高血压病与肿瘤坏死因子、一氧化氮及血管活性物质的相关性研究
王永志 陈炜 邢红云 王焱 游碧荣 蒋和平 李斌娟
摘 要： 目的：探讨肿瘤坏死因子(TNF)、一氧化氮(NO)、内皮素(ET)、神经肽Y(NPY)、神经降压素(NT)、降钙素基因相关肽(CGRP)在原发性高血压病(EH)发病中的作用。方法：采用化学比色法及放免法检测了50例EH患者及50例健康者外周血TNF、NO、ET、NPY、NT及CGRP水平。结果：EH患者TNF、ET、NPY水平明显高于正常人(P<0.001)，而NO、NT、CGRP水平则低于正常人(P<0.01)，这种变化与EH的严重程度相关。另外EH组TNF与ET、NPY呈正相关(P<0.01)，与NO、CGRP、NT呈负相关。结论：TNF、NO、ET、NPY、NT、CGRP在EH的发病中可能起重要作用。
关键词：原发性高血压病 肿瘤坏死因子 NO 内皮素 神经肽Y 神经降压素 降钙素基因相关肽
, 百拇医药
本研究对原发性高血压病(EH)患者外周血肿瘤坏死因子(TNF)、一氧化氮(NO)、内皮素(ET)、神经肽Y(NPY)、神经降压素(NT)和降钙素基因相关肽(CGRP)水平进行了测定，旨在探讨其在EH发病中的可能作用。
1 对象和方法
1.1 对象 符合1993年WHO/ISH原发性高血压病诊断标准的EH患者50例，男30例，女20例，年龄35～78(58.1±11.9)岁。其中Ⅰ期12例、Ⅱ期29例、Ⅲ期9例。均经详细询问病史、体检和相关实验室检查排除继发性高血压、周围血管等疾病。另选年龄、性别相匹配的健康体检者50例为对照。
1.2 方法 未服用任何降压剂或停服降压剂5个半衰期后的EH患者和对照组均在空腹12小时后1次采血，取3 ml置玻管静置2小时后，离心10分钟(3 000 rpm/min)取血清；另取5 ml置于含10%EDTA-Na2 50 μl和抑肽酶80 μl的玻管中，于4℃离心10分钟(3 000 rpm/min)分离上层血浆。血清和血浆均贮存于-70℃冰箱保存待测。NO采用化学比色法，仪器采用意大利产半自动生化分析仪，试剂盒由南京聚力生物医学工程研究所提供。TNF、NPY、NT、ET、CGRP均采用放免法。仪器采用国产206厂产全自动γ免疫计数仪，试剂盒由中国人民解放军总医院东亚免疫研究所提供，具体操作方法均严格按说明书进行。各项质控指标均符合要求，批内差异7.1%～8.2%，批间差异8.9%～11.7%。
, 百拇医药
1.3 统计学处理 数据以X±S表示，组内及组间比较采用t检验及F检验。相关系数采用直线相关分析求出。
2 结果
统计学分析提示EH组TNF、ET、NPY水平明显高于对照组(P<0.001)，而NO、NT、CGRP则低于健康人。这种变化同EH的严重程度相关。相关分析表明EH组TNF与ET、NPY呈正相关(r=0.65、0.56、P<0.01)，而与NO、CGRP、NT呈负相关(r=-0.71、-0.66、-0.52、P<0.01)，详见表1。
表1 高血压病患者6种血管活性物质浓度的测定结果
组别
例数
NO(nmol/ml)
, 百拇医药
TNF-α(ng/ml)
ET(pg/ml)
CGRP(pg/ml)
NPY(pg/ml)
NT(pg/ml)
正常组
50
46.64±20.20
0.43±0.16
52.32±23.67
39.04±14.57
74.30±21.46
, 百拇医药
70.65±24.26
高血压病组
50
26.87±9.96**
1.12±0.46***
87.29±36.84***
27.74±6.35*
124.00±29.67***
60.01±22.81*
Ⅰ期
, 百拇医药
12
36.48±11.02*
1.04±0.39**
70.89±28.32**
34.86±9.47
108.27±32.95**
59.02±21.82
Ⅱ期
29
25.09±8.71**#
, 百拇医药
1.24±0.36***##
84.51±30.09***#
28.03±8.91*#
127.16±30.98***##
57.69±20.77*
Ⅲ期
9
14.25±6.79***##
1.37±0.48***##
, 百拇医药 98.42±33.76***##
21.56±8.74**##
149.62±31.54***###
52.82±19.90**#
注：组间比较*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；各期比较#P<0.05,##P<0.01,###P<0.001(Ⅱ期和Ⅲ期与Ⅰ期比较)
3 讨论
近期研究表明一些多肽类物质通过自分泌、旁分泌或神经分泌的作用，对血管张力起着重要的调节作用。NPY、ET和NO、NT、CGRP均被认为是体内最强的缩血管和舒血管活性物质〔1～4〕，对维持血压的动态平衡具有重要的意义。
, 百拇医药
本组资料显示EH患者血ET、NPY明显升高，NO、NT、CGRP则明显下降，并呈现Ⅲ期较Ⅱ、Ⅰ期高血压明显的趋势，与文献报道结果一致〔4～8〕，提示ET、NPY水平增高，NO、NT、CGRP水平下降在EH的发病机理中可能起着重要作用。血ET、NPY水平增高可引起外周血管持续痉挛，血压升高。ET的这种生物学效应是通过激活L型电压依赖型钙通道，使血管平滑肌细胞内钙离子超负荷，平滑肌细胞收缩而实现的的〔9〕。而NPY引起血管收缩作用可能是由分布于血管周围的神经末梢分泌增加，经血循环以激素样方式直接作用血管内皮细胞，改变其血管活性物质如ET等物质的分泌与释放〔5〕及激活血管内皮细胞中花生四烯酸机制，产生缩血管物质血栓烷素2(TXA2)增多有关〔6〕。另外NO、NT、CGRP的水平降低，更加强了ET、NPY的缩血管作用，从而促进了EH的发生、发展。血NO水平的降低和EH患者体内存在着L-Arg-NO途径内皮合成功能障碍有关〔7〕，而NT、CGRP水平降低则可能与EH患者脊髓背根神经节神经细胞体内这些物质的合成和释放减少有关〔4，8〕。
, 百拇医药
相关分析显示EH患者血ET与CGRP、ET与NO、NPY与NT之间均呈显著负相关(P<0.01)，而且血压越高，这种变化就越明显，提示它们之间在EH的病理生理过程中有一种相互影响、相互制约、动态平衡的关系，这种平衡关系的破坏可能参与了EH的发生、发展，但它们之间的确切关系，尚有待进一步探讨。
本研究还发现EH患者血TNF水平较正常人明显升高，其升高程度与EH的严重程度相关，机制尚不清楚。TNF由激活的单核细胞、巨噬细胞、淋巴细胞产生，具有广泛的生物学效应。增多的TNF对血管内皮细胞可产生直接细胞毒作用，促进中性粒细胞脱颗粒及氧化代谢，加速脂质过氧化，破坏内皮细胞结构和功能的完整性〔10〕，使内皮细胞分泌血管活性物质平衡失调。舒血管物质NO等合成与释放减少，ET等缩血管物质分泌增多〔11，12〕，从而间接促进了血管收缩，外周阻力增高，造成高血压靶器官微血管收缩和低灌注状态。另外TNF与ET、NPY呈正相关，与NO、NT、CGRP呈负相关，且这种变化与EH的严重程度平行，似提示TNF可能促进了ET、NPY的分泌，而抑制NO、NT、CGRP的合成。尽管其机理目前尚不清楚，但我们推测TNF可能参与了EH的发生、发展过程，因此寻找抑制TNF释放或拮抗其生物活性的措施，将为临床EH的治疗开辟新的途径。
, http://www.100md.com
该项目为铁道部科研课题(编号：980555)
作者单位：王永志(乌鲁木齐铁路局中心医院，乌鲁木齐，830011)
陈炜(乌鲁木齐铁路局中心医院，乌鲁木齐，830011)
邢红云(乌鲁木齐铁路局中心医院，乌鲁木齐，830011)
王焱(乌鲁木齐铁路局中心医院，乌鲁木齐，830011)
游碧荣(乌鲁木齐铁路局中心医院，乌鲁木齐，830011)
蒋和平(乌鲁木齐铁路局中心医院，乌鲁木齐，830011)
李斌娟(乌鲁木齐铁路局中心医院，乌鲁木齐，830011)
, 百拇医药
参考文献：
〔1〕Nankervis CA,Novicki PT.Role of nitric oxide in regulation of vascular resistance in postnatal intestine〔J〕.Am J Physiol,1995,268∶G949.
〔2〕Rosefeld MG,Mermod JJ,Amara SG,et al.Produced of a novel neuropeptid encoded by the calcitonin gene via tissue-specific RNA processing〔J〕.Nature,1983,304∶129.
〔3〕Shichiri M,Hirata Y,Ando K,et al.Plasma endothelin levels in hypertension and chronic renal failure〔J〕.Hypertension,1990,15∶493.
, 百拇医药
〔4〕Danger JM.The neuroendocrine function of neuropeptide Y and neurotensin〔J〕.Fundam Clin Phamacol,1996,10(4)∶208.
〔5〕Kawamura K,Smith TL,Oi Zhou,et al.NPY stimulates prostacyclin production in vascular endothelial cells〔J〕.Biochem Biophys Res Commun,1991,179(1)∶309.
〔6〕Martin SE,Kuvin JT,Offenbacher S,et al.Neuropeptide Y and coronary vasoconstriction,Role of thromboxane A2〔J〕.Am J Physiol,1993,263(H1)∶045.
, 百拇医药
〔7〕魏玲，张崇德，徐贵丽，等.高血压患者血浆一氧化氮含量动态血压的关系〔J〕.中国高血压杂志，1998，6(2)∶177.
〔8〕Supowit SC,Ramcma CV,Wwstlund KN,et al.Calcitonin gene-related peptide gene expression in the spontaneously hypertensive rat〔J〕.Hypertension.1993,21(part 2)∶1010.
〔9〕Vierhapper H,Wager O,Nowotny P,et al.Effect of endothelin-1 in man〔J〕.Circulation,1990,812∶1415.
〔10〕Davies MJ,Woolf N.Atherosclerosis:what is it and why does it occur〔J〕?Br Heart J,1993,69(Suppl)∶S3.
〔11〕Davies MG,Hagen PO.The vascular endothelium〔J〕.Ann Surg,1993,218∶593.
〔12〕Drexler H,Zeiher AM.Endothelial function in human coronary arteries in vivo〔J〕.Hypertension,1991,18(SupplⅡ)∶90., http://www.100md.com
摘 要： 目的：探讨肿瘤坏死因子(TNF)、一氧化氮(NO)、内皮素(ET)、神经肽Y(NPY)、神经降压素(NT)、降钙素基因相关肽(CGRP)在原发性高血压病(EH)发病中的作用。方法：采用化学比色法及放免法检测了50例EH患者及50例健康者外周血TNF、NO、ET、NPY、NT及CGRP水平。结果：EH患者TNF、ET、NPY水平明显高于正常人(P<0.001)，而NO、NT、CGRP水平则低于正常人(P<0.01)，这种变化与EH的严重程度相关。另外EH组TNF与ET、NPY呈正相关(P<0.01)，与NO、CGRP、NT呈负相关。结论：TNF、NO、ET、NPY、NT、CGRP在EH的发病中可能起重要作用。
关键词：原发性高血压病 肿瘤坏死因子 NO 内皮素 神经肽Y 神经降压素 降钙素基因相关肽
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本研究对原发性高血压病(EH)患者外周血肿瘤坏死因子(TNF)、一氧化氮(NO)、内皮素(ET)、神经肽Y(NPY)、神经降压素(NT)和降钙素基因相关肽(CGRP)水平进行了测定，旨在探讨其在EH发病中的可能作用。
1 对象和方法
1.1 对象 符合1993年WHO/ISH原发性高血压病诊断标准的EH患者50例，男30例，女20例，年龄35～78(58.1±11.9)岁。其中Ⅰ期12例、Ⅱ期29例、Ⅲ期9例。均经详细询问病史、体检和相关实验室检查排除继发性高血压、周围血管等疾病。另选年龄、性别相匹配的健康体检者50例为对照。
1.2 方法 未服用任何降压剂或停服降压剂5个半衰期后的EH患者和对照组均在空腹12小时后1次采血，取3 ml置玻管静置2小时后，离心10分钟(3 000 rpm/min)取血清；另取5 ml置于含10%EDTA-Na2 50 μl和抑肽酶80 μl的玻管中，于4℃离心10分钟(3 000 rpm/min)分离上层血浆。血清和血浆均贮存于-70℃冰箱保存待测。NO采用化学比色法，仪器采用意大利产半自动生化分析仪，试剂盒由南京聚力生物医学工程研究所提供。TNF、NPY、NT、ET、CGRP均采用放免法。仪器采用国产206厂产全自动γ免疫计数仪，试剂盒由中国人民解放军总医院东亚免疫研究所提供，具体操作方法均严格按说明书进行。各项质控指标均符合要求，批内差异7.1%～8.2%，批间差异8.9%～11.7%。
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1.3 统计学处理 数据以X±S表示，组内及组间比较采用t检验及F检验。相关系数采用直线相关分析求出。
2 结果
统计学分析提示EH组TNF、ET、NPY水平明显高于对照组(P<0.001)，而NO、NT、CGRP则低于健康人。这种变化同EH的严重程度相关。相关分析表明EH组TNF与ET、NPY呈正相关(r=0.65、0.56、P<0.01)，而与NO、CGRP、NT呈负相关(r=-0.71、-0.66、-0.52、P<0.01)，详见表1。
表1 高血压病患者6种血管活性物质浓度的测定结果
组别
例数
NO(nmol/ml)
, 百拇医药
TNF-α(ng/ml)
ET(pg/ml)
CGRP(pg/ml)
NPY(pg/ml)
NT(pg/ml)
正常组
50
46.64±20.20
0.43±0.16
52.32±23.67
39.04±14.57
74.30±21.46
, 百拇医药
70.65±24.26
高血压病组
50
26.87±9.96**
1.12±0.46***
87.29±36.84***
27.74±6.35*
124.00±29.67***
60.01±22.81*
Ⅰ期
, 百拇医药
12
36.48±11.02*
1.04±0.39**
70.89±28.32**
34.86±9.47
108.27±32.95**
59.02±21.82
Ⅱ期
29
25.09±8.71**#
, 百拇医药
1.24±0.36***##
84.51±30.09***#
28.03±8.91*#
127.16±30.98***##
57.69±20.77*
Ⅲ期
9
14.25±6.79***##
1.37±0.48***##
, 百拇医药 98.42±33.76***##
21.56±8.74**##
149.62±31.54***###
52.82±19.90**#
注：组间比较*P<0.05，**P<0.01，***P<0.001；各期比较#P<0.05,##P<0.01,###P<0.001(Ⅱ期和Ⅲ期与Ⅰ期比较)
3 讨论
近期研究表明一些多肽类物质通过自分泌、旁分泌或神经分泌的作用，对血管张力起着重要的调节作用。NPY、ET和NO、NT、CGRP均被认为是体内最强的缩血管和舒血管活性物质〔1～4〕，对维持血压的动态平衡具有重要的意义。
, 百拇医药
本组资料显示EH患者血ET、NPY明显升高，NO、NT、CGRP则明显下降，并呈现Ⅲ期较Ⅱ、Ⅰ期高血压明显的趋势，与文献报道结果一致〔4～8〕，提示ET、NPY水平增高，NO、NT、CGRP水平下降在EH的发病机理中可能起着重要作用。血ET、NPY水平增高可引起外周血管持续痉挛，血压升高。ET的这种生物学效应是通过激活L型电压依赖型钙通道，使血管平滑肌细胞内钙离子超负荷，平滑肌细胞收缩而实现的的〔9〕。而NPY引起血管收缩作用可能是由分布于血管周围的神经末梢分泌增加，经血循环以激素样方式直接作用血管内皮细胞，改变其血管活性物质如ET等物质的分泌与释放〔5〕及激活血管内皮细胞中花生四烯酸机制，产生缩血管物质血栓烷素2(TXA2)增多有关〔6〕。另外NO、NT、CGRP的水平降低，更加强了ET、NPY的缩血管作用，从而促进了EH的发生、发展。血NO水平的降低和EH患者体内存在着L-Arg-NO途径内皮合成功能障碍有关〔7〕，而NT、CGRP水平降低则可能与EH患者脊髓背根神经节神经细胞体内这些物质的合成和释放减少有关〔4，8〕。
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相关分析显示EH患者血ET与CGRP、ET与NO、NPY与NT之间均呈显著负相关(P<0.01)，而且血压越高，这种变化就越明显，提示它们之间在EH的病理生理过程中有一种相互影响、相互制约、动态平衡的关系，这种平衡关系的破坏可能参与了EH的发生、发展，但它们之间的确切关系，尚有待进一步探讨。
本研究还发现EH患者血TNF水平较正常人明显升高，其升高程度与EH的严重程度相关，机制尚不清楚。TNF由激活的单核细胞、巨噬细胞、淋巴细胞产生，具有广泛的生物学效应。增多的TNF对血管内皮细胞可产生直接细胞毒作用，促进中性粒细胞脱颗粒及氧化代谢，加速脂质过氧化，破坏内皮细胞结构和功能的完整性〔10〕，使内皮细胞分泌血管活性物质平衡失调。舒血管物质NO等合成与释放减少，ET等缩血管物质分泌增多〔11，12〕，从而间接促进了血管收缩，外周阻力增高，造成高血压靶器官微血管收缩和低灌注状态。另外TNF与ET、NPY呈正相关，与NO、NT、CGRP呈负相关，且这种变化与EH的严重程度平行，似提示TNF可能促进了ET、NPY的分泌，而抑制NO、NT、CGRP的合成。尽管其机理目前尚不清楚，但我们推测TNF可能参与了EH的发生、发展过程，因此寻找抑制TNF释放或拮抗其生物活性的措施，将为临床EH的治疗开辟新的途径。
, http://www.100md.com
该项目为铁道部科研课题(编号：980555)
作者单位：王永志(乌鲁木齐铁路局中心医院，乌鲁木齐，830011)
陈炜(乌鲁木齐铁路局中心医院，乌鲁木齐，830011)
邢红云(乌鲁木齐铁路局中心医院，乌鲁木齐，830011)
王焱(乌鲁木齐铁路局中心医院，乌鲁木齐，830011)
游碧荣(乌鲁木齐铁路局中心医院，乌鲁木齐，830011)
蒋和平(乌鲁木齐铁路局中心医院，乌鲁木齐，830011)
李斌娟(乌鲁木齐铁路局中心医院，乌鲁木齐，830011)
, 百拇医药
参考文献：
〔1〕Nankervis CA,Novicki PT.Role of nitric oxide in regulation of vascular resistance in postnatal intestine〔J〕.Am J Physiol,1995,268∶G949.
〔2〕Rosefeld MG,Mermod JJ,Amara SG,et al.Produced of a novel neuropeptid encoded by the calcitonin gene via tissue-specific RNA processing〔J〕.Nature,1983,304∶129.
〔3〕Shichiri M,Hirata Y,Ando K,et al.Plasma endothelin levels in hypertension and chronic renal failure〔J〕.Hypertension,1990,15∶493.
, 百拇医药
〔4〕Danger JM.The neuroendocrine function of neuropeptide Y and neurotensin〔J〕.Fundam Clin Phamacol,1996,10(4)∶208.
〔5〕Kawamura K,Smith TL,Oi Zhou,et al.NPY stimulates prostacyclin production in vascular endothelial cells〔J〕.Biochem Biophys Res Commun,1991,179(1)∶309.
〔6〕Martin SE,Kuvin JT,Offenbacher S,et al.Neuropeptide Y and coronary vasoconstriction,Role of thromboxane A2〔J〕.Am J Physiol,1993,263(H1)∶045.
, 百拇医药
〔7〕魏玲，张崇德，徐贵丽，等.高血压患者血浆一氧化氮含量动态血压的关系〔J〕.中国高血压杂志，1998，6(2)∶177.
〔8〕Supowit SC,Ramcma CV,Wwstlund KN,et al.Calcitonin gene-related peptide gene expression in the spontaneously hypertensive rat〔J〕.Hypertension.1993,21(part 2)∶1010.
〔9〕Vierhapper H,Wager O,Nowotny P,et al.Effect of endothelin-1 in man〔J〕.Circulation,1990,812∶1415.
〔10〕Davies MJ,Woolf N.Atherosclerosis:what is it and why does it occur〔J〕?Br Heart J,1993,69(Suppl)∶S3.
〔11〕Davies MG,Hagen PO.The vascular endothelium〔J〕.Ann Surg,1993,218∶593.
〔12〕Drexler H,Zeiher AM.Endothelial function in human coronary arteries in vivo〔J〕.Hypertension,1991,18(SupplⅡ)∶90., http://www.100md.com