(linoleic acid，Ⅵ)。以上物质均是首次从褐圆孔牛肝菌中获得，其中化合物Ⅲ的构型未见有其它文献报道。
, 百拇医药
褐圆孔牛肝菌是圆孔牛肝菌属(Gyropous Quél)的一种真菌，主要分布在我国的云南、江苏和四川等省。我国是生物资源大国，充分利用这些宝贵的自然资源有十分重大而实际的意义。现在真菌资源已广泛地用于食品、保健品和药品等领域。但真菌种类很多，到目前为止，我们对圆孔牛肝菌这一种属的真菌了解得还很少。本文着重研究了褐圆孔牛肝菌脂溶性部分的化学成分，分离鉴定出6 种化合物。
化合物Ⅲ为白色片状结晶，Rf0.19(CHCl3，5%CH3OH)。TLC上用5%硫酸的乙醇溶液显色为蓝色。熔点245 ℃～249 ℃。13CNMR(见表1)表明共有28 个C。将其碳谱数据与Ⅰ、Ⅱ和麦角甾-6，22-双烯-3β，5α，8α-三醇(ergosta-6，22-dien-3β，5α，8α-triol，a)[1]的碳谱数据相比较，Ⅲ的C-15～C-28化学位移和Ⅰ、Ⅱ、(a)的C-15～C-28化学位移几乎完全一样，而且它们的C-1～C-14位移值也有很多相同之处，这表明化合物Ⅲ的结构与Ⅰ、Ⅱ以及(a)非常相似，很可能也是一种麦角甾醇的衍生物，其结构的不同由官能团引起。化合物Ⅲ的C-6～和C-7化学位移值表明6，7位是双键，其C-3化学位移值与Ⅱ及(a)的C-3化学位移值相差很小，故Ⅲ的3 位碳也应是-OH(β)。其C-5和C-8化学位移值分别是76.08和73.23，也位于和羟基相连碳的化学位移范围，而且化合物Ⅲ的极性比Ⅰ和Ⅱ的明显要大，与一种麦角甾双烯三醇的极性很相近[2]，因此我们推测Ⅲ的C-5和C-8应是-OH。故化合物Ⅲ的结构可能是麦角甾-6，22-双烯3β，5，8-三醇(C28H46O3)，分子量是430。质谱在412(25%)和394(14%)出峰，这表明我们推测的结构是合理的，因为连有3 个羟基的甾醇在70 eV电子轰击下极易失去1 个H2O和2 个H2O。文献[1]指出(a)的熔点为178 ℃～180 ℃，文献[3]指出麦角甾-6，22-双烯-3α，5α，8α-三醇(b)的熔点为178 ℃～181 ℃。化合物Ⅲ的C-5和C-8化学位移值与(a)的C-5和C-8化学位移值不同，其熔点和(a)、(b)的熔点相差甚远，故化合物Ⅲ的5，8位羟基不应是α，文献[4]指出有一种麦角甾双烯三醇的熔点是241 ℃～242 ℃，文献[2]也指出，一种未定出构型，但可能是化合物(a)异构体的甾醇，熔点是257 ℃，这与化合物Ⅲ的熔点相近。综合以上分析，我们确定化合物Ⅲ的结构是麦角甾-6，22-双烯-3β，5β，8β-三醇(ergosta-6，22-dien-3β，5β，8β-triol，C28H46O3)。化合物Ⅰ～Ⅲ的结构式见图1。
, 百拇医药
图1 化合物Ⅰ～Ⅲ的化学结构式
表1 化合物Ⅰ～Ⅲ 的碳谱数据(CDCl3，TMS为内标) C-No.
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
C-No.
Ⅰ
Ⅱ
Ⅲ
1
39.19
37.05
, 百拇医药
38.93
15
23.09
23.48
22.87
2
32.07
30.14
30.41
16
28.36
28.71
27.89
, 百拇医药
3
70.54
66.46
67.41
17
55.85
56.29
55.96
4
37.12
34.79
36.99
18
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12.13
12.95
12.18
5
139.87
82.27
76.08
19
16.37
18.25
18.29
6
119.69
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135.29
143.43
20
40.87
39.78
40.36
7
116.39
130.70
117.67
21
21.20
20.96
, 百拇医药
21.02
8
141.41
79.52
73.23
22
135.65
135.53
135.43
9
46.36
51.19
43.12
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23
132.08
132.39
132.06
10
38.47
37.05
32.75
24
42.96
42.86
42.78
11
, 百拇医药
21.20
20.71
21.93
25
33.18
33.15
33.03
12
40.49
39.43
39.23
26
19.73
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19.72
19.55
13
42.92
44.65
43.62
27
20.03
20.03
19.85
14
54.65
51.77
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54.69
28
17.69
17.64
17.50
1 仪器和材料
X-4型显微熔点仪，未校正；HP5989A型质谱仪，70 eV，EI；IR-408型红外光谱仪；DPX300型核磁共振仪，氢谱300 MHz，碳谱75 MHz，TMS内标；硅胶H(10～40 μm)为青岛海洋化工厂产品。
实验采用的真菌样品由昆明植物研究所提供，上海有机化学研究所岳健民教授鉴定。
2 提取与分离
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将370 g干燥的褐圆孔牛肝菌切碎，用95%的工业酒精在70 ℃下抽提4 h，抽提液浓缩至粘稠状，再用乙酸乙酯在同样的温度下提取此粘稠状物3 h。乙酸乙酯抽提液浓缩后得到7 g褐圆孔牛肝菌的脂溶性部分。将这一脂溶性部分用硅胶H(10～40 μm)通过石油醚(60 ℃～90 ℃)-丙酮的梯度柱层析分离(80∶1～1∶2)，得到21个组分(组分1～21)。组分6 经浓缩蒸干得化合物Ⅰ(80 mg)，组分12 和组分20 经同样的处理分别得到化合物Ⅱ(40 mg)和化合物Ⅲ(12 mg)。将组分13～18合并、浓缩，再用硅胶H(10～40μm)通过石油醚-丙酮的梯度柱层析(15∶1～1∶1)得到6 个组分(组分1′～6′)。组分6′蒸去溶剂得化合物Ⅳ(8 mg)；将组分13～18合并、浓缩，也用硅胶H(10～40 μm)通过石油醚-丙酮的梯度柱层析(20∶1～3∶1)得4 个组分(组分1″～4″)。组分2″浓缩后得化合物Ⅴ(8 mg)；组分7～8合并、浓缩，用自制的制备性TLC，石油醚(60 ℃～90 ℃)-丙酮(2∶1)为展开剂分得化合物Ⅵ(60 mg)。
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3 鉴定
化合物Ⅰ：白色针晶，mp 153 ℃～155 ℃，其mp、IR、MS、1H，13CNMR光谱数据与文献[5，6]中的β-ergosterol的相应值完全一致，故鉴定化合物Ⅰ为β-ergosterol。
化合物Ⅱ：白色松针状结晶，mp 177 ℃～179 ℃，其mp、IR、MS、1H，13CNMR光谱数据与文献[7，8]中的5α，8α-epidioxyergosta-6，22-dien-3β-ol相应值完全一致，故鉴定化合物Ⅱ为5α，8α-epidioxyergosta-6，22-dien-3β-ol。
化合物Ⅲ：白色片状结晶；mp 245 ℃～249 ℃，Rf0.19(CHCl3，5%CH3OH)；MS (70 eV) m/z(%)：412[M-H2O]+(5)，394[M-H2O]+(3)，382(35)，378(87)，376(15)，364(10)，336(10)，312(4)，287(7)，268(38)，250(61)，241(17)，227(23)，215(22)，197(24)；13CNMR(CDCl3，TMS)见表1。
, 百拇医药
化合物Ⅳ：白色结晶，MS、1H，13CNMR数据与文献[9，10]报道一致，鉴定为Ⅳ为烟酸。
化合物Ⅴ：无色结晶，mp 128 ℃～133 ℃，MS、1H，13CNMR光谱数据与文献[11]报道一致，故鉴定Ⅴ为反式-肉桂酸。
化合物Ⅵ：淡黄色油状物，mp -3 ℃～-5 ℃。13CNMR数据与文献[12]报道的一致，鉴定Ⅵ为亚油酸。
Address: Wan Hui, College of Pharmaceutical Engineering, East Chi na University of Sciences and Technology, Shanghai
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参 考 文 献
1，Hou ZF, et al. Indian J of Chem,1997,36B:293
2，Heinz D, et al. Z Physiol Chem,1965,342(4):199
3，Irmscher K. Naturwissenchaften, 1960,47:425
4，Windaus A, et al. Ann,1930,481:119
5，Chiang H C, et al. J Chin Chem Soc, 1991,38:71
6，Robert J, et al. Organic Magnetic Resonance, 1976,8:308
, 百拇医药
7，Marina D G, et al. Gazzetta Chmica Italiana, 1990,120:391
8，Kirsti K, et al. Planta Med, 1989,55:389
9，Sadtler Research Laboratories INC. Sadtler Standard Carbon-13 NMR Spectra, vols.69-72,13806C
10，Sadtler Research Laboratories INC. Nuclear magnetic Resonance spectra, vols.22,14671M
11，Sadtler Research Laboratories INC. Sadtler Standard Carbon-13 NMR Spectra, vols.45-48,8955C
12，Sadtler Research Laboratories INC. Sadtler Standard Carbon-13 NMR Spectra, vols.49-52,9608C
(收稿1999-04-15), http://www.100md.com