脑脊液腺苷脱氨酶测定及对结核性脑膜炎的诊断意义
作者：邓健 袁亚莉 许金生 刘传湘 余治清
单位：邓健 袁亚莉 许金生 刘传湘(衡阳医学院化学教研室 421200)；易任德 余治清(衡阳市传染病医院)
关键词：结核性脑膜炎；腺苷脱氨酶；脑脊液
中国现代医学杂志000826 对氨试剂测定腺苷脱氨酶的方法进行了改进，并测定了95例病人脑脊液腺苷脱氨酶(ADA)活性，以探讨其对结核性脑膜炎的临床意义。病人分为4组：结核脑膜炎25例；病毒性脑膜炎43例；化脓性脑膜炎9例；其他疾病18例。结果分别为：(14.68±9.53)u/L、(3.38±0.96)u/L、(5.23±3.23)u/L及(2.99±1.32)u/L。结脑组与非结脑组相比差异非常显著(P<0.01)。若以6u/L为阳性界限值，脑脊液ADA检测对结脑病人的特异性为98.9%，敏感性96.0%。脑脊液ADA活性测定对于结脑与非结脑的诊断和鉴别诊断具有重要价值。改进后的脑脊液ADA测定方法更为简便、快速、灵敏，适合于临床常规检测。
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分类号 R529.3
为提高结核性脑膜炎(结脑)诊断的正确率，我们探讨了脑脊液腺苷脱氨酶测定对结核脑膜炎的诊断价值。现报告如下。
1 材料与方法
1.1 检测对象
患者均为住院病人，共95例。根据病史、临床症状、体征、胸片、OT试验、脑脊液常规和生化检查以及临床治疗效果，诊断为结核性脑膜炎(结脑)25例，其中男14例，女11例，年龄3个月～40岁，平均13.3岁；非结脑70例，包括病毒性脑膜炎(病脑)43例，化脓性脑膜炎(化脑)9例，其它疾病(蛛网膜下腔出血、流行性出血热、败血症、伤寒、肝炎、不明热等)18例，其中男41例，女29例，年龄6个月～61岁，平均10.2岁。被检脑脊液经离心取上清，当天测定或冰箱保存3d内测定。
1.2 仪器与试剂
, 百拇医药
723分光光度计(上海第三分析仪器厂)，电热恒温水浴箱(上海跃进医疗器械厂)。pH6.8的0.1mol/L磷酸盐缓冲液；8mmol/L腺苷基质液(用0.1mol/L pH6.8磷酸盐缓冲液配制)；硫酸铵标准液(含NH+4600μmol/L);显色剂1(含苯酚10g/L，亚硝酰铁氰化钠500mg/L)；显色剂2(含次氯酸钠0.01mol/L，氢氧化钠0.18mol/L)。
全部试剂均为分析纯，用无氨蒸馏水配制，所有器材和容器均用无氨水冲洗烘干后备用。
1.3 测定方法
按文献[1]方法加以改进。取4支10ml玻璃试管，分别标明空白、标准、测定和对照，在空白管加入无氨蒸馏水0.3ml，标准管加无氨蒸馏水0.25ml和硫酸铵标准液0.05ml，测定管加入脑脊液0.05ml及腺苷基质液0.25ml，对照管加入脑脊液0.05ml，混匀，置37℃水浴30min。各管分别加入显色剂1 1.5ml，对照管加入腺苷基质液0.25ml，各管再加入显色剂2 1.5ml，边加边混匀，37℃水浴20min。冷至室温，于635nm波长处以蒸馏水调零，测定各管吸光度。按下式计算ADA活力(以每升标本在37℃与底物作用1min产生1μmol氨为1个ADA活性单位u/L)：
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每管标本均做双份，取平均值报告结果。
1.5 统计学方法
实验数据以均值±标准差表示，样本均数间比较使用t检验，以P<0.05作为差异有显著性标准。
2 结果
四组共95例脑脊液ADA活性的测定见附表。
附表 各组脑脊液ADA活性比较 组别
例数
±s(u/L)
范围(u/L)
>6u/L例数
, 百拇医药
结脑
25
14.68±9.53
5.9～38.4
24
病脑
43
3.38±0.96
1.5～4.81)
0
化脑
9
5.23±3.23
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3.1～13.52)
1
其他
18
2.99±1.32
0.5～4.81)
0
注：1)与结脑组相比P<0.001
2)与结脑组相比P<0.01
3 讨论
腺苷脱氨酶是一种与机体细胞免疫系统有重要联系的核酸代谢酶类。王北宁[2]结核性脑膜炎患者的脊液中此酶活性升高。本组资料进一步证实结脑病人脊液ADA活性显著升高，与非结脑病人相比具有非常显著性差异。由表1可知，而25例非结脑病人除1例脑脊液ADA为5.9u/L外，其余24例均大于6u/L，均值达14.7u/L；而70例非结脑病人中仅1例化脑ADA超过6u/L(为13.5u/L)，若以6u/L为阳性界限值，脑脊液ADA活性测定对结脑诊断的阳性率(即敏感性)为96.0%，特异性98.9%。
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结脑的临床诊断和鉴别除依据症状和体征外，常作脑脊液的病原学及常规检查，但这些方法敏感性和特异性都不高[3]。本文结果表明，脑脊液ADA活性测定可作为结脑与非结脑诊断与鉴别诊断的重要指标。虽然ADA在结脑脊液中升高的机理尚不清楚，但此法敏感性强、特异性好、又不易受抗菌素治疗等因素的影响。经改进后的脑脊液ADA检测方法，不仅减少了试剂用量，缩短了反应时间，还提高了显色反应的灵敏度，操作更为简便快捷，适合于临床常规检测。
参 考 文 献
1，丁西满，丁若望，丁成才.结核性脑膜炎实验诊断的研究进展和临床评价.国外医学临床生化与检验学分册，1991；12(2)：65
2，中华人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程.南京：东南大学出版社，1991：211～212
3，王北宁，那学明.结核性脑膜炎脊液中腺苷脱氨酶活性的测定.中华结核和呼吸杂志，1988；11(5)：263
收稿：1998-12-16, 百拇医药
单位：邓健 袁亚莉 许金生 刘传湘(衡阳医学院化学教研室 421200)；易任德 余治清(衡阳市传染病医院)
关键词：结核性脑膜炎；腺苷脱氨酶；脑脊液
中国现代医学杂志000826 对氨试剂测定腺苷脱氨酶的方法进行了改进，并测定了95例病人脑脊液腺苷脱氨酶(ADA)活性，以探讨其对结核性脑膜炎的临床意义。病人分为4组：结核脑膜炎25例；病毒性脑膜炎43例；化脓性脑膜炎9例；其他疾病18例。结果分别为：(14.68±9.53)u/L、(3.38±0.96)u/L、(5.23±3.23)u/L及(2.99±1.32)u/L。结脑组与非结脑组相比差异非常显著(P<0.01)。若以6u/L为阳性界限值，脑脊液ADA检测对结脑病人的特异性为98.9%，敏感性96.0%。脑脊液ADA活性测定对于结脑与非结脑的诊断和鉴别诊断具有重要价值。改进后的脑脊液ADA测定方法更为简便、快速、灵敏，适合于临床常规检测。
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分类号 R529.3
为提高结核性脑膜炎(结脑)诊断的正确率，我们探讨了脑脊液腺苷脱氨酶测定对结核脑膜炎的诊断价值。现报告如下。
1 材料与方法
1.1 检测对象
患者均为住院病人，共95例。根据病史、临床症状、体征、胸片、OT试验、脑脊液常规和生化检查以及临床治疗效果，诊断为结核性脑膜炎(结脑)25例，其中男14例，女11例，年龄3个月～40岁，平均13.3岁；非结脑70例，包括病毒性脑膜炎(病脑)43例，化脓性脑膜炎(化脑)9例，其它疾病(蛛网膜下腔出血、流行性出血热、败血症、伤寒、肝炎、不明热等)18例，其中男41例，女29例，年龄6个月～61岁，平均10.2岁。被检脑脊液经离心取上清，当天测定或冰箱保存3d内测定。
1.2 仪器与试剂
, 百拇医药
723分光光度计(上海第三分析仪器厂)，电热恒温水浴箱(上海跃进医疗器械厂)。pH6.8的0.1mol/L磷酸盐缓冲液；8mmol/L腺苷基质液(用0.1mol/L pH6.8磷酸盐缓冲液配制)；硫酸铵标准液(含NH+4600μmol/L);显色剂1(含苯酚10g/L，亚硝酰铁氰化钠500mg/L)；显色剂2(含次氯酸钠0.01mol/L，氢氧化钠0.18mol/L)。
全部试剂均为分析纯，用无氨蒸馏水配制，所有器材和容器均用无氨水冲洗烘干后备用。
1.3 测定方法
按文献[1]方法加以改进。取4支10ml玻璃试管，分别标明空白、标准、测定和对照，在空白管加入无氨蒸馏水0.3ml，标准管加无氨蒸馏水0.25ml和硫酸铵标准液0.05ml，测定管加入脑脊液0.05ml及腺苷基质液0.25ml，对照管加入脑脊液0.05ml，混匀，置37℃水浴30min。各管分别加入显色剂1 1.5ml，对照管加入腺苷基质液0.25ml，各管再加入显色剂2 1.5ml，边加边混匀，37℃水浴20min。冷至室温，于635nm波长处以蒸馏水调零，测定各管吸光度。按下式计算ADA活力(以每升标本在37℃与底物作用1min产生1μmol氨为1个ADA活性单位u/L)：
, http://www.100md.com
每管标本均做双份，取平均值报告结果。
1.5 统计学方法
实验数据以均值±标准差表示，样本均数间比较使用t检验，以P<0.05作为差异有显著性标准。
2 结果
四组共95例脑脊液ADA活性的测定见附表。
附表 各组脑脊液ADA活性比较 组别
例数
±s(u/L)范围(u/L)
>6u/L例数
, 百拇医药
结脑
25
14.68±9.53
5.9～38.4
24
病脑
43
3.38±0.96
1.5～4.81)
0
化脑
9
5.23±3.23
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3.1～13.52)
1
其他
18
2.99±1.32
0.5～4.81)
0
注：1)与结脑组相比P<0.001
2)与结脑组相比P<0.01
3 讨论
腺苷脱氨酶是一种与机体细胞免疫系统有重要联系的核酸代谢酶类。王北宁[2]结核性脑膜炎患者的脊液中此酶活性升高。本组资料进一步证实结脑病人脊液ADA活性显著升高，与非结脑病人相比具有非常显著性差异。由表1可知，而25例非结脑病人除1例脑脊液ADA为5.9u/L外，其余24例均大于6u/L，均值达14.7u/L；而70例非结脑病人中仅1例化脑ADA超过6u/L(为13.5u/L)，若以6u/L为阳性界限值，脑脊液ADA活性测定对结脑诊断的阳性率(即敏感性)为96.0%，特异性98.9%。
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结脑的临床诊断和鉴别除依据症状和体征外，常作脑脊液的病原学及常规检查，但这些方法敏感性和特异性都不高[3]。本文结果表明，脑脊液ADA活性测定可作为结脑与非结脑诊断与鉴别诊断的重要指标。虽然ADA在结脑脊液中升高的机理尚不清楚，但此法敏感性强、特异性好、又不易受抗菌素治疗等因素的影响。经改进后的脑脊液ADA检测方法，不仅减少了试剂用量，缩短了反应时间，还提高了显色反应的灵敏度，操作更为简便快捷，适合于临床常规检测。
参 考 文 献
1，丁西满，丁若望，丁成才.结核性脑膜炎实验诊断的研究进展和临床评价.国外医学临床生化与检验学分册，1991；12(2)：65
2，中华人民共和国卫生部医政司编.全国临床检验操作规程.南京：东南大学出版社，1991：211～212
3，王北宁，那学明.结核性脑膜炎脊液中腺苷脱氨酶活性的测定.中华结核和呼吸杂志，1988；11(5)：263
收稿：1998-12-16, 百拇医药