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编号:10232671
冠状动脉内直接注射硝基甘油抑制PTCA术后血小板的活化
http://www.100md.com 《心脏杂志》 2000年第5期
     作者:马颖艳 贾国良 程何祥 郭文怡 李媛 李伟 王小燕

    单位:第四军医大学西京医院心内科,陕西 西安 710032

    关键词:血管成形术,经腔,经皮冠状动脉;血小板;血小板衍化生长因子;硝;基甘油;α-颗粒膜蛋白;血栓素B2;6-酮-前列腺素F

    心脏杂志000505摘要: 目的: 研究冠状动脉内直接注射硝基甘油抑制PTCA术后血小板的活 化。方法: 应用放 免法测定38例稳定心绞痛患者PTCA前后血小板膜表面α-颗粒膜蛋白(GMP-140)分子数和 血 浆血栓素B2(TxB2)、血浆6-酮-前列腺素F(6-Keto-PGF)浓度, 以及血小板衍化生长因子(PDGF)和血小板聚集 率。结果: 冠脉内直接注射硝基甘油的患者PTCA前后上述指标无明显变化,而 未用药的患 者PTCA术后5 min血小板膜表面GMP-140及血浆TxB2,PDGF和血小板聚集率均明显增高,术 后1 0 min达到高峰,30 min降至正常。结论: 冠脉内直接注射硝基甘油可以抑制PTC A术后血小板的活化。
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    中图分类号:R541.4 文献标识码:A

    文章编号:1005-3271(2000)05-0358-03

    Inhibition of direct intra-coronary injection of nitroglycerin on platelet acti vation after percutaneous transluminal coronary angioplasty

    MA Ying-yan JIA Guo-liang CHENG He-xiang GUO Wen-yi LI Yuan LI Wei WANG Xiao -yan

    (Department of Cardiology, Xijing Hospital, Fourth Military Medical University, X i'an Shaanxi 710032, China)
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    Abstract:AIM: To study effect of direct intra-coronary injection of nitr o glycerin on platelet activation after percutaneous transluminal coronary angiopl asty(PTCA). METHODS: Number of platelet α granule membrane protein- 140 (GMP-140) and plasma concentration of thromboxane B2 (TxB2) and 6-keto -prostaglandinF(6-keto-PGF) were determined by radioimmunoa ssay before and after PTCA in 38 patients with stable angina pectoris. Platelet derived growth factor(PDGF) and platelet aggregatio n rate were also determined. RESULTS: In patients without receiving nitroglycerin, platelet GMP-140,plasma concentration of TxB2, PDGF and plate let aggregation rate increased significantly 5 min after PTCA;which reached peak value t en min after PTCA and decreased to normal level 30 min after PTCA. But in patients having received direct intra-coronary injection of nitroglycerin, the s e values did not change before and after PTCA. CONCLUSION: Platelet ac tivation oc cures after PTCA,which can be inhibited by direct intra-coranary injection of n itroglycerin.
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    Key words: angioplasty,transluminal,percutaneous coronary ; nitro gl ycerin platelet α granule membrane protein-140; thromboxane B2;6-keto -prostaglandin F;platelet derived growth factor

    冠心病的介入疗法近年来日臻完善,但是经皮冠脉腔内成形术(PTCA)由于存在着急性血 管闭塞(2%~11%)和慢性再狭窄(30%~50%)而变得复杂。急性血管闭塞和慢性再狭窄(RS)的 病 理生理和防治措施的深入研究已成为介入性心脏病学领域中亟待解决的一大课题。作者已经 证实PTCA术后确实存在血小板的活化[1]. 为了探讨抑制术中血小板活化的方法,作 者通过术中直接冠脉内注射硝基甘油的方法,研究了冠心病患者PTCA前后血小板功能 的变化。
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    1 对象和方法

    1.1 研究对象 1996-02~05住院行PTCA的稳定型心绞痛患者38例,符 合1979年WHO的标准诊断[2],年龄38~69(56±5)岁,经冠状动脉造影证实狭窄程 度以直径法表示,至少有一处狭窄≥75%,除外高血压、糖尿病、肝肾功能不全及血液系 统疾 病患者,按照术中是否在冠状动脉内直接推注硝基甘油(0.1 mg)分为2组: 硝基甘油组(n =14)和未用硝基甘油组(n=24)。所有患者术前三天起给以阿斯匹林0.3 g每日1次口服, 同时给以硝酸盐制剂和钙拮抗剂口服扩冠治疗。

    1.2 方法

    1.2.1 取血方法 在PTCA进行前,整个PTCA手术结束后1,5,10,30 min 由冠状静脉窦采取血样,将开始采集2 ml血弃去,然后采血8ml,缓慢注入备有20 g/L EDTA- Na2的塑料试管中(1∶9)抗凝,小心混匀。
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    1.2.2 实验指标与检测方法 ①血小板膜表面α-颗粒膜蛋白(GMP-140)分子数:按照文献 [3]测定;②血浆血栓素B2 (TxB2), 6-酮-前列腺素F(PGF 1α): 采用放射免疫法测定[4],作为判断TxA2,PGI2含量的指标。③血小 板聚集功能的测定: 取血3 ml按9∶1的比例与38 g/L枸橼酸钠溶液混合抗凝,以ADP(10 U)为 致聚剂,采用TYXY-91智能血凝仪描记血小板聚集曲线,测最大聚集率(MPAR)用(%)表示,同时 常规测定血小板数。④血小板衍化生长因子(PDGF)的测定,采用生物活性法按照文献[5 ]进行测定, 为减少误差,每份标本均测定复管。放免测定药盒均由苏州医学院血栓与止 血研究室提供。

    1.3 统计学分析 数据以+s表示,采取配对t检验。
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    2 结果

    GMP-140,TxB2,PGF及TxB2/PGF比值,血小板聚集功能以及PDGF的变 化:术前两组患者 测值无明显变化(P>0.05)。术后冠脉内对照组血小板膜表面GMP-140,TxB2,血小板聚 集功能 以及PDGF变化一致均明显增高,5 min开始升高, 10 min达峰值,30 min降至术前水平,说明血 小 板的功能被明显激活(表 1),而冠脉内注射硝基甘油的患者术后上述指标略有升高,但无 显著差别(表2)。

    表 1 单纯PTCA对照组血小板功能的变化(n=24,±s) 观测指标

    术前

, http://www.100md.com     术后5 min

    术后10 min

    术后30 min

    GMP-140(M/pit)

    843±298

    1123±415a

    1241±463

    864±314

    TxB2(ng/L)

    161±27

    245±31a
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    318±70b

    180±50

    6酮PGF(μg/L)

    26±4

    22±4

    26±4

    27±5

    PDGF(U/ml)

    131±39

    303±79a

    359±64a
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    409±43b

    血小板聚集率(%)

    36±8

    49±11a

    67±14a

    35±7

    与术前比较,aP<0.05,bP<0.01。 GMP-140: 血小板膜表面α-颗粒膜蛋白,TxB2: 血浆血栓素B2, PGF: 6-酮 -前列腺素F, PDGF: 血小板衍化生长因子。表 2 冠脉内用硝基甘油的患者血小板各项指标的变化(n=24, ±s) 观测指标
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    术 前

    术后5 min

    术后10 min

    术后30 min

    GMP-140(M/pit)

    838±256

    867±169

    883±236

    875±24 3

    TxB2(ng/L)

    159±25

    164±24
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    179±20

    185±21

    6酮PGF(μg/L)

    26±4

    25±4

    26±5

    28±5

    PDGF(U/ml)

    145±32

    139±33

    153±41

    148±37
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    血小板聚集率(%)

    35±8

    35±8

    35±7

    38±9

    3 讨论

    稳定型心绞痛患者进行PTCA手术后其冠状循环中血小板被明显激活,血小板膜表面GM P-140的含量及血浆中TxB2的含量以及PDGF在术后5 min时出现升高,10 min时均达到峰值 (P <0. 01),30 min后降至正常,这与Langford等[6]的研究不太一致,但变化趋势一致,差 异可能 是所检测 的指标及实验方法的不同。GMP-140是一种血小板膜糖蛋白,位于α-颗粒膜上,正常时不在 血 小板表面表达,只表达在活化的血小板表面,成为目前最具特异性的血小板活化的分子标志物 ,且在启动和扩大血栓形成中具有重要意义[7]。PTCA后GMP-140动态的变化提示在 PTCA术后 短暂的时间内存在着较强的血小板活化,这可能是PTCA中膨胀的球囊阻断血流、冠脉内膜机 械性撕裂、粥样斑块挤压破裂等诸多因素诱发血小板聚集、活化,即使术前及术中已给足够 剂量的抗凝治疗,仍阻止不了这种变化。 PDGF是一种促进平滑肌细胞生长的因子,对平滑肌 具 有致有丝分裂和化学吸引两种特性,损伤的血管内皮及活化的血小板均可释放PDGF,冠脉内支 架安置术后PDGF持续升高,可能是这两种因素共同作用的结果,PDGF仅作用于受损的血管内膜 ,使平滑肌细胞从抑制状态转变为活化状态,促进血管平滑肌细胞增殖,我们的研究结果是冠 心病患者PTCA术后冠脉循环中PDGF含量显著增加。
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    血小板血栓形成是PTCA后急性血管闭塞的主要原因之一,而且活化的血小板通过其释放产物 包括PDGF、转化因子、5-羟色胺等,可加重对内皮细胞的破坏作用,促进平滑肌细胞的过度 增 殖、迁移,在PTCA慢性再狭窄中的作用已经在动物实验中得到了证实[8]。除此之外 ,PTCA手 术中,内皮的丢失、损伤减少了前列腺素(PGI2)的内皮源性血管舒张因子(EDRF)的保护作 用, 本研究显示PTCA术后血浆中6-酮-PGF曾呈一过性的下降,术后TxB2/6-酮-PG F的比值较术前明显提高,TxB2/PGI2比例失衡的结果减少了冠脉血流量,影响 心肌功能恢复促进血小板 聚集,增加血小板分泌因子的释放,直接促进血管平滑肌细胞的增殖,影响冠状动脉再通,增加 PTCA术后冠状动脉急性再闭塞和慢性再狭窄的发生率。

    冠脉内注入0.1 mg硝基甘油的心绞痛患者,其术后血小板膜表面GMP-140、血浆TxB 2,血小 板聚集率以及PDGF手术前后无明显增加,这可能是由于硝基甘油补充了内皮源性血管舒张因 子EDRF即NO,释放到血液中去的NO可激活血小板内的鸟苷酸环化酶,使其在扩张冠脉的同时, 能够抑制血小板的黏附和聚集,抵御血小板的激活。由于硝酸盐制剂可以引起低血压,妨碍了 其在补充外源性NO中的作用。寻找一种NO供体的药物,既可以拮抗血小板的活化、扩张冠脉 同时又可以避免低血压已成为临床的迫切需要。
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    作者的研究采用冠状静脉窦中直接取血的方法,较以往采集周围静脉血进行血小板功 能 变化的研究,两者有着本质的不同,这也不难理解以往的研究通过检测周围静脉血的变化并未 发现血小板的活化,这不能反映冠状循环的真面貌。冠状静脉窦中直接取血反映的是PTCA后 冠状循环中的缺血性反应,在PTCA前后研究冠状循环中血小板功能变化中有重要意义。

    参考文献:

    [1] 马颖艳 贾国良 郑昌柱,等,经皮冠状动脉腔内成形术前后血小板功能及前列 腺素水平的变化及其临床意义[J]. 中华心血管病杂志, 1999,27(1):33.

    [2] Nomenclature and criteria for diagnosis of ischemic heart disease. Report of the joint international society and Federation of Cardiology/World heart organi zation task force on standardization of clinical nomenclature[J]. Circulatio n, 1979,59(3):607.
, 百拇医药
    [3] 吴国新,李健勇,李佩霞,等. 血小板表面及血浆内α-颗粒膜蛋白的放射免疫测定[J ]. 中华血液学杂志 1992,13( 1):99.

    [4] 李振甲. 实用放射免疫学[M].北京:科学技术文献出版社,1989.198~221.

    [5] Heldin CH. Platelet-derived growth factor isolation by a large-scale p rocedure and analysis of subunit composition[J]. Biochme J, 1981, 193(3):9 07.

    [6] Langford EJ, Brown AS, Wainurig RJ, et al. Inhibition of platelet acti vity by s-nitrosoglutathione daring coronary angioplasty[J]. Lancet, 1994,344(8935):1458.
, 百拇医药
    [7] Stenbery PE, Mcever RP, Shuman MA, et al. A platelet alpha-gr anule membrane pr otein(GMP-140) is expressed on the plasma after activation[J]. J Cell Biolo gy. 1985,101(3):880.

    [8]Hanke H, Strohschneider T, Oberhoff M, et al. Time course of smoot h muscle c ell proliferation in the intima and media of arteries following experimental ang ioplasty[J]. Circ Res, 1990,67(3):651.

    收稿 1999-10-25

    修回 2000-03-01, 百拇医药