原发性高血压患者血浆甲状旁腺高血压因子的变化
作者：张世联 王薇 朱文萍 胡晓东 赵睿珊
单位：河北省医学科学院生化研究室，石家庄，050021
关键词：甲状旁腺高血压因子；原发性高血压
临床心血管病杂志000604 摘要 目的：观察原发性高血压(EH)患者血浆甲状旁腺高血压因子(PHF)活性的变化。方法：采用生物活性测定方法，检测了31例EH患者(EH组)和33例正常人(对照组)血浆中PHF活性。结果：EH组血PHF平均活性显著高于对照组(P<0.05～0.01)，其升压模式与自发性高血压大鼠血PHF活性相似。结论：检测PHF对研究EH病因以及采取有效治疗措施具有重要意义。
Study on parathyroid hypertensive factor of
essential hypertensive patients
, 百拇医药
ZHANG Shi-lian WANG Wei ZHU Wen-ping HU Xiao-dong ZHAO Rui-shan
(Department of Biochemistry,Hebei Academy of Medical Science,Shijiazhuang 050021)
Abstract Objective:To study the parathyroid hypertensive factor (PHF) activity in the plasma of essential hypertensive(EH) patients. Method:The activities of PHF in plasma of 31 EH patients and 33 healthy controls were measured by bioassay. Result:The mean PHF level in 32 EH patients was higher than the healthy control group (P<0.05～0.01). The model of raising blood pressure with dialyzed plasma of EH patients was similar with the PHF in SHR.Conclusion:Part of hypertensive patients has abnormal PHF activity.
, 百拇医药
Key words Parathyroid hypertensive factor Essential hypertension
甲状旁腺高血压因子(PHF)为一种钙调因子，是近年来新发现的一种致高血压因子〔1〕。PHF的分泌与体内钙的关系同其他内分泌组织不同，钙可刺激大多数内分泌腺的分泌，而对PHF的分泌是抑制作用，这一发现解释了高钙饮食和钙通道阻断剂均可有效地降低血压这一矛盾现象〔2～4〕。为了解原发性高血压(EH)患者血浆PHF活性情况，以便临床采取有效的治疗方案，本文对此进行了观察。
1 对象与方法
1.1 对象
EH组：符合WHO诊断标准的门诊EH患者，无心、肾、肝等器质性病变。共31例，男15例，女16例，平均年龄(55.2±11.3)岁。全部病例检测前未使用胰岛素及钙离子拮抗剂。
, 百拇医药
对照组：来源于健康体检人群，33例，男18例，女15例，平均年龄(49.8±10.4)岁。
实验动物：自发性高血压大鼠(SHR)，一级动物，购自北京阜外医院实验动物中心。SD大鼠，一级动物，购自河北省医学科学院实验动物中心。
1.2 方法
分别取EH患者和正常人的空腹静脉血，肝素
抗凝，离心分离血浆，用能透过分子量为1 000 Da的透析膜将每份血浆在4℃下透析24 h,得到部分纯化的PHF, 将其置于-20℃冰箱保存,以备PHF生物活性测定。选用300 g左右雄性SD大鼠腹腔注射戊巴比妥钠(50 mg/kg)麻醉，麻醉后剥离一侧颈动脉做动脉插管，连接血压传感器测血压，当大鼠血压持续平稳15 min后，自股静脉注入上述透析好的PHF血浆1.0 ml，记录注射前和注射后10、20、30、40、45、50、60、70、80和90 min的平均动脉压(MAP)，以血压升高9.75 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)以上为PHF阳性。
, 百拇医药
1.3 统计学处理
计量资料均用
±s表示，显著性检验用t检验；计数资料用χ2检验。
2 结果
2.1 EH患者血浆PHF生物活性
由表1可见，将透析的31例EH患者血浆分别注入SD大鼠后，刺激血压平均增高值在40 min时与注射前比较明显升高(P<0.01),45 min达高峰(P<0.01),60 min恢复到基础水平。而对照组刺激血压增高峰值仅为(1.07±9.00 )mmHg，与注射前比较无差别，表明EH患者血中存有高水平的PHF。
表1 EH患者血浆PHF对SD大鼠血压变化值的影响mmHg，±s
, 百拇医药
EH组(31例)
对照组(33例)
PHF注射前基础
MAP变化值
0
0
PHF注射后(min)
10
0.32±10.16
-0.54±11.42
20
-0.08±13.37
, 百拇医药
-1.22±10.69
30
1.61±9.62
-2.12±10.62
40
7.73±12.712)
-1.37±10.11
45
8.54±14.672)
1.07±9.00
50
, http://www.100md.com 7.26±15.901)
-0.61±11.10
60
0.87±16.03
-4.25±13.88
70
-2.08±13.07
-3.79±15.00
80
-4.99±13.58
-5.62±16.97
90
, http://www.100md.com
-6.46±14.78
-7.88±18.68
表中数据为注射透析血浆后大鼠血压的变化值；与注射前基础MAP变化值比较1)P<0.05，2)P<0.012.2 EH患者中PHF阳性率
31例EH患者的血浆，有19例可明显提高SD大鼠的血压，阳性率为61.3%。而对照组阳性率为30.3%(10/33例)。两组比较有显著性差异(χ2=6.19，P<0.05)。表明EH患者血浆高水平PHF人群比例显著高于对照组。
2.3 EH患者血浆PHF升压效应时程
给SD大鼠注射SHR透析血浆后，MAP于45 min达高峰，60 min恢复到基础血压水平。EH患者40 min明显升高，45 min达高峰，60 min恢复到注射前水平。可见EH患者血浆中的PHF升压模式与SHR的相似。
, 百拇医药
3 讨论
PHF首先发现于SHR的血浆中，其特点为具有延迟性升压作用，即给SD大鼠注入PHF后45 min左右产生升压高峰，且同时与细胞内Ca2+摄取增加相一致〔5〕，目前尚未建立更简便的测定方法，只能靠测定其生物活性确定。我们曾检测PHF对鼠尾动脉细胞Ca2+摄取〔6〕，结果符合上述特征，从本实验结果也可见EH患者血浆中PHF升压模式与SHR透析血浆相似，表明实验中患者透析血浆对大鼠的升压活性为PHF作用，并非其他升压物质。
关于PHF的延迟性升压模式，主要依赖跨膜信息传递速度。cAMP有舒张血管的作用〔7〕，推测PHF的作用造成胞内cAMP含量减少。已知磷酸二酯酶(PDE)可分解cAMP，而腺苷酸环化酶可产生cAMP。用PDE抑制剂茶碱可抑制PHF诱发的延迟血压效应，提示PHF效应可能与PDE的活化相关。但产生升压效应的确切机制有待进一步的研究。
, 百拇医药
本文资料显示，透析的EH患者血浆注入SD大鼠后可出现明显延迟性增高血压，其中有61.3%EH患者血浆存有高水平PHF因子，而对照组仅有30.3%，两组有显著性差异，说明部分EH患者存有高水平的PHF。实验中也观察到正常人有30% PHF阳性，我们认为其中部分阳性是由于在SD大鼠麻醉过程中的不稳定以及周围环境等因素造成的假阳性，或者预示将来有发生高血压的危险。
我们已知体内有许多可引起细胞内Ca2+升高因子，但尚未找到EH患者细胞内长期持续高Ca2+水平的诱因。PHF具有作用强度高、持续时间长的特点，本实验结果表明部分EH患者存有高水平的PHF，预示PHF可能在造成长期细胞内高浓度钙方面起作用，是一种重要的致病因子。临床上通过对PHF水平的检测可采取更有效的治疗方案，如对PHF水平高的患者可用钙通道拮抗剂、硝苯吡啶或异博定等阻断PHF促进Ca2+细胞内流作用。另外服用钙剂可通过抑制PHF的分泌而起作用；而对低水平或无PHF患者采用受体阻断剂和血管紧张素转换酶抑制剂效果较好〔8〕。
, 百拇医药
河北省重点医学科研课题(No.98027)
参考文献
1，Pang P K T,Lewanczuk R Z.Parathyroid origin of a new circulating hypertensive factor in spontaneously hypertensive rats.Am J Hypertens,1989,2:898～902
2，Lewanczuk R Z,Benishin C G,Pang P K T.The effect of calcium and calcium channel blocker combinations on blood pressure in spontaneously hypertensive rats.J Vasc Med Biol,1991,3:329～331
, http://www.100md.com
3，Lewnczuk R Z,Chen A,Pang P K T.The dietary calcium on blood pressure in spontaneously hypertensive rats may be mediated by parathyroid hypertensive factor.Am J Hypertens,1990,3:349～353
4，Bravo E L,Kageyama Y.Dietary calcium supplementation prevents the development of hypertension in deoxycorticosterone-salt-treated dogs.J Cardiovasc Pharmacol,1994,23(Suppl 2):27～30
5，Lewanczuk R Z,Wang J,Zhang Z R,et al.Effects of spontaneously hypertensive rat plasma on blood pressure and tail artery calcium uptake in normotensive rats.Am J Hypertens,1989,2:26～31
, http://www.100md.com
6，赵睿珊，王辅才，朱文萍，等.原发性高血压患者血浆中甲状旁腺高血压因子对细胞钙通道的作用.高血压杂志 , 1996,4：182～184
7，Schaub M C,Kunz B. Regulation of contraction in cardiac and smooth muscle. J Cardiovasc Pharmacol ,1986,8(Suppl 8):117～123
8，Lewanczuk R Z,Hamilton P G.Parathyroid hypertensive factor predicts efficacy in the treatment of essential hypertension with verapamil.Blood Press, 1996,5:98～104
收稿 1999-08-25, 百拇医药
单位：河北省医学科学院生化研究室，石家庄，050021
关键词：甲状旁腺高血压因子；原发性高血压
临床心血管病杂志000604 摘要 目的：观察原发性高血压(EH)患者血浆甲状旁腺高血压因子(PHF)活性的变化。方法：采用生物活性测定方法，检测了31例EH患者(EH组)和33例正常人(对照组)血浆中PHF活性。结果：EH组血PHF平均活性显著高于对照组(P<0.05～0.01)，其升压模式与自发性高血压大鼠血PHF活性相似。结论：检测PHF对研究EH病因以及采取有效治疗措施具有重要意义。
Study on parathyroid hypertensive factor of
essential hypertensive patients
, 百拇医药
ZHANG Shi-lian WANG Wei ZHU Wen-ping HU Xiao-dong ZHAO Rui-shan
(Department of Biochemistry,Hebei Academy of Medical Science,Shijiazhuang 050021)
Abstract Objective:To study the parathyroid hypertensive factor (PHF) activity in the plasma of essential hypertensive(EH) patients. Method:The activities of PHF in plasma of 31 EH patients and 33 healthy controls were measured by bioassay. Result:The mean PHF level in 32 EH patients was higher than the healthy control group (P<0.05～0.01). The model of raising blood pressure with dialyzed plasma of EH patients was similar with the PHF in SHR.Conclusion:Part of hypertensive patients has abnormal PHF activity.
, 百拇医药
Key words Parathyroid hypertensive factor Essential hypertension
甲状旁腺高血压因子(PHF)为一种钙调因子，是近年来新发现的一种致高血压因子〔1〕。PHF的分泌与体内钙的关系同其他内分泌组织不同，钙可刺激大多数内分泌腺的分泌，而对PHF的分泌是抑制作用，这一发现解释了高钙饮食和钙通道阻断剂均可有效地降低血压这一矛盾现象〔2～4〕。为了解原发性高血压(EH)患者血浆PHF活性情况，以便临床采取有效的治疗方案，本文对此进行了观察。
1 对象与方法
1.1 对象
EH组：符合WHO诊断标准的门诊EH患者，无心、肾、肝等器质性病变。共31例，男15例，女16例，平均年龄(55.2±11.3)岁。全部病例检测前未使用胰岛素及钙离子拮抗剂。
, 百拇医药
对照组：来源于健康体检人群，33例，男18例，女15例，平均年龄(49.8±10.4)岁。
实验动物：自发性高血压大鼠(SHR)，一级动物，购自北京阜外医院实验动物中心。SD大鼠，一级动物，购自河北省医学科学院实验动物中心。
1.2 方法
分别取EH患者和正常人的空腹静脉血，肝素
抗凝，离心分离血浆，用能透过分子量为1 000 Da的透析膜将每份血浆在4℃下透析24 h,得到部分纯化的PHF, 将其置于-20℃冰箱保存,以备PHF生物活性测定。选用300 g左右雄性SD大鼠腹腔注射戊巴比妥钠(50 mg/kg)麻醉，麻醉后剥离一侧颈动脉做动脉插管，连接血压传感器测血压，当大鼠血压持续平稳15 min后，自股静脉注入上述透析好的PHF血浆1.0 ml，记录注射前和注射后10、20、30、40、45、50、60、70、80和90 min的平均动脉压(MAP)，以血压升高9.75 mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)以上为PHF阳性。
, 百拇医药
1.3 统计学处理
计量资料均用
±s表示，显著性检验用t检验；计数资料用χ2检验。2 结果
2.1 EH患者血浆PHF生物活性
由表1可见，将透析的31例EH患者血浆分别注入SD大鼠后，刺激血压平均增高值在40 min时与注射前比较明显升高(P<0.01),45 min达高峰(P<0.01),60 min恢复到基础水平。而对照组刺激血压增高峰值仅为(1.07±9.00 )mmHg，与注射前比较无差别，表明EH患者血中存有高水平的PHF。
表1 EH患者血浆PHF对SD大鼠血压变化值的影响mmHg，
±s, 百拇医药
EH组(31例)
对照组(33例)
PHF注射前基础
MAP变化值
0
0
PHF注射后(min)
10
0.32±10.16
-0.54±11.42
20
-0.08±13.37
, 百拇医药
-1.22±10.69
30
1.61±9.62
-2.12±10.62
40
7.73±12.712)
-1.37±10.11
45
8.54±14.672)
1.07±9.00
50
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-0.61±11.10
60
0.87±16.03
-4.25±13.88
70
-2.08±13.07
-3.79±15.00
80
-4.99±13.58
-5.62±16.97
90
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-6.46±14.78
-7.88±18.68
表中数据为注射透析血浆后大鼠血压的变化值；与注射前基础MAP变化值比较1)P<0.05，2)P<0.012.2 EH患者中PHF阳性率
31例EH患者的血浆，有19例可明显提高SD大鼠的血压，阳性率为61.3%。而对照组阳性率为30.3%(10/33例)。两组比较有显著性差异(χ2=6.19，P<0.05)。表明EH患者血浆高水平PHF人群比例显著高于对照组。
2.3 EH患者血浆PHF升压效应时程
给SD大鼠注射SHR透析血浆后，MAP于45 min达高峰，60 min恢复到基础血压水平。EH患者40 min明显升高，45 min达高峰，60 min恢复到注射前水平。可见EH患者血浆中的PHF升压模式与SHR的相似。
, 百拇医药
3 讨论
PHF首先发现于SHR的血浆中，其特点为具有延迟性升压作用，即给SD大鼠注入PHF后45 min左右产生升压高峰，且同时与细胞内Ca2+摄取增加相一致〔5〕，目前尚未建立更简便的测定方法，只能靠测定其生物活性确定。我们曾检测PHF对鼠尾动脉细胞Ca2+摄取〔6〕，结果符合上述特征，从本实验结果也可见EH患者血浆中PHF升压模式与SHR透析血浆相似，表明实验中患者透析血浆对大鼠的升压活性为PHF作用，并非其他升压物质。
关于PHF的延迟性升压模式，主要依赖跨膜信息传递速度。cAMP有舒张血管的作用〔7〕，推测PHF的作用造成胞内cAMP含量减少。已知磷酸二酯酶(PDE)可分解cAMP，而腺苷酸环化酶可产生cAMP。用PDE抑制剂茶碱可抑制PHF诱发的延迟血压效应，提示PHF效应可能与PDE的活化相关。但产生升压效应的确切机制有待进一步的研究。
, 百拇医药
本文资料显示，透析的EH患者血浆注入SD大鼠后可出现明显延迟性增高血压，其中有61.3%EH患者血浆存有高水平PHF因子，而对照组仅有30.3%，两组有显著性差异，说明部分EH患者存有高水平的PHF。实验中也观察到正常人有30% PHF阳性，我们认为其中部分阳性是由于在SD大鼠麻醉过程中的不稳定以及周围环境等因素造成的假阳性，或者预示将来有发生高血压的危险。
我们已知体内有许多可引起细胞内Ca2+升高因子，但尚未找到EH患者细胞内长期持续高Ca2+水平的诱因。PHF具有作用强度高、持续时间长的特点，本实验结果表明部分EH患者存有高水平的PHF，预示PHF可能在造成长期细胞内高浓度钙方面起作用，是一种重要的致病因子。临床上通过对PHF水平的检测可采取更有效的治疗方案，如对PHF水平高的患者可用钙通道拮抗剂、硝苯吡啶或异博定等阻断PHF促进Ca2+细胞内流作用。另外服用钙剂可通过抑制PHF的分泌而起作用；而对低水平或无PHF患者采用受体阻断剂和血管紧张素转换酶抑制剂效果较好〔8〕。
, 百拇医药
河北省重点医学科研课题(No.98027)
参考文献
1，Pang P K T,Lewanczuk R Z.Parathyroid origin of a new circulating hypertensive factor in spontaneously hypertensive rats.Am J Hypertens,1989,2:898～902
2，Lewanczuk R Z,Benishin C G,Pang P K T.The effect of calcium and calcium channel blocker combinations on blood pressure in spontaneously hypertensive rats.J Vasc Med Biol,1991,3:329～331
, http://www.100md.com
3，Lewnczuk R Z,Chen A,Pang P K T.The dietary calcium on blood pressure in spontaneously hypertensive rats may be mediated by parathyroid hypertensive factor.Am J Hypertens,1990,3:349～353
4，Bravo E L,Kageyama Y.Dietary calcium supplementation prevents the development of hypertension in deoxycorticosterone-salt-treated dogs.J Cardiovasc Pharmacol,1994,23(Suppl 2):27～30
5，Lewanczuk R Z,Wang J,Zhang Z R,et al.Effects of spontaneously hypertensive rat plasma on blood pressure and tail artery calcium uptake in normotensive rats.Am J Hypertens,1989,2:26～31
, http://www.100md.com
6，赵睿珊，王辅才，朱文萍，等.原发性高血压患者血浆中甲状旁腺高血压因子对细胞钙通道的作用.高血压杂志 , 1996,4：182～184
7，Schaub M C,Kunz B. Regulation of contraction in cardiac and smooth muscle. J Cardiovasc Pharmacol ,1986,8(Suppl 8):117～123
8，Lewanczuk R Z,Hamilton P G.Parathyroid hypertensive factor predicts efficacy in the treatment of essential hypertension with verapamil.Blood Press, 1996,5:98～104
收稿 1999-08-25, 百拇医药