系统性红斑狼疮患者血浆NO浓度与其免疫功能的关系
作者：闻颖 齐桂云 刘险夷
单位：哈尔滨医科大学附属第二医院，150086
关键词：
中国急救医学000825 一氧化氮(NO)是近年来发现的一种具有双重作用的信使分子和毒性分子，在多个系统的生理病理过程中起着重要的作用[1]。近年研究证实一氧化氮参与自身免疫病发病机制，并且与小鼠样综合征的致病机制有关。为此，我们测定了35例SLE患者血浆NO的浓度变化，探讨了NO与SLE发病以及与各项免疫指标的关系。
1 资料与方法
1.1 对象 35名SLE患者均为本院风湿科住院患者，女性32名，男性3名。诊断符合美国风湿病学会(ARA)1982年标准[2]。活动期20名，年龄18～45岁，平均30.87岁；非活动期15例，年龄20～42岁，平均30.93岁。
, http://www.100md.com
随机选择健康献血员30名，年龄20～40岁，平均年龄29.3岁，男性10名，女性20名。
1.2 方法 全部受检对象于清晨空腹时静脉采血，肝素钠抗凝血5 ml分离血浆，全血3 ml分离血清。将血浆、血清编号置-70 ℃保存待测。NO采用分光光度计比色法测定(试剂盒由南京聚力生物工程公司提供)；抗dsDNA抗体采用放射免疫分析法(试剂盒由北京原子能科学研究院提供)；免疫球蛋白、补体由自动蛋白分析仪测定。
1.3 统计学处理 病例选择采取顺序随机选择方法，所有实验结果均以平均数±标准差表示，即
±s。组间差异以组间t检验判别，相关分析用简单直线相关分析。
2 结果
2.1 SLE患者血浆NO水平较正常人明显增加，活动期SLE患者血浆NO水平显著高于非活动期。
, 百拇医药
2.2 SLE患者血浆NO水平与IgG呈显著正相关，与抗dsDNA抗体呈显著正相关，与补体C3、C4无显著相关关系。
表1 SLE患者及正常人血浆NO
含量(±s)的比较 分 组
例数(n)
血浆NO(umol/L)
P值
对照组
30
65.71±12.01
SLE活动期
, http://www.100md.com
20
144.5±26.83**
<0.05*
SLE非活动期
15
90.12±10.27*
<0.05**
*与对照组比较，**与非活动组比较表2 SLE患者血浆NO与血清各项免疫指标的关系[r值]
n
IgG
, 百拇医药 IgA
IgM
C3
C4
AntidsDNAab
NO
35
0.569
0.107
0.285
-0.301
-0.247
0.804
, 百拇医药
P值
<0.05
>0.05
>0.05
>0.05
>0.05
<0.05
3 讨论
NO是由一氧化氮合酶(NOS)催化L-精氨酸(L-Arg)而生成的，NO含量变化及其保护或毒性作用的发挥主要取决于NO合酶类型。原生型(cNOS)无需诱导而生成，引起NO短暂释放，其生物学效应以细胞间信息传递为主。诱生型(iNOS)需诱导产生，能引起长时间NO释放[3]，其生物学效应以细胞毒性作用为主[4，5]。关于SLE与NO的关系研究首先是在狼疮鼠MRL/lpr中进行的。研究发现MRL/lpr鼠较正常鼠尿中亚硝酸盐明显提高，腹腔巨噬细胞增加，iNOS表达增强。L-NMMA可预防MRL/lpr鼠肾炎和关节炎，证明NO与狼疮鼠MRL/lpr发病有关。而MRL/lpr可以发展为类似人SLE的自身免疫病，也存在大量自身抗体。
, 百拇医药
本研究结果显示SLE患者血浆NO水平显著高于健康人，证明NO确参与SLE的疾病过程。SLE中M、中性粒细胞及血管内皮细胞在某些细胞因子作用下，iNOS基因被激活而生成iNOS，引起长时间NO释放，所以SLE中的NO主要起细胞毒性作用。目前推测，NO在SLE中的致病机制可能有如下几个方面。①直接细胞毒性作用造成机体损伤，或者导致大量变性DNA产生，产生大量自身抗体。②NO抑制粒细胞活性，诱导粒细胞凋亡，抑制吞噬细胞释放促炎介质；同时NO还抑制T细胞增殖和IL-2释放，阻止T辅助细胞(TH)分化为TH1细胞，导致细胞免疫功能低下。引起免疫功能紊乱，大量自身抗体产生。③NO大量释放可使淋巴细胞等凋亡，释放大量核抗原，产生高水平自身抗体。本实验结果表明，NO与SLE疾病严重程度及血清抗dsDNA抗体、IgG呈显著正相关，与IgM、IgA及补体C3、C4无显著相关关系。说明NO介导SLE自身抗体产生，自身抗体以IgG型为主。NO在SLE免疫病理损伤的炎症反应中比较复杂，故未见与补体有显著相关性，或者实验例数少不能说明问题。
, 百拇医药 [参考文献]
[1]Kooy N W， Royall J A， Ye Yz， et al.Evidence for in vivo peroxynitrite production in human acute lung injury.Am Respir Crit Care Med ,1995,151:1250.
[2]Tan EM,Cohen AS,Fries JF.The 1982 revised criteria for the classification of Systemic Lupus Erythematosus.Arthritic Rheum,1982,25:1271.
[3]Xie Q W,Nathan C.The high-output nitric pathway:role and regulation.J Leuk Biol,1994,56:576-582.
[4]Choi D W.Nitric oxide:foe or friend to injured beain.Proc Natl Acad Sci USA,1993,90:9741-9743.
[5]Dawson T M,Dawson V L,Snyder S H.A novel neuronal messenger molecular in brain:the free radical nitric oxide.Ann Neurol,1992,32(3):297-311.
[收稿：1999-03-10，修回：1999-11-18], 百拇医药
单位：哈尔滨医科大学附属第二医院，150086
关键词：
中国急救医学000825 一氧化氮(NO)是近年来发现的一种具有双重作用的信使分子和毒性分子，在多个系统的生理病理过程中起着重要的作用[1]。近年研究证实一氧化氮参与自身免疫病发病机制，并且与小鼠样综合征的致病机制有关。为此，我们测定了35例SLE患者血浆NO的浓度变化，探讨了NO与SLE发病以及与各项免疫指标的关系。
1 资料与方法
1.1 对象 35名SLE患者均为本院风湿科住院患者，女性32名，男性3名。诊断符合美国风湿病学会(ARA)1982年标准[2]。活动期20名，年龄18～45岁，平均30.87岁；非活动期15例，年龄20～42岁，平均30.93岁。
, http://www.100md.com
随机选择健康献血员30名，年龄20～40岁，平均年龄29.3岁，男性10名，女性20名。
1.2 方法 全部受检对象于清晨空腹时静脉采血，肝素钠抗凝血5 ml分离血浆，全血3 ml分离血清。将血浆、血清编号置-70 ℃保存待测。NO采用分光光度计比色法测定(试剂盒由南京聚力生物工程公司提供)；抗dsDNA抗体采用放射免疫分析法(试剂盒由北京原子能科学研究院提供)；免疫球蛋白、补体由自动蛋白分析仪测定。
1.3 统计学处理 病例选择采取顺序随机选择方法，所有实验结果均以平均数±标准差表示，即
±s。组间差异以组间t检验判别，相关分析用简单直线相关分析。2 结果
2.1 SLE患者血浆NO水平较正常人明显增加，活动期SLE患者血浆NO水平显著高于非活动期。
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2.2 SLE患者血浆NO水平与IgG呈显著正相关，与抗dsDNA抗体呈显著正相关，与补体C3、C4无显著相关关系。
表1 SLE患者及正常人血浆NO
含量(
±s)的比较 分 组例数(n)
血浆NO(umol/L)
P值
对照组
30
65.71±12.01
SLE活动期
, http://www.100md.com
20
144.5±26.83**
<0.05*
SLE非活动期
15
90.12±10.27*
<0.05**
*与对照组比较，**与非活动组比较表2 SLE患者血浆NO与血清各项免疫指标的关系[r值]
n
IgG
, 百拇医药 IgA
IgM
C3
C4
AntidsDNAab
NO
35
0.569
0.107
0.285
-0.301
-0.247
0.804
, 百拇医药
P值
<0.05
>0.05
>0.05
>0.05
>0.05
<0.05
3 讨论
NO是由一氧化氮合酶(NOS)催化L-精氨酸(L-Arg)而生成的，NO含量变化及其保护或毒性作用的发挥主要取决于NO合酶类型。原生型(cNOS)无需诱导而生成，引起NO短暂释放，其生物学效应以细胞间信息传递为主。诱生型(iNOS)需诱导产生，能引起长时间NO释放[3]，其生物学效应以细胞毒性作用为主[4，5]。关于SLE与NO的关系研究首先是在狼疮鼠MRL/lpr中进行的。研究发现MRL/lpr鼠较正常鼠尿中亚硝酸盐明显提高，腹腔巨噬细胞增加，iNOS表达增强。L-NMMA可预防MRL/lpr鼠肾炎和关节炎，证明NO与狼疮鼠MRL/lpr发病有关。而MRL/lpr可以发展为类似人SLE的自身免疫病，也存在大量自身抗体。
, 百拇医药
本研究结果显示SLE患者血浆NO水平显著高于健康人，证明NO确参与SLE的疾病过程。SLE中M、中性粒细胞及血管内皮细胞在某些细胞因子作用下，iNOS基因被激活而生成iNOS，引起长时间NO释放，所以SLE中的NO主要起细胞毒性作用。目前推测，NO在SLE中的致病机制可能有如下几个方面。①直接细胞毒性作用造成机体损伤，或者导致大量变性DNA产生，产生大量自身抗体。②NO抑制粒细胞活性，诱导粒细胞凋亡，抑制吞噬细胞释放促炎介质；同时NO还抑制T细胞增殖和IL-2释放，阻止T辅助细胞(TH)分化为TH1细胞，导致细胞免疫功能低下。引起免疫功能紊乱，大量自身抗体产生。③NO大量释放可使淋巴细胞等凋亡，释放大量核抗原，产生高水平自身抗体。本实验结果表明，NO与SLE疾病严重程度及血清抗dsDNA抗体、IgG呈显著正相关，与IgM、IgA及补体C3、C4无显著相关关系。说明NO介导SLE自身抗体产生，自身抗体以IgG型为主。NO在SLE免疫病理损伤的炎症反应中比较复杂，故未见与补体有显著相关性，或者实验例数少不能说明问题。
, 百拇医药 [参考文献]
[1]Kooy N W， Royall J A， Ye Yz， et al.Evidence for in vivo peroxynitrite production in human acute lung injury.Am Respir Crit Care Med ,1995,151:1250.
[2]Tan EM,Cohen AS,Fries JF.The 1982 revised criteria for the classification of Systemic Lupus Erythematosus.Arthritic Rheum,1982,25:1271.
[3]Xie Q W,Nathan C.The high-output nitric pathway:role and regulation.J Leuk Biol,1994,56:576-582.
[4]Choi D W.Nitric oxide:foe or friend to injured beain.Proc Natl Acad Sci USA,1993,90:9741-9743.
[5]Dawson T M,Dawson V L,Snyder S H.A novel neuronal messenger molecular in brain:the free radical nitric oxide.Ann Neurol,1992,32(3):297-311.
[收稿：1999-03-10，修回：1999-11-18], 百拇医药