一种简单、高效的小分子量DNA沉淀法
作者：李小兵 曹廷兵 彭家和 叶治家
单位：李小兵(第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室，重庆 400038)；曹廷兵(第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室，重庆 400038)；彭家和(第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室，重庆 400038)；叶治家(第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室，重庆 400038)
关键词：DNA；沉淀法
第三军医大学学报000639
中图法分类号： R342.3 文献标识码： B
文章编号：1000-5404(2000)06-0584-01
A simple and efficient method of DNA Extraction
沉淀是浓缩核酸最常用的方法。通过核酸沉淀可以改变核酸的溶解缓冲液，重新调节核酸在溶液中的浓度，还可以去除溶液中某些盐离子与杂质，达到纯化核酸的目的[1]。
大分子量核酸样品的沉淀方法很多，操作简单、效果比较好。而小分子量DNA(特别<50 bp的寡聚核苷酸)的沉淀方法往往依赖于高速或超速冷冻离心机，且操作步骤繁锁，一般实验室难以满足实验条件[2]。本文介绍一种简单、有效的小分子量DNA沉淀方法-ZnCl2沉淀法，具体操作步骤如下：①准确测量DNA样品的体积；②加入0.05倍DNA样品体积的1 mol/L Tris.HCl(pH7.0)及0.01倍DNA样品体积的10 mmol/L EDTA(pH 8.0)，混匀；③加入0.01倍DNA样品体积的10 mmol/L磷酸纳缓冲液(pH 7.0)，混匀；④加入0.025倍DNA样品体积的0.1 mol/L ZnCl2(pH 3.0)，混匀；⑤室温放置30 min；⑥12 000 r/min，室温，离心15 min；⑦小心移去上清；⑧70%乙醇漂洗沉淀，12 000 r/min，离心5 min，弃上清；⑨重复步骤(8)1次；B10待乙醇挥发完全后，将样品溶于一定体积的TE(pH 8.0)中，备用。
该方法无需特殊仪器、试剂，操作简单、迅速。沉淀效果好，样品DNA浓度下限可达0.1 μg/ml。
作者简介：李小兵(1971-)，男，四川省广安县人，助理实验师，主要从事分子生物学技术方面的研究，电话：(023)68752924
参考文献：
[1] Ausubel F M, Roger Brent, King Ston R, et al. Short Protocouls in Molecular Biology[M]. Boston: John Wiley of Sons Inc,1995.3,31,33,35.
[2] Eduard K. DNA Extraction by Zinc[J]. Nucleic Acuds Res,1997,25(10):1 870-1 871.
收稿日期：1999-11-23；修回日期：2000-04-15, http://www.100md.com
单位：李小兵(第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室，重庆 400038)；曹廷兵(第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室，重庆 400038)；彭家和(第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室，重庆 400038)；叶治家(第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室，重庆 400038)
关键词：DNA；沉淀法
第三军医大学学报000639
中图法分类号： R342.3 文献标识码： B
文章编号：1000-5404(2000)06-0584-01
A simple and efficient method of DNA Extraction
沉淀是浓缩核酸最常用的方法。通过核酸沉淀可以改变核酸的溶解缓冲液，重新调节核酸在溶液中的浓度，还可以去除溶液中某些盐离子与杂质，达到纯化核酸的目的[1]。
大分子量核酸样品的沉淀方法很多，操作简单、效果比较好。而小分子量DNA(特别<50 bp的寡聚核苷酸)的沉淀方法往往依赖于高速或超速冷冻离心机，且操作步骤繁锁，一般实验室难以满足实验条件[2]。本文介绍一种简单、有效的小分子量DNA沉淀方法-ZnCl2沉淀法，具体操作步骤如下：①准确测量DNA样品的体积；②加入0.05倍DNA样品体积的1 mol/L Tris.HCl(pH7.0)及0.01倍DNA样品体积的10 mmol/L EDTA(pH 8.0)，混匀；③加入0.01倍DNA样品体积的10 mmol/L磷酸纳缓冲液(pH 7.0)，混匀；④加入0.025倍DNA样品体积的0.1 mol/L ZnCl2(pH 3.0)，混匀；⑤室温放置30 min；⑥12 000 r/min，室温，离心15 min；⑦小心移去上清；⑧70%乙醇漂洗沉淀，12 000 r/min，离心5 min，弃上清；⑨重复步骤(8)1次；B10待乙醇挥发完全后，将样品溶于一定体积的TE(pH 8.0)中，备用。
该方法无需特殊仪器、试剂，操作简单、迅速。沉淀效果好，样品DNA浓度下限可达0.1 μg/ml。
作者简介：李小兵(1971-)，男，四川省广安县人，助理实验师，主要从事分子生物学技术方面的研究，电话：(023)68752924
参考文献：
[1] Ausubel F M, Roger Brent, King Ston R, et al. Short Protocouls in Molecular Biology[M]. Boston: John Wiley of Sons Inc,1995.3,31,33,35.
[2] Eduard K. DNA Extraction by Zinc[J]. Nucleic Acuds Res,1997,25(10):1 870-1 871.
收稿日期：1999-11-23；修回日期：2000-04-15, http://www.100md.com