四种中药对血小板聚集性的影响
作者：张小丽 谢人明 冯英菊
单位：张小丽 谢人明 冯英菊(陕西省中医药研究院中药药理研究室 西安 710003)
关键词：清半夏；羌活；天冬；苦楝皮；血小板聚集
西北药学杂志000615 摘要 以ADP、胶原为诱导剂研究清半夏、羌活、天冬、苦楝皮对血小板聚集性的影响。结果显示：四种中药均具有抑制血小板聚集作用。以IC50为据分析，以ADP为诱导剂抑制血小板聚集的强弱依次为：羌活>清半夏>天冬>苦楝皮；以胶原为诱导剂：清半夏>羌活>天冬>苦楝皮；而且4种中药抑制血小板聚集作用与其药物的浓度的相关性良好。
中图分类号：R965 文献标识码：A
Effect of four traditional Chinese medicines on the aggregation of platelet
, 百拇医药
Zhang Xiaoli,Xie Renming and Feng Yingju
(Department of Pharmacology,Shaanxi Academy of Traditional Chinese Medicine,Xi'an 710003)
ABSTRACT The effect of Rhizoma Pinelliae,Rhizoma ET Radix Notopterygii,Radix Aspadagi and Cortex Meliae,on the aggregation of platelet,with ADP and collagen as inducing agents,was studied. The results showed when induced by ADP the IC50(mg/mlPRP) of four Chinese medicines were Rhizoma Pinelliae 1.34,Rhizoma ET Radix Notopterygii 1.29,Radix Aspadagi 1.84 and Cortex Meliae 3.09 respictively;the IC50 were Rhizoma Pinelliae 1.13,Rhizoma ET Radix Notopterygii 1.29,Radix Aspadagi 2.26 and Cortex Meliae 2.78 respectively;induced by collagen. The correlation of the inhibition to the platelet aggregation and the concentration of 4 medicines was significant.
, 百拇医药
KEY WORDS Rhizoma Pinelliae;Rhizoma ET Radix Notopterygii;Radix Aspadagi;Cortex Meliae;platelet aggregation
笔者在研究中发现，一些中药具有较强的抗动脉血栓作用及抑制凝血功能的作用[1]。一般认为动脉血栓属血小板型血栓，即这些抗动脉血栓中药也可能具有抗血小板聚集作用。笔者选出抗动脉血栓作用较强的清半夏(Rhizoma Pinelliae)、羌活(RhizomaET Radix Natopterygii)、天冬(Radix Aspadagi)、苦楝皮(Cortex Meliae)观察其抗血小板聚集的作用。
1 仪器与材料
1.1 仪器 PAM-2型PPP自动平衡血小板聚集仪(江苏丹阳仪器厂)。
, http://www.100md.com 1.2 试药 4味中药材(市售，经生药室鉴定均符合中国药典2000版规定；分别碾碎，用75%乙醇回流提取8h，共3次；提取液减压回收乙醇后，浓缩成1ml相当1g生药)；二磷酸腺苷(ADP，日本和光纯药工业株式会社，批号105701)；胶原(自制，取兔主动脉，去掉脂肪和结缔组织，用生理盐水冲洗干净，捣碎，与生理盐水以1∶10混匀，离心，取上清液备用)。
1.3 动物 大耳白兔1.5～2.0kg，雌雄均用，由第四军医大学动物中心提供。
2 方法
取家兔10只，在清醒状态下从颈总动脉放血，枸橼酸钠抗凝，分离富含血小板血浆(PRP)和贫血小板血浆(PPP)。血小板聚集测定按文献[2]进行，PRP，药物，ADP的总体积为0.5ml。
3 结果
, http://www.100md.com 3.1 ADP为诱导剂 4味中药对血小板聚集均有不同程度的抑制作用，详见表1。以给药剂量与聚集抑制百分率进行相关检验，结果为：清半夏y＝32.87x+5.87，r＝0.9780，聚集抑制50%的浓度(IC50)为1.34mg/ml；羌活y＝32.68x+7.81，IC50为1.29mg/ml，r＝0.9547；天冬y＝20.94x+11.51，r＝0.9360，IC50＝1.84mg/ml；苦楝皮y＝13.97x+6.77，r＝0.9530，IC50＝3.0930mg/ml。
表1 四种中药对ADP诱导兔血小板聚集性的影响(x±s) 药 物
动物数
(只)
剂 量
, http://www.100md.com (mg/ml)
聚集强度(mm)
1′A
3′A
5′A
MA
对照组
7
47±15
63±8
66±13
49±22
清半夏
, 百拇医药
7
0.51
37±20
46±23
47±26
50±23
7
1.00
32±18
38±20
37±21
41±20
, 百拇医药
7
1.92
19±10
23±13
26±19
28±18
对照组
7
47±16
63±15
64±18
65±16
, http://www.100md.com
羌 活
7
0.51
35±19
41±23
42±26
47±23
7
1.00
27±3
34±22
34±25
, http://www.100md.com
39±22
7
1.92
21±15
28±19
27±21
30±20
对照组
8
45±15
60±17
64±19
, 百拇医药
65±17
天 冬
8
1.02
30±16
35±19
34±21
37±19
8
2.00
22±16
25±19
, http://www.100md.com
26±20
28±17
8
3.84
17±12
17±14
18±14
20±13
对照组
7
46±12
, 百拇医药
58±16
19±20
60±18
苦楝皮
7
1.02
41±18
43±24
40±26
47±21
7
2.00
33±15
, 百拇医药
34±21
31±21
38±19
7
3.84
27±13
28±18
24±20
32±16
与对照组比：P<0.05
3.2 胶原为诱导剂 四种中药对血小板的聚集性亦有不同程度的抑制作用，详见表2。因血小板聚集无解聚现象，故将5′A定为最大聚集，药物浓度与聚集抑制百分率线性关系：清半夏y＝48.90x+3.96，r＝0.9966，IC50＝1.13mg/ml；羌活y＝33.48x+6.63，r＝0.9332，IC50＝1.30mg/ml；天冬y＝14.95x+16.28，r＝0.8660，IC50＝2.26mg/ml；苦楝皮y＝16.49x+4.13，r＝0.9932，IC50＝2.78mg/ml。
, 百拇医药
表2 四种中药对胶原诱导的兔血小板聚集性的影响(x±s) 药 物
动物数
(只)
剂 量
(mg/ml)
延迟时间
(min)
聚集强度(mm)
1′A
3′A
5′A
对照组
, 百拇医药
8
0.6±0.7
46±17
70±15
76±15
清半夏
8
0.51
0.9±0.5
26±14
49±20
54±20
, http://www.100md.com
8
1.00
1.5±1.3
15±12
31±20
38±20
7
1.92
1.5±0.7
12±12
22±17
, 百拇医药
26±17
对照组
8
0.6±0.7
36±20
62±18
68±17
羌 活
8
0.51
0.8±0.7
24±18
42±21
, 百拇医药
49±20
8
1.00
0.9±0.7
14±15
33±21
39±20
8
1.92
1.3±1.0
14±13
24±18
, 百拇医药
28±20
对照组
6
0.5±0.7
48±18
71±17
77±17
天 冬
6
1.02
0.8±0.8
25±14
42±20
, http://www.100md.com
50±22
6
2.00
0.8±0.4
16±10
30±16
39±18
6
3.84
1.4±0.7
12±9
, http://www.100md.com 24±16
30±18
对照组
9
0.5±0.6
40±21
67±17
73±17
苦楝皮
9
1.02
0.9±0.8
, 百拇医药 25±15
47±21
54±22
8
2.00
0.9±0.6
19±12
42±21
47±23
9
3.84
1.4±1.0
, http://www.100md.com
15±11
28±18
35±20
与对照组比：P<0.05
4 小结与讨论
4味中药对血小板聚集均有较强的抑制作用，以胶原为诱导剂时，清半夏与苦楝皮对血小板的聚集具有延迟作用。以IC50为据，以ADP为诱导剂时抑制血小板聚集：羌活>清半夏>天冬>苦楝皮；以胶原为诱导剂时清半夏>羌活>天冬>苦楝皮。清半夏和羌活比较接近，可认为二者抑制血小板聚集相近。4味中药抗血栓形成作用强弱顺序与实验的结果比较一致。凝血时间，PT，KPTT的强弱顺序与本实验的结果有些差异[1]。其原因可能为凝血过程是一复杂的过程，血小板凝集是其中的一个因素。
心脑血管疾病患者的血小板功能异常，主要表现为血小板粘、稠、聚集程度增加。4味中药对血小板聚集性的抑制作用，对临床用药有一定的参考价值。
参考文献
[1]张明发，朱自平.辛温(热)合归脾胃经中药药性研究(Ⅵ) 抗血栓形成和抗凝作用.中国中药杂志，1997，22(11)：691
[2]徐叔云，卞如濂，陈修.药理实验方法学.第2版.北京：人民卫生出版社，1991：119，1120
(收稿日期：2000-04-27), http://www.100md.com
单位：张小丽 谢人明 冯英菊(陕西省中医药研究院中药药理研究室 西安 710003)
关键词：清半夏；羌活；天冬；苦楝皮；血小板聚集
西北药学杂志000615 摘要 以ADP、胶原为诱导剂研究清半夏、羌活、天冬、苦楝皮对血小板聚集性的影响。结果显示：四种中药均具有抑制血小板聚集作用。以IC50为据分析，以ADP为诱导剂抑制血小板聚集的强弱依次为：羌活>清半夏>天冬>苦楝皮；以胶原为诱导剂：清半夏>羌活>天冬>苦楝皮；而且4种中药抑制血小板聚集作用与其药物的浓度的相关性良好。
中图分类号：R965 文献标识码：A
Effect of four traditional Chinese medicines on the aggregation of platelet
, 百拇医药
Zhang Xiaoli,Xie Renming and Feng Yingju
(Department of Pharmacology,Shaanxi Academy of Traditional Chinese Medicine,Xi'an 710003)
ABSTRACT The effect of Rhizoma Pinelliae,Rhizoma ET Radix Notopterygii,Radix Aspadagi and Cortex Meliae,on the aggregation of platelet,with ADP and collagen as inducing agents,was studied. The results showed when induced by ADP the IC50(mg/mlPRP) of four Chinese medicines were Rhizoma Pinelliae 1.34,Rhizoma ET Radix Notopterygii 1.29,Radix Aspadagi 1.84 and Cortex Meliae 3.09 respictively;the IC50 were Rhizoma Pinelliae 1.13,Rhizoma ET Radix Notopterygii 1.29,Radix Aspadagi 2.26 and Cortex Meliae 2.78 respectively;induced by collagen. The correlation of the inhibition to the platelet aggregation and the concentration of 4 medicines was significant.
, 百拇医药
KEY WORDS Rhizoma Pinelliae;Rhizoma ET Radix Notopterygii;Radix Aspadagi;Cortex Meliae;platelet aggregation
笔者在研究中发现，一些中药具有较强的抗动脉血栓作用及抑制凝血功能的作用[1]。一般认为动脉血栓属血小板型血栓，即这些抗动脉血栓中药也可能具有抗血小板聚集作用。笔者选出抗动脉血栓作用较强的清半夏(Rhizoma Pinelliae)、羌活(RhizomaET Radix Natopterygii)、天冬(Radix Aspadagi)、苦楝皮(Cortex Meliae)观察其抗血小板聚集的作用。
1 仪器与材料
1.1 仪器 PAM-2型PPP自动平衡血小板聚集仪(江苏丹阳仪器厂)。
, http://www.100md.com 1.2 试药 4味中药材(市售，经生药室鉴定均符合中国药典2000版规定；分别碾碎，用75%乙醇回流提取8h，共3次；提取液减压回收乙醇后，浓缩成1ml相当1g生药)；二磷酸腺苷(ADP，日本和光纯药工业株式会社，批号105701)；胶原(自制，取兔主动脉，去掉脂肪和结缔组织，用生理盐水冲洗干净，捣碎，与生理盐水以1∶10混匀，离心，取上清液备用)。
1.3 动物 大耳白兔1.5～2.0kg，雌雄均用，由第四军医大学动物中心提供。
2 方法
取家兔10只，在清醒状态下从颈总动脉放血，枸橼酸钠抗凝，分离富含血小板血浆(PRP)和贫血小板血浆(PPP)。血小板聚集测定按文献[2]进行，PRP，药物，ADP的总体积为0.5ml。
3 结果
, http://www.100md.com 3.1 ADP为诱导剂 4味中药对血小板聚集均有不同程度的抑制作用，详见表1。以给药剂量与聚集抑制百分率进行相关检验，结果为：清半夏y＝32.87x+5.87，r＝0.9780，聚集抑制50%的浓度(IC50)为1.34mg/ml；羌活y＝32.68x+7.81，IC50为1.29mg/ml，r＝0.9547；天冬y＝20.94x+11.51，r＝0.9360，IC50＝1.84mg/ml；苦楝皮y＝13.97x+6.77，r＝0.9530，IC50＝3.0930mg/ml。
表1 四种中药对ADP诱导兔血小板聚集性的影响(x±s) 药 物
动物数
(只)
剂 量
, http://www.100md.com (mg/ml)
聚集强度(mm)
1′A
3′A
5′A
MA
对照组
7
47±15
63±8
66±13
49±22
清半夏
, 百拇医药
7
0.51
37±20
46±23
47±26
50±23
7
1.00
32±18
38±20
37±21
41±20
, 百拇医药
7
1.92
19±10
23±13
26±19
28±18
对照组
7
47±16
63±15
64±18
65±16
, http://www.100md.com
羌 活
7
0.51
35±19
41±23
42±26
47±23
7
1.00
27±3
34±22
34±25
, http://www.100md.com
39±22
7
1.92
21±15
28±19
27±21
30±20
对照组
8
45±15
60±17
64±19
, 百拇医药
65±17
天 冬
8
1.02
30±16
35±19
34±21
37±19
8
2.00
22±16
25±19
, http://www.100md.com
26±20
28±17
8
3.84
17±12
17±14
18±14
20±13
对照组
7
46±12
, 百拇医药
58±16
19±20
60±18
苦楝皮
7
1.02
41±18
43±24
40±26
47±21
7
2.00
33±15
, 百拇医药
34±21
31±21
38±19
7
3.84
27±13
28±18
24±20
32±16
与对照组比：P<0.05
3.2 胶原为诱导剂 四种中药对血小板的聚集性亦有不同程度的抑制作用，详见表2。因血小板聚集无解聚现象，故将5′A定为最大聚集，药物浓度与聚集抑制百分率线性关系：清半夏y＝48.90x+3.96，r＝0.9966，IC50＝1.13mg/ml；羌活y＝33.48x+6.63，r＝0.9332，IC50＝1.30mg/ml；天冬y＝14.95x+16.28，r＝0.8660，IC50＝2.26mg/ml；苦楝皮y＝16.49x+4.13，r＝0.9932，IC50＝2.78mg/ml。
, 百拇医药
表2 四种中药对胶原诱导的兔血小板聚集性的影响(x±s) 药 物
动物数
(只)
剂 量
(mg/ml)
延迟时间
(min)
聚集强度(mm)
1′A
3′A
5′A
对照组
, 百拇医药
8
0.6±0.7
46±17
70±15
76±15
清半夏
8
0.51
0.9±0.5
26±14
49±20
54±20
, http://www.100md.com
8
1.00
1.5±1.3
15±12
31±20
38±20
7
1.92
1.5±0.7
12±12
22±17
, 百拇医药
26±17
对照组
8
0.6±0.7
36±20
62±18
68±17
羌 活
8
0.51
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24±18
42±21
, 百拇医药
49±20
8
1.00
0.9±0.7
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33±21
39±20
8
1.92
1.3±1.0
14±13
24±18
, 百拇医药
28±20
对照组
6
0.5±0.7
48±18
71±17
77±17
天 冬
6
1.02
0.8±0.8
25±14
42±20
, http://www.100md.com
50±22
6
2.00
0.8±0.4
16±10
30±16
39±18
6
3.84
1.4±0.7
12±9
, http://www.100md.com 24±16
30±18
对照组
9
0.5±0.6
40±21
67±17
73±17
苦楝皮
9
1.02
0.9±0.8
, 百拇医药 25±15
47±21
54±22
8
2.00
0.9±0.6
19±12
42±21
47±23
9
3.84
1.4±1.0
, http://www.100md.com
15±11
28±18
35±20
与对照组比：P<0.05
4 小结与讨论
4味中药对血小板聚集均有较强的抑制作用，以胶原为诱导剂时，清半夏与苦楝皮对血小板的聚集具有延迟作用。以IC50为据，以ADP为诱导剂时抑制血小板聚集：羌活>清半夏>天冬>苦楝皮；以胶原为诱导剂时清半夏>羌活>天冬>苦楝皮。清半夏和羌活比较接近，可认为二者抑制血小板聚集相近。4味中药抗血栓形成作用强弱顺序与实验的结果比较一致。凝血时间，PT，KPTT的强弱顺序与本实验的结果有些差异[1]。其原因可能为凝血过程是一复杂的过程，血小板凝集是其中的一个因素。
心脑血管疾病患者的血小板功能异常，主要表现为血小板粘、稠、聚集程度增加。4味中药对血小板聚集性的抑制作用，对临床用药有一定的参考价值。
参考文献
[1]张明发，朱自平.辛温(热)合归脾胃经中药药性研究(Ⅵ) 抗血栓形成和抗凝作用.中国中药杂志，1997，22(11)：691
[2]徐叔云，卞如濂，陈修.药理实验方法学.第2版.北京：人民卫生出版社，1991：119，1120
(收稿日期：2000-04-27), http://www.100md.com