HPLC法测定升血调元汤中柚皮苷的含量
作者：王四元 朱爱梅 曾慧萍
单位：广州潘高寿药业股份有限公司(广州 511400
关键词：
中草药000725 升血调元汤是国家中药保护品种，由骨碎补、鸡血藤、首乌、党参、北芪等8味中药制成，具有益气养血、补肾健脾的功效。其中骨碎补是方中君药，柚皮苷是其主要有效成分。鉴于目前其质量标准中未有定量测定项目，为了更好地控制产品质量，我们选择了柚皮苷作为指标成分，应用HPLC法进行含量测定，以控制升血调元汤的内在质量。结果表明方法简单、准确、快速。
1 仪器与试剂
日本岛津LC-10A高效液相色谱仪，7530G分光光度计(上海分析仪器厂)，柚皮苷对照品购自中国药品生物检定所，升血调元汤均为本公司生产，甲醇、醋酸均为分析纯。
2 色谱条件
色谱柱：CLC-ODS(150 mm×6.0 mm)，流动相：甲醇-醋酸-水(35∶5∶65)，检测波长：284 nm，流速：0.5 mL/min，柱温：35 ℃，进样量：20 μL。
3 方法与结果
3.1 线性的考察：精密称取柚皮苷10 mg置100 mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。吸取0.3，0.4，0.6，0.8，1.0 mL分别置于10 mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。精密吸取该稀释液20 μL注入液相色谱仪中，以峰面积Y为纵坐标，柚皮苷量X为横坐标进行线性回归得回归方程为：Y=452 5.9 X+10 547.0，r=0.999 8，结果表明：柚皮苷在0.06～0.2 μg范围内与其峰面积呈良好的线性关系。
3.2 精密度试验：精密吸取浓度为6 μg/mL的柚皮苷对照品稀释液，重复进样6 次，测定峰面积值计算得到RSD=1.2%。
3.3 样品测定：精密吸取样品溶液2 mL，置于50 mL容量瓶中加水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密吸取滤液1 mL置于10 mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，用0.45 μm微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。精密吸取供试品溶液和对照品(浓度为6 μg/mL)溶液各20 μL进样，照上述色谱条件测定，用外标一点法计算，结果见表1。
表1 升血调元汤中柚皮苷含量测定结果(n=5) 批号
961201A
970501A
H0401A
I0101A
I0102F
柚皮苷含量
1.01
1.10
1.26
1.46
1.40
mg/mL
3.4 加样回收率试验：精密吸取1 mL已知含量的样品溶液各5份，分别加入1.2 mg/mL的柚皮苷对照品溶液1 mL，依样品测定项下操作，结果回收率为100.83%，RSD=1.5%。
4 讨论与结果
4.1 波长的选择：1995版中华人民共和国药典一部测定骨碎补中柚皮苷的含量，检测波长为283 nm，我们应用7530G紫外分光光度计在200～440 nm波长范围内对柚皮苷对照品溶液进行光谱扫描，结果表明，在284 nm波长处有最大吸收，故选择284 nm为检测波长。
4.2 样品的处理：我们采取对样品直接稀释过滤的方法，减少了样品在处理过程中的损失，方法简便、快速。柚皮苷与其它成分有较好的分离度，测定结果可靠，可作为该产品检验的一个定量方法。
王四元 1986年毕业于中国药科大学，工程师、执业药师，主要从事质量标准的起草和修订工作，有多篇文章发表。
(1999-09-17收稿), http://www.100md.com
单位：广州潘高寿药业股份有限公司(广州 511400
关键词：
中草药000725 升血调元汤是国家中药保护品种，由骨碎补、鸡血藤、首乌、党参、北芪等8味中药制成，具有益气养血、补肾健脾的功效。其中骨碎补是方中君药，柚皮苷是其主要有效成分。鉴于目前其质量标准中未有定量测定项目，为了更好地控制产品质量，我们选择了柚皮苷作为指标成分，应用HPLC法进行含量测定，以控制升血调元汤的内在质量。结果表明方法简单、准确、快速。
1 仪器与试剂
日本岛津LC-10A高效液相色谱仪，7530G分光光度计(上海分析仪器厂)，柚皮苷对照品购自中国药品生物检定所，升血调元汤均为本公司生产，甲醇、醋酸均为分析纯。
2 色谱条件
色谱柱：CLC-ODS(150 mm×6.0 mm)，流动相：甲醇-醋酸-水(35∶5∶65)，检测波长：284 nm，流速：0.5 mL/min，柱温：35 ℃，进样量：20 μL。
3 方法与结果
3.1 线性的考察：精密称取柚皮苷10 mg置100 mL容量瓶中，用甲醇溶解并稀释至刻度，摇匀。吸取0.3，0.4，0.6，0.8，1.0 mL分别置于10 mL容量瓶中，用流动相稀释至刻度，摇匀。精密吸取该稀释液20 μL注入液相色谱仪中，以峰面积Y为纵坐标，柚皮苷量X为横坐标进行线性回归得回归方程为：Y=452 5.9 X+10 547.0，r=0.999 8，结果表明：柚皮苷在0.06～0.2 μg范围内与其峰面积呈良好的线性关系。
3.2 精密度试验：精密吸取浓度为6 μg/mL的柚皮苷对照品稀释液，重复进样6 次，测定峰面积值计算得到RSD=1.2%。
3.3 样品测定：精密吸取样品溶液2 mL，置于50 mL容量瓶中加水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密吸取滤液1 mL置于10 mL容量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，用0.45 μm微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。精密吸取供试品溶液和对照品(浓度为6 μg/mL)溶液各20 μL进样，照上述色谱条件测定，用外标一点法计算，结果见表1。
表1 升血调元汤中柚皮苷含量测定结果(n=5) 批号
961201A
970501A
H0401A
I0101A
I0102F
柚皮苷含量
1.01
1.10
1.26
1.46
1.40
mg/mL
3.4 加样回收率试验：精密吸取1 mL已知含量的样品溶液各5份，分别加入1.2 mg/mL的柚皮苷对照品溶液1 mL，依样品测定项下操作，结果回收率为100.83%，RSD=1.5%。
4 讨论与结果
4.1 波长的选择：1995版中华人民共和国药典一部测定骨碎补中柚皮苷的含量，检测波长为283 nm，我们应用7530G紫外分光光度计在200～440 nm波长范围内对柚皮苷对照品溶液进行光谱扫描，结果表明，在284 nm波长处有最大吸收，故选择284 nm为检测波长。
4.2 样品的处理：我们采取对样品直接稀释过滤的方法，减少了样品在处理过程中的损失，方法简便、快速。柚皮苷与其它成分有较好的分离度，测定结果可靠，可作为该产品检验的一个定量方法。
王四元 1986年毕业于中国药科大学，工程师、执业药师，主要从事质量标准的起草和修订工作，有多篇文章发表。
(1999-09-17收稿), http://www.100md.com