硫酸核糖霉素注射液含量测定方法研究
作者：房宇辉 王淑杰 宫长鹏
单位：内蒙古自治区拜泉县药品检验所 164700
关键词：
首都医药000623 硫酸核糖霉素是氨基糖甙类抗生素，目前部颁标准，采用微生物法测定其含量〔1〕，该方法比较费时，不便于生产过程中的质量控制和医院药房的快速检验。
1 仪器与试剂：
日本岛津UV-210A型分光光度计
核糖霉素标准品由上海市药品检验所提供，批号：870811-1效价673μ/mg。
硫酸核糖霉素注射液由齐齐哈尔第二制药厂生产
, 百拇医药
磷酸氢二纳，磷酸二氢钠， 乙酰丙酮，甲醛均为分析纯。
2 实验条件的确定
精密称取核糖霉素标准品(真空干燥3小时)约22.5mg，溶于50ml容量瓶中，按正交实验设计法〔2〕，以四因素四水平确定乙酰丙酮的用量，反应时间，pH值，甲醛用量，以回收率指标进行实验。
2.1 吸收光谱的描绘
精密称取核糖霉素标准品(真空干燥3小时)约22.5mg，溶于50ml容量瓶中，用pH8.0磷酸盐缓冲液定容，以下操作同绘制标准曲线，于400～200mm波长范围内扫描。描绘吸收光谱由图可见核糖霉素衍生物在294±1nm处有明显吸收峰。
图1：核糖霉素衍生物紫外吸收光谱
, 百拇医药
2.2 稳定性实验：
本品10μ/ml反应液5份分别在294±1mm波长处进行测定，吸收度平均值为0.8058，标准误差为0.001，结果重现性良好，符合L-β定律
3 测定方法
3.1 绘制标准曲线：
精密称取真空干燥3小时后的核糖霉素标准品22.5mg，置50ml容量瓶中，用PH8.0磷酸盐缓冲液配制成300μ/ml的核糖霉素溶液，精密量取0.5ml，1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml分别置于50ml容量瓶中，均加入2%乙酰丙酮——甲醛溶液3.0ml，以2%乙酰丙酮——甲醛溶液3.0ml作空白校正，在沸水浴上加热30分钟使其反应，自然冷至室温，用磷酸盐缓蚀液容至刻度，置1cm石英池中在294±1mm波长处依次测定吸收度，并绘制标准曲线(见图2)，按最小二乘法计算回归方程：A(μ/mg)＝0.06373+0.07483*C，r＝0.99689，核糖霉素在3.34～15.35μ/ml浓度范围内呈线性。
, http://www.100md.com
图2 核糖霉素衍生物标准曲线
3.2 回收率实验：
按注射用硫酸核糖霉素处方制备模拟溶液，再按上述绘制标准曲线步骤方法操作，按回归方程计算回收率，测定四次，平均回收率为98.59%，CV＝0.443%。
3.3 样品测定
精取核糖霉素注射液，先用磷酸盐缓冲液稀释成200μ/ml，按前法进行操作，制得含核糖霉素10μ/ml反应液，测定吸收度，与按回归方程计算其含量并与微生物法测得结果比较，经统计学计算，如表1
表1 微生物法与本法测定结果比较 批 号
微生物法n＝3
(标示量%)
, 百拇医药
本法n=3
(标示量%)
t检验
9102021
100.8
99.06
P>0.05
9102022
100.6
100.13
两法测定的结果
9102023
, 百拇医药 98.75
99.33
无显著差异
4 讨论
实验结果表明，两法测定结果经统计学处理，差别无显著意义(P>0.05)能较直观地反映核糖霉素的效价，由此可见，用紫外分光光度法测定核糖霉素制剂的含量具有操作简便，快速准确，灵敏度高等优点，特别适用于生产单位的快速质量控制，具有很大的实用性。
参考文献
1，中华人民共和国卫生部药品标准，抗生素药品.1989
2，陈家鼎等.概率统计学讲义.1982
(2000-05-16 收稿), http://www.100md.com
单位：内蒙古自治区拜泉县药品检验所 164700
关键词：
首都医药000623 硫酸核糖霉素是氨基糖甙类抗生素，目前部颁标准，采用微生物法测定其含量〔1〕，该方法比较费时，不便于生产过程中的质量控制和医院药房的快速检验。
1 仪器与试剂：
日本岛津UV-210A型分光光度计
核糖霉素标准品由上海市药品检验所提供，批号：870811-1效价673μ/mg。
硫酸核糖霉素注射液由齐齐哈尔第二制药厂生产
, 百拇医药
磷酸氢二纳，磷酸二氢钠， 乙酰丙酮，甲醛均为分析纯。
2 实验条件的确定
精密称取核糖霉素标准品(真空干燥3小时)约22.5mg，溶于50ml容量瓶中，按正交实验设计法〔2〕，以四因素四水平确定乙酰丙酮的用量，反应时间，pH值，甲醛用量，以回收率指标进行实验。
2.1 吸收光谱的描绘
精密称取核糖霉素标准品(真空干燥3小时)约22.5mg，溶于50ml容量瓶中，用pH8.0磷酸盐缓冲液定容，以下操作同绘制标准曲线，于400～200mm波长范围内扫描。描绘吸收光谱由图可见核糖霉素衍生物在294±1nm处有明显吸收峰。
图1：核糖霉素衍生物紫外吸收光谱
, 百拇医药
2.2 稳定性实验：
本品10μ/ml反应液5份分别在294±1mm波长处进行测定，吸收度平均值为0.8058，标准误差为0.001，结果重现性良好，符合L-β定律
3 测定方法
3.1 绘制标准曲线：
精密称取真空干燥3小时后的核糖霉素标准品22.5mg，置50ml容量瓶中，用PH8.0磷酸盐缓冲液配制成300μ/ml的核糖霉素溶液，精密量取0.5ml，1.0ml、1.5ml、2.0ml、2.5ml分别置于50ml容量瓶中，均加入2%乙酰丙酮——甲醛溶液3.0ml，以2%乙酰丙酮——甲醛溶液3.0ml作空白校正，在沸水浴上加热30分钟使其反应，自然冷至室温，用磷酸盐缓蚀液容至刻度，置1cm石英池中在294±1mm波长处依次测定吸收度，并绘制标准曲线(见图2)，按最小二乘法计算回归方程：A(μ/mg)＝0.06373+0.07483*C，r＝0.99689，核糖霉素在3.34～15.35μ/ml浓度范围内呈线性。
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图2 核糖霉素衍生物标准曲线
3.2 回收率实验：
按注射用硫酸核糖霉素处方制备模拟溶液，再按上述绘制标准曲线步骤方法操作，按回归方程计算回收率，测定四次，平均回收率为98.59%，CV＝0.443%。
3.3 样品测定
精取核糖霉素注射液，先用磷酸盐缓冲液稀释成200μ/ml，按前法进行操作，制得含核糖霉素10μ/ml反应液，测定吸收度，与按回归方程计算其含量并与微生物法测得结果比较，经统计学计算，如表1
表1 微生物法与本法测定结果比较 批 号
微生物法n＝3
(标示量%)
, 百拇医药
本法n=3
(标示量%)
t检验
9102021
100.8
99.06
P>0.05
9102022
100.6
100.13
两法测定的结果
9102023
, 百拇医药 98.75
99.33
无显著差异
4 讨论
实验结果表明，两法测定结果经统计学处理，差别无显著意义(P>0.05)能较直观地反映核糖霉素的效价，由此可见，用紫外分光光度法测定核糖霉素制剂的含量具有操作简便，快速准确，灵敏度高等优点，特别适用于生产单位的快速质量控制，具有很大的实用性。
参考文献
1，中华人民共和国卫生部药品标准，抗生素药品.1989
2，陈家鼎等.概率统计学讲义.1982
(2000-05-16 收稿), http://www.100md.com