急性脑卒中患者血浆内皮素水平的研究
作者：郭沂涟 李义召 刘爱芬 孙琳
单位：郭沂涟 孙琳(山东医科大学第二附属医院神经科 250033)；李义召 刘爱芬(山东医科大学第一附属医院神经科)
关键词：急性脑卒中；内皮素
临床神经病学杂志000610 【摘要】 目的 探讨内皮素(ET)在急性脑卒中发生、发展中的作用。方法 采用放射免疫分析法检测120例急性脑卒中患者14天内血浆ET水平变化。结果 (1)急性脑卒中患者血浆ET水平(114.75±15.78)明显高于对照组(66.75±7.23)(P<0.001)；(2)血浆ET水平与病情轻重密切相关，重型 (140.57±13.84) 明显高于轻型(92.30±4.26) (P<0.001)；(3)血浆ET水平14天内的动态变化:其高峰值与卒中后脑水肿、低灌流、缺血区半暗带及蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的形成时程相一致。结论 急性脑卒中的病理生理机理与ET分泌异常有关，监测血浆ET水平有助于判断预后。
, 百拇医药
脑卒中发病的基础为血管壁结构及功能的破坏，此破坏始于内皮细胞结构及功能的丧失，因此，由内皮细胞产生的具有强烈缩血管作用的生物活性多肽——内皮素(ET)与脑卒中的关系日益受到重视。为此，我们采用放免分析法(RIA)检测120例急性脑卒中患者14天内血浆ET水平变化，以探讨其在脑梗死(CI)、脑出血(CH)及蛛网膜下腔出血(SAH)发生和发展中的作用。
1 资料与方法
1.1 临床资料 120例患者系山东医科大学第一附属医院1994～1996年急诊留观及住院者，均符合1995年第四届全国脑血管病会议制订的诊断标准，并经CT/MRI或腰穿证实。病例组：CI组60例，男36例，女24例，年龄31～62岁，平均46.5岁；CH组36例，男20例，女16例，年龄20～75岁，平均47.5岁；SAH组24例，男16例，女8例，年龄25～73岁，平均49岁。CI和CH组按临床神经功能缺损评分分类，轻型36例(0～15分)，中型36例(16～30分)，重型24例(31～45分)；SAH组按美国动脉瘤协作组修订的Botterell分级标准，轻型10例(Ⅰ、Ⅱ级)，重型14例(Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ级)。根据病程不同分： A组: 发病<24小时; B组: 1～3天; C组: 4～7天; D组: 8～14天。对照组：健康查体者52人，男38人，女14人，年龄17～80岁，平均48.5岁。
, 百拇医药
1.2 方法 晨起空腹抽取肘静脉血2 ml，置于盛有10% EDTA 二钠30 μl和抑肽酶400 IU(40 ml)的试管中摇匀。在4℃条件下，以3000 r/min离心10分钟，分离血浆，保存于-20℃。测定前在室温下或冷水中复温，再次离心5分钟，取其上清液采用放免分析法测定ET水平(ET放射免疫药盒购自解放军总医院东亚免疫技术研究所，试剂配制与操作严格按说明书进行)。120例标本分两批测定(每批60例)，经统计学检验，两批标本血浆ET水平无差异(P>0.05)。
1.3 统计学处理 对测定结果分别进行Dunnett t检验、方差分析及q检验。
2 结 果
2.1 急性脑卒中患者血浆ET水平(114.75±15.78)与对照组(66.75±7.23)相比明显增高(P<0.001)；急性脑卒中患者血浆ET水平与病情轻重明显相关，重型 (140.57±13.84)显著高于轻型(92.30±4.26) (P<0.001)，详见表1。
, 百拇医药
表1 急性脑卒中患者血浆ET水平比较(
±s)
例数
ET(ng/L)
CI 组
轻 型
24
93.04±4.68*
中 型
20
115.36±10.75*
, 百拇医药 重 型
16
130.09±12.88*△
CH 组
轻 型
12
84.44±2.71*
中 型
16
104.02±12.87*
重 型
8
, 百拇医药
124.68±17.60*△
SAH 组
轻 型
10
99.96±6.08*
重 型
14
161.63±12.80*△
对照组
52
66.75±7.23
各组与对照组比较*P<0.001，各组重型与轻型比较△P<0.001，CI组、CH组、SAH组之间比较P>0.05
, 百拇医药
2.2 急性脑卒中患者发病14天内血浆ET水平变化 24小时内血浆ET水平开始升高，CI组、SAH组第4～7天达高峰，CH组第1～3天即达高峰。
3 讨 论
内皮素(ET)是近年来发现的一种强有力缩血管多肽，虽然其生理作用尚未完全阐明，但用放射自显影标定技术已经证实ET受体广泛存在于心血管系统和中枢神经系统,多种化学或物理因素调节ET的合成和分泌。有关卒中诱导的血浆ET水平增高的原因及确切临床意义至今不清楚，但多认为血浆ET水平升高与以下因素有关：(1)急性脑卒中所致躯体应激反应使全身血管内皮产生ET非特异性升高[1]；(2)局部缺血性损害可能引起脑受累微血管的内皮细胞产生ET和ET漏出增加[2]；(3)CH及SAH后血凝块中某些缩血管活性物质刺激ET释放[3，4]；(4)血管破裂致内皮细胞受损而刺激ET释放增多；(5)CH及SAH后红细胞溶解释放氧合血红蛋白刺激内皮细胞和平滑肌细胞合成和释放ET增加[5，6 ] ；(6)出血后其他血管活性物质引起血管痉挛导致释放过量ET[7]。
, 百拇医药
内皮损害极大地增强了血管对ET的敏感性，引起局部血管的持久收缩，诱发脑卒中或加重卒中后的缺血损害。ET除作用于血管外，还可直接作用于神经细胞，引起细胞死亡，也可通过刺激兴奋性氨基酸的释放而直接加速受损神经细胞死亡[8]。目前多数学者认为ET可与其特异性受体结合，使细胞外钙内流和细胞内贮钙池中的钙释放，引起细胞内钙离子超载而导致血管收缩、细胞水肿和神经死亡[9]。
本研究结果表明，脑卒中急性期血浆ET水平较对照组明显升高，而且血浆ET水平升高的程度与病情轻重明显相关，说明ET参与了脑卒中的发生与发展，其升高水平与病情轻重呈正相关。对急性脑卒中血浆ET水平的动态观察发现，24小时内血浆ET水平即开始升高，CI及SAH患者血浆ET水平于第4～7天达高峰，与CI后的脑水肿、缺血半暗带及SAH后脑血管痉挛(CVS)、迟发性神经功能缺损(DID)的形成时程相一致；CH患者血浆ET水平于第1～3天达高峰，与CH后的脑水肿及低灌流的发生时程相一致，说明内皮素水平的高峰值与急性脑卒中的高峰期相吻合，从而证明了内皮素在脑卒中的发生、发展中起着不容忽视的作用。对ET作用机理及ET受体拮抗剂、ET转化酶抑制剂或针对ET基因治疗的进一步研究对揭示急性脑卒中的病因及治疗将具有重要的推动作用。
, 百拇医药
参 考 文 献
1，Vane JR,Anggard EE, Botting RM. Regulatory functions of the vascular endothelium. N Engl J Med, 1990,323:27
2，Ziv I, Fleminger G, Djaldetti R, et al. Increased plasma endothelin-1 in acute ischemic stroke. Stroke, 1992, 23:1014
3，Yanagisawa M, Kurihara H, Kimura S, et al. A novel potent vaso- constrictor peptide produced by vascular endotheliol cells. Nature, 1988, 332: 411
, http://www.100md.com
4，Suzuki R, Masaoka H, Hirata Y, et al.The role of endothelin-1 in the origin of cerebral vasospasm in patients with aneurysmal subarachnoid hemorrhage. J Neurosurg, 1992, 77:96
5，Davenport AP, Ashby MJ, Easton P, et al. A sensitive radioimmunoassay measuring endothelin-like immunoreactivity in patient with essential hypertension and normatensive contron subjects. Clin Sci, 1990, 78:261
6，Cocks TM,Malta E, King SJ, et al. Oxyhaemoglobin increase the production of endothelin-1 by endothelial cells in culture. Eur J Pharmacol,1991, 196:177
, 百拇医药
7，Yamaura I, Tani E, Maeda Y, et al. Endothelin-1 of canine artery in vasospasm. J Neurosurg, 1992,76:99
8，Lin WW, Lee CY, Chuang DM. Endothelin-1 stimulates the release of preloaded[3H] D-aspartate from cultured cerebellar granule cell. Biochem Biophys Res Commun, 1990,167:593
9，Marsden PA, Denthuluri NR, Brenner BM, et al. Endothelin action on vascular smooth muscle involves inositol trisphosphate and calcium mobilization. Biochem Biophys Res Commun, 1989, 158:86
(收稿2000-02-24，修回2000-08-15), 百拇医药
单位：郭沂涟 孙琳(山东医科大学第二附属医院神经科 250033)；李义召 刘爱芬(山东医科大学第一附属医院神经科)
关键词：急性脑卒中；内皮素
临床神经病学杂志000610 【摘要】 目的 探讨内皮素(ET)在急性脑卒中发生、发展中的作用。方法 采用放射免疫分析法检测120例急性脑卒中患者14天内血浆ET水平变化。结果 (1)急性脑卒中患者血浆ET水平(114.75±15.78)明显高于对照组(66.75±7.23)(P<0.001)；(2)血浆ET水平与病情轻重密切相关，重型 (140.57±13.84) 明显高于轻型(92.30±4.26) (P<0.001)；(3)血浆ET水平14天内的动态变化:其高峰值与卒中后脑水肿、低灌流、缺血区半暗带及蛛网膜下腔出血后脑血管痉挛的形成时程相一致。结论 急性脑卒中的病理生理机理与ET分泌异常有关，监测血浆ET水平有助于判断预后。
, 百拇医药
脑卒中发病的基础为血管壁结构及功能的破坏，此破坏始于内皮细胞结构及功能的丧失，因此，由内皮细胞产生的具有强烈缩血管作用的生物活性多肽——内皮素(ET)与脑卒中的关系日益受到重视。为此，我们采用放免分析法(RIA)检测120例急性脑卒中患者14天内血浆ET水平变化，以探讨其在脑梗死(CI)、脑出血(CH)及蛛网膜下腔出血(SAH)发生和发展中的作用。
1 资料与方法
1.1 临床资料 120例患者系山东医科大学第一附属医院1994～1996年急诊留观及住院者，均符合1995年第四届全国脑血管病会议制订的诊断标准，并经CT/MRI或腰穿证实。病例组：CI组60例，男36例，女24例，年龄31～62岁，平均46.5岁；CH组36例，男20例，女16例，年龄20～75岁，平均47.5岁；SAH组24例，男16例，女8例，年龄25～73岁，平均49岁。CI和CH组按临床神经功能缺损评分分类，轻型36例(0～15分)，中型36例(16～30分)，重型24例(31～45分)；SAH组按美国动脉瘤协作组修订的Botterell分级标准，轻型10例(Ⅰ、Ⅱ级)，重型14例(Ⅲ、Ⅳ、Ⅴ级)。根据病程不同分： A组: 发病<24小时; B组: 1～3天; C组: 4～7天; D组: 8～14天。对照组：健康查体者52人，男38人，女14人，年龄17～80岁，平均48.5岁。
, 百拇医药
1.2 方法 晨起空腹抽取肘静脉血2 ml，置于盛有10% EDTA 二钠30 μl和抑肽酶400 IU(40 ml)的试管中摇匀。在4℃条件下，以3000 r/min离心10分钟，分离血浆，保存于-20℃。测定前在室温下或冷水中复温，再次离心5分钟，取其上清液采用放免分析法测定ET水平(ET放射免疫药盒购自解放军总医院东亚免疫技术研究所，试剂配制与操作严格按说明书进行)。120例标本分两批测定(每批60例)，经统计学检验，两批标本血浆ET水平无差异(P>0.05)。
1.3 统计学处理 对测定结果分别进行Dunnett t检验、方差分析及q检验。
2 结 果
2.1 急性脑卒中患者血浆ET水平(114.75±15.78)与对照组(66.75±7.23)相比明显增高(P<0.001)；急性脑卒中患者血浆ET水平与病情轻重明显相关，重型 (140.57±13.84)显著高于轻型(92.30±4.26) (P<0.001)，详见表1。
, 百拇医药
表1 急性脑卒中患者血浆ET水平比较(
±s)例数
ET(ng/L)
CI 组
轻 型
24
93.04±4.68*
中 型
20
115.36±10.75*
, 百拇医药 重 型
16
130.09±12.88*△
CH 组
轻 型
12
84.44±2.71*
中 型
16
104.02±12.87*
重 型
8
, 百拇医药
124.68±17.60*△
SAH 组
轻 型
10
99.96±6.08*
重 型
14
161.63±12.80*△
对照组
52
66.75±7.23
各组与对照组比较*P<0.001，各组重型与轻型比较△P<0.001，CI组、CH组、SAH组之间比较P>0.05
, 百拇医药
2.2 急性脑卒中患者发病14天内血浆ET水平变化 24小时内血浆ET水平开始升高，CI组、SAH组第4～7天达高峰，CH组第1～3天即达高峰。
3 讨 论
内皮素(ET)是近年来发现的一种强有力缩血管多肽，虽然其生理作用尚未完全阐明，但用放射自显影标定技术已经证实ET受体广泛存在于心血管系统和中枢神经系统,多种化学或物理因素调节ET的合成和分泌。有关卒中诱导的血浆ET水平增高的原因及确切临床意义至今不清楚，但多认为血浆ET水平升高与以下因素有关：(1)急性脑卒中所致躯体应激反应使全身血管内皮产生ET非特异性升高[1]；(2)局部缺血性损害可能引起脑受累微血管的内皮细胞产生ET和ET漏出增加[2]；(3)CH及SAH后血凝块中某些缩血管活性物质刺激ET释放[3，4]；(4)血管破裂致内皮细胞受损而刺激ET释放增多；(5)CH及SAH后红细胞溶解释放氧合血红蛋白刺激内皮细胞和平滑肌细胞合成和释放ET增加[5，6 ] ；(6)出血后其他血管活性物质引起血管痉挛导致释放过量ET[7]。
, 百拇医药
内皮损害极大地增强了血管对ET的敏感性，引起局部血管的持久收缩，诱发脑卒中或加重卒中后的缺血损害。ET除作用于血管外，还可直接作用于神经细胞，引起细胞死亡，也可通过刺激兴奋性氨基酸的释放而直接加速受损神经细胞死亡[8]。目前多数学者认为ET可与其特异性受体结合，使细胞外钙内流和细胞内贮钙池中的钙释放，引起细胞内钙离子超载而导致血管收缩、细胞水肿和神经死亡[9]。
本研究结果表明，脑卒中急性期血浆ET水平较对照组明显升高，而且血浆ET水平升高的程度与病情轻重明显相关，说明ET参与了脑卒中的发生与发展，其升高水平与病情轻重呈正相关。对急性脑卒中血浆ET水平的动态观察发现，24小时内血浆ET水平即开始升高，CI及SAH患者血浆ET水平于第4～7天达高峰，与CI后的脑水肿、缺血半暗带及SAH后脑血管痉挛(CVS)、迟发性神经功能缺损(DID)的形成时程相一致；CH患者血浆ET水平于第1～3天达高峰，与CH后的脑水肿及低灌流的发生时程相一致，说明内皮素水平的高峰值与急性脑卒中的高峰期相吻合，从而证明了内皮素在脑卒中的发生、发展中起着不容忽视的作用。对ET作用机理及ET受体拮抗剂、ET转化酶抑制剂或针对ET基因治疗的进一步研究对揭示急性脑卒中的病因及治疗将具有重要的推动作用。
, 百拇医药
参 考 文 献
1，Vane JR,Anggard EE, Botting RM. Regulatory functions of the vascular endothelium. N Engl J Med, 1990,323:27
2，Ziv I, Fleminger G, Djaldetti R, et al. Increased plasma endothelin-1 in acute ischemic stroke. Stroke, 1992, 23:1014
3，Yanagisawa M, Kurihara H, Kimura S, et al. A novel potent vaso- constrictor peptide produced by vascular endotheliol cells. Nature, 1988, 332: 411
, http://www.100md.com
4，Suzuki R, Masaoka H, Hirata Y, et al.The role of endothelin-1 in the origin of cerebral vasospasm in patients with aneurysmal subarachnoid hemorrhage. J Neurosurg, 1992, 77:96
5，Davenport AP, Ashby MJ, Easton P, et al. A sensitive radioimmunoassay measuring endothelin-like immunoreactivity in patient with essential hypertension and normatensive contron subjects. Clin Sci, 1990, 78:261
6，Cocks TM,Malta E, King SJ, et al. Oxyhaemoglobin increase the production of endothelin-1 by endothelial cells in culture. Eur J Pharmacol,1991, 196:177
, 百拇医药
7，Yamaura I, Tani E, Maeda Y, et al. Endothelin-1 of canine artery in vasospasm. J Neurosurg, 1992,76:99
8，Lin WW, Lee CY, Chuang DM. Endothelin-1 stimulates the release of preloaded[3H] D-aspartate from cultured cerebellar granule cell. Biochem Biophys Res Commun, 1990,167:593
9，Marsden PA, Denthuluri NR, Brenner BM, et al. Endothelin action on vascular smooth muscle involves inositol trisphosphate and calcium mobilization. Biochem Biophys Res Commun, 1989, 158:86
(收稿2000-02-24，修回2000-08-15), 百拇医药