微量培养法比较解脲支原体/人型支原体试剂质量
作者：王金龙
单位：广州市肿瘤医院检验科510095
关键词：解脲支原体；人型支原体；试剂质量；比较
中国现代医学杂志000742 分类号 R375
笔者在十余年研制传统和改良型解脲、人型 支原体试剂工作中摸索建立了一种有国际标准试剂作质量参考、操作经济简便的微孔板微量 培养法，用于自制试剂的生产质量控制和各种试剂的质量评价。现报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 标准菌株 Uu4、8型和Mh标准菌株由中山医科大学微生物学教研室 提供。阳性培养物取6.6ul接种。
, http://www.100md.com
1.1.2 标本 收集拟诊为泌尿生殖道感染病例264份，其中男性病人用无菌 试管收集前列腺液或前段尿；女性病人用无菌棉签或无菌试管取宫颈分泌物或中段尿；棉拭 子 用0.5ml无菌生理盐水洗脱，尿标本经3?000r/min离心10min，弃上清液，沉渣作为接种物 。
1.2 方法
各标准菌株和临床标本接种物均连续4次，每次6.6ul，加入40孔反应板的纵列四孔内，上述 4种支原体培养液各取0.1ml分别加入反应板的横排孔内，每次各种培养基设空白对照；最后 每孔滴加无菌石蜡油2滴，加盖放(36±1)℃温箱培养24～48h观察结果。
1.3 统计学处理
各组阳性率与梅里埃阳性率比较u检验(单侧)。
2 结果
, 百拇医药
几种泌尿生殖道支原体液体选择培养基检测264例样品的Uu和Mh结果分别见表1和表2。
表1 4种支原体液体选择培养基检测264例样品Uu的结果 例(%)
梅里埃试剂
改良Uu/Mh
改良Uu
传统Uu/Mh
阳性数
72(27.3)
69(26.1)
70(26.5)
54(20.5)
, 百拇医药
阴性数
188(71.2)
185(70.1)
183(69.3)
160(60.6)
假阳性数
4(1.5)
7(2.7)
9(3.4)
29(10.9)
假阴性数
3(1.1)
, 百拇医药
4(1.5)
21(7.9)
阳性符合数
69(95.8)
70(97.2)
54(75.0)
阴性符合数
180(95.7)
179(95.2)
157(83.5)
与梅里埃阳性率比较
P>0.05
, 百拇医药
P>0.05
P>0.05
U=0.415
U=0.275
U=2.58
表2 3种支原体液体选择培养基检测264例样品Mh的结果 例(%)
梅里埃试剂
改良Uu/Mh
传统Uu/Mh
阳性数
16(6.1)
15(5.7)
, 百拇医药
11(4.2)
阴性数
244(92.4)
242(91.7)
211(79.9)
假阳性数
4(1.5)
6(2.3)
37(14.0)
假阴性数
1(0.4)
5(1.9)
, 百拇医药
阳性符合数
15(93.8)
11(68.8)
阴性符合数
239(97.9)
206(84.4)
3 讨论
文献提供的泌尿生殖道支原体Uu和Mh液体选择培养基配方及制备方法多种多样。支原体液体 选择培养基试剂质量取决于其营养程度和抑菌剂选择。制备的核心技术是设计选择不影响支 原体生长的抗生素组合[1]，即选用现代细菌敏感耐药变化特点的抗生素种类和浓 度。作为知识保护，法国梅里埃产品未公开其培养基中4种抗生素配方。笔者经过多年筛选 确定了自有技术的4种抗生素组合配方，并由此研制出质量接近梅里埃支原体培养基的产品 。10年研制经验体会：可以法国梅里埃支原体培养基为参考，将未加4种抗生素(包括1种抗 真菌剂)和复合营养增强剂的培养基称为传统型；而将加有使用效果接近梅里埃试剂的4种抗 生素(包括1种抗真菌剂)及复合营养增强剂的培养基称为改良型或现代型。对照试验中发现 临床标本中有少数Uu，Mh需依赖复合营养增强剂生长，用无复合营养增强剂的培养基检测呈 假阴性。由于临床标本中耐青霉素的混杂细菌较多，用仅加青霉素的传统型培养基检测时有 较多比例的培养液指示剂呈假阳性变色和/或混浊干扰现象。
参 考 文 献
1，Fiacco V,Miller MJ,Camey E,et al.Comparison of media for isolation of ureaplasma urealyticum and enital Mycoplasma species. J Clin Microiology,1984;20 (5):862～864, 百拇医药
单位：广州市肿瘤医院检验科510095
关键词：解脲支原体；人型支原体；试剂质量；比较
中国现代医学杂志000742 分类号 R375
笔者在十余年研制传统和改良型解脲、人型 支原体试剂工作中摸索建立了一种有国际标准试剂作质量参考、操作经济简便的微孔板微量 培养法，用于自制试剂的生产质量控制和各种试剂的质量评价。现报告如下。
1 材料与方法
1.1 材料
1.1.1 标准菌株 Uu4、8型和Mh标准菌株由中山医科大学微生物学教研室 提供。阳性培养物取6.6ul接种。
, http://www.100md.com
1.1.2 标本 收集拟诊为泌尿生殖道感染病例264份，其中男性病人用无菌 试管收集前列腺液或前段尿；女性病人用无菌棉签或无菌试管取宫颈分泌物或中段尿；棉拭 子 用0.5ml无菌生理盐水洗脱，尿标本经3?000r/min离心10min，弃上清液，沉渣作为接种物 。
1.2 方法
各标准菌株和临床标本接种物均连续4次，每次6.6ul，加入40孔反应板的纵列四孔内，上述 4种支原体培养液各取0.1ml分别加入反应板的横排孔内，每次各种培养基设空白对照；最后 每孔滴加无菌石蜡油2滴，加盖放(36±1)℃温箱培养24～48h观察结果。
1.3 统计学处理
各组阳性率与梅里埃阳性率比较u检验(单侧)。
2 结果
, 百拇医药
几种泌尿生殖道支原体液体选择培养基检测264例样品的Uu和Mh结果分别见表1和表2。
表1 4种支原体液体选择培养基检测264例样品Uu的结果 例(%)
梅里埃试剂
改良Uu/Mh
改良Uu
传统Uu/Mh
阳性数
72(27.3)
69(26.1)
70(26.5)
54(20.5)
, 百拇医药
阴性数
188(71.2)
185(70.1)
183(69.3)
160(60.6)
假阳性数
4(1.5)
7(2.7)
9(3.4)
29(10.9)
假阴性数
3(1.1)
, 百拇医药
4(1.5)
21(7.9)
阳性符合数
69(95.8)
70(97.2)
54(75.0)
阴性符合数
180(95.7)
179(95.2)
157(83.5)
与梅里埃阳性率比较
P>0.05
, 百拇医药
P>0.05
P>0.05
U=0.415
U=0.275
U=2.58
表2 3种支原体液体选择培养基检测264例样品Mh的结果 例(%)
梅里埃试剂
改良Uu/Mh
传统Uu/Mh
阳性数
16(6.1)
15(5.7)
, 百拇医药
11(4.2)
阴性数
244(92.4)
242(91.7)
211(79.9)
假阳性数
4(1.5)
6(2.3)
37(14.0)
假阴性数
1(0.4)
5(1.9)
, 百拇医药
阳性符合数
15(93.8)
11(68.8)
阴性符合数
239(97.9)
206(84.4)
3 讨论
文献提供的泌尿生殖道支原体Uu和Mh液体选择培养基配方及制备方法多种多样。支原体液体 选择培养基试剂质量取决于其营养程度和抑菌剂选择。制备的核心技术是设计选择不影响支 原体生长的抗生素组合[1]，即选用现代细菌敏感耐药变化特点的抗生素种类和浓 度。作为知识保护，法国梅里埃产品未公开其培养基中4种抗生素配方。笔者经过多年筛选 确定了自有技术的4种抗生素组合配方，并由此研制出质量接近梅里埃支原体培养基的产品 。10年研制经验体会：可以法国梅里埃支原体培养基为参考，将未加4种抗生素(包括1种抗 真菌剂)和复合营养增强剂的培养基称为传统型；而将加有使用效果接近梅里埃试剂的4种抗 生素(包括1种抗真菌剂)及复合营养增强剂的培养基称为改良型或现代型。对照试验中发现 临床标本中有少数Uu，Mh需依赖复合营养增强剂生长，用无复合营养增强剂的培养基检测呈 假阴性。由于临床标本中耐青霉素的混杂细菌较多，用仅加青霉素的传统型培养基检测时有 较多比例的培养液指示剂呈假阳性变色和/或混浊干扰现象。
参 考 文 献
1，Fiacco V,Miller MJ,Camey E,et al.Comparison of media for isolation of ureaplasma urealyticum and enital Mycoplasma species. J Clin Microiology,1984;20 (5):862～864, 百拇医药