透析膜和内毒素对尿毒症患者外周血单个核细胞白细胞介素1受体拮抗物产生的协同作用
作者：丁峰 顾勇 薛骏 郑秀娟 秦慧莲 赵涵芳
单位：丁峰(200040 上海医科大学华山医院肾脏科)；顾勇(200040 上海医科大学华山医院肾脏科)；薛骏(200040 上海医科大学华山医院肾脏科)；郑秀娟(基础医学院免疫学教研室)；秦慧莲(基础医学院免疫学教研室)；赵涵芳(生物化学教研室分子生物学实验室)
关键词：
中华肾脏病杂志000615 血液透析(血透)过程中患者血液与异己材料接触后导致血液中白细胞的激活，其产生的前炎症性细胞因子和透析患者的急、慢性并发症密切相关。有研究显示，白介素-1受体拮抗物(IL-1Ra)在反映机体炎症反应方面较为敏感[1]。因此，我们采用细胞培养和原位杂交等技术观察不同条件下正常人和尿毒症患者外周血单个核细胞(PBMC)IL-1Ra的mRNA转录和蛋白质合成情况，以了解透析膜和内毒素在PBMC激活中的作用，为将来超净水透析的临床应用提供理论依据。
一、材料和方法
1.研究对象：血透组患者9例，其中男性6例，女性3例，平均年龄48.4岁；CAPD组患者9例，其中男性7例，女性2例，平均年龄51.2岁。上述患者均除外近1个月内有急性感染、输血、慢性感染、活动性自身免疫性疾病、服用免疫抑制剂和恶性肿瘤等情况。血透患者均采用碳酸氢盐透析液及复用的聚砜膜透析器。正常对照组10例，为年龄、性别匹配的本透析中心健康工作人员。
2.全血孵育和PBMC分离：肝素化全血在硅化试管内分别和20 ng/ml内毒素、2 cm长铜仿膜、1 cm长聚砜膜在300 r/min的37℃恒温水平摇床上共同孵育2 h，对照组为未加任何刺激物全血。用淋巴细胞分离液分离PBMC，生理盐水洗涤2次后采样作瑞氏染色。上述及以下实验中所有试剂均采用聚砜膜滤器(F40，Fresenius AG，德国)进行超滤以去除内毒素成份。……
参考文献：
[1]Pereira B,Poutsiaka D,King A,et al.In vitro production of interleukin-1 reccptor antagonist in chronic renal failure,CAPD and HD.Kidney Int,1992.42:1419-1424.
[2]Lonnemann G.Dialysate bacteriological quality and the permeability of dialyzer membranes to pyrogens.Kidney Int,1993,43 Suppl 41:S195-S200.
[3]Schindler R,Lonnemann G,Shaldon S,et al.Transcription,not synthesis,of interleukin-1 and tumor necrosis factor by complement.Kidney Int,1990,37:85-93.
收稿日期：2000-03-21, 百拇医药
单位：丁峰(200040 上海医科大学华山医院肾脏科)；顾勇(200040 上海医科大学华山医院肾脏科)；薛骏(200040 上海医科大学华山医院肾脏科)；郑秀娟(基础医学院免疫学教研室)；秦慧莲(基础医学院免疫学教研室)；赵涵芳(生物化学教研室分子生物学实验室)
关键词：
中华肾脏病杂志000615 血液透析(血透)过程中患者血液与异己材料接触后导致血液中白细胞的激活，其产生的前炎症性细胞因子和透析患者的急、慢性并发症密切相关。有研究显示，白介素-1受体拮抗物(IL-1Ra)在反映机体炎症反应方面较为敏感[1]。因此，我们采用细胞培养和原位杂交等技术观察不同条件下正常人和尿毒症患者外周血单个核细胞(PBMC)IL-1Ra的mRNA转录和蛋白质合成情况，以了解透析膜和内毒素在PBMC激活中的作用，为将来超净水透析的临床应用提供理论依据。
一、材料和方法
1.研究对象：血透组患者9例，其中男性6例，女性3例，平均年龄48.4岁；CAPD组患者9例，其中男性7例，女性2例，平均年龄51.2岁。上述患者均除外近1个月内有急性感染、输血、慢性感染、活动性自身免疫性疾病、服用免疫抑制剂和恶性肿瘤等情况。血透患者均采用碳酸氢盐透析液及复用的聚砜膜透析器。正常对照组10例，为年龄、性别匹配的本透析中心健康工作人员。
2.全血孵育和PBMC分离：肝素化全血在硅化试管内分别和20 ng/ml内毒素、2 cm长铜仿膜、1 cm长聚砜膜在300 r/min的37℃恒温水平摇床上共同孵育2 h，对照组为未加任何刺激物全血。用淋巴细胞分离液分离PBMC，生理盐水洗涤2次后采样作瑞氏染色。上述及以下实验中所有试剂均采用聚砜膜滤器(F40，Fresenius AG，德国)进行超滤以去除内毒素成份。……
参考文献：
[1]Pereira B,Poutsiaka D,King A,et al.In vitro production of interleukin-1 reccptor antagonist in chronic renal failure,CAPD and HD.Kidney Int,1992.42:1419-1424.
[2]Lonnemann G.Dialysate bacteriological quality and the permeability of dialyzer membranes to pyrogens.Kidney Int,1993,43 Suppl 41:S195-S200.
[3]Schindler R,Lonnemann G,Shaldon S,et al.Transcription,not synthesis,of interleukin-1 and tumor necrosis factor by complement.Kidney Int,1990,37:85-93.
收稿日期：2000-03-21, 百拇医药