［3H］-洛非西定在大鼠的绝对生物利用度
鲁澄宇 李红 杨世杰 杜雪荣
摘 要 目的 研究了[3H]-洛非西定的吸收和绝对生物利用度。方法 分二剂量组(0.2 mg.kg-1, 0.05 mg.kg-1),用统计矩法测定po及iv给予大鼠 [3H]-洛非西定后的药物动力学参数, 计算生物利用度。结果 高剂量组绝对生物利用度F为54.0%; 低剂量F为54.7%。结论 口服给药后吸收较快，吸收率较高，药物吸收呈线性。
关键词：洛非西定 生物利用度 统计矩 薄层色谱法
洛非西定(lofexidine-HCl,LOF)为新型中枢性交感神经抑制药。它能选择性激活中枢α2受体，临床上可用于治疗高血压,以及吗啡、海洛因等成瘾后的戒毒治疗[1]。现国内已合成此药，为了给临床用药提供依据, 本实验测定大鼠po[3H]-LOF的绝对生物利用度。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 主要试药 洛非西定系吉林大学化学系合成,[3H]-洛非西定系北京原子能研究所曝射法标记，比活性为35.15 TBq.mmol-1, 放化纯度>95%, 溶于无水乙醇保存，用前将无水乙醇挥干, 用9 g.L-1 NaCl溶液稀释成适当浓度。2,5-二苯基恶唑(PPO)、1,4-双(5-苯基恶唑基-2)苯(POPOP):上海试剂一厂。
1.2 实验动物 ♂ Wistar大鼠，体重(201±22) g,由白求恩医科大学动物室提供。实验前禁食12 h，自由饮水。
1.3 血样中[3H]-LOF的分离和测定 大鼠尾静脉注射或灌胃给药后, 在预定时间断尾取血0.1 ml,加入酸性无水乙醇3 ml(pH≤5.9), 于旋涡震荡器上震荡3 min, 1 000×g离心10 min，取上清液2 ml于试管中,置于92℃水浴上减压蒸干，其残渣用50 μl无水乙醇溶解(内含LOF对照品6 mg.L-1),点样于GF254硅胶层析板(10 cm×20 cm),并在同一层析板上点上LOF对照品(6 mg.L-1)5 μl。层析板置于已预先饱和的层析槽中, 用展开剂(正丁醇∶冰乙酸∶水=80∶20∶20)[2]展开。 LOF对照品在紫外灯下呈暗红色, 刮取与LOF对照品等位点的硅胶, 置于含6 ml闪烁液(PPO,4 g; POPOP,0.4 g;无水乙醇,200 ml,甲苯加至1000 ml,放射效率为75%)的闪烁瓶中,用液体闪烁计数仪测定放射性强度。
, 百拇医药
1.4 [3H]-LOF在血中的绝对回收率、回归曲线 取空白大鼠血液12 ml,分成12等份，向每份血样中加入特定量的[3H]-LOF，制成药物浓度分别为4、2、1、2-1、 2-2、2-3、2-4、2-5、 2-6、2-7、2-8和2-9 mg.L-1的血样，按1.3所述方法经提取和分离测定样品放射性强度(cpm), 同时测定血样的总放射性强度。计算[3H]-LOF的绝对回收率为77.5%±1.8%。回归方程为：lgC=-2.2616+1.0359×lgA, r=0.991。其中，C为全血药物浓度(μg.L-1)，A为样品提取分离物的放射性强度(cpm)。
2 结果
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2.1 iv组血药时程 大鼠10只,随机分成两组，每组5只, 第1组每只鼠iv[3H]-LOF 0.2 mg.kg-1(相当于临床等效剂量的4倍), 第2组每只鼠各iv[3H]-LOF 0.05 mg.kg-1(相当于临床等效剂量的1倍)后，在2 min,5 min ,15 min,30 min, 1 h, 2 h, 4 h, 8 h, 24 h, 32 h, 48 h, 72 h时，断尾取血0.1 ml, 测定血样中[3H]-LOF的放射性强度，由回归方程换算为浓度(μg.L-1),结果绘成时-量曲线(见图1)。再分别用统计矩法[4]计算AUC,AUMC和MRT等参数。
, 百拇医药
Fig 1 Time-concentration curve of [3H]-lofexiding-HCl
●—●：iv 0.2 mg.kg-1；◆—◆：po 0.2 mg.kg-1；
○—○：iv 0.05 mg.kg-1；◇—◇：po 0.05 mg.kg-1
2.2 po组血药时程 大鼠10只随机分成两组, 每组5只,第1组每只鼠po[3H]-LOF 0.2 mg.kg-1；第2组每只鼠各po[3H]-LOF 0.05 mg.kg-1后,在5 min,15 min,30 min,1 h, 2 h, 4 h, 8 h, 24 h, 32 h, 48 h, 72 h 时,断尾取血0.1 ml,测定血样中[3H]-LOF的放射性强度，由回归方程换算为浓度(μg.L-1),结果绘成时-量曲线(见图1)。再分别用统计矩法计算AUC,AUMC和MRT等参数。
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2.3 [3H]-LOF的药物动力学参数 以po及iv后的时-量数据计算的药物动力学参数，见表1。
Tab 1 Pharmacokinetic parameters of [3H]-LOF by statistical moments (X±s,n=5)
Parameters
iv 0.2 mg.kg-1
po 0.2 mg.kg-1
iv 0.05 mg.kg-1
po 0.05 mg.kg-1
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AUC/ng.h.L-1
691.11±99.17
376.75±76.39
174.87±53.29
95.70± 21.30
AUC/X0
3455.55±495.85
1883.75±381.95
3497.40±1065.80
1914.00±426.01
, 百拇医药
AUMC
4580.01±610.71
3317.52±759.06
1149.34±322.70
806.01±201.44
MRT/h
7.09±1.32
8.77±2.10
6.64±1.25
8.43±1.97
MAT/h
, 百拇医药 1.69
1.79
F/%
54.0
54.7
iv组或po组的参数AUC/X0、MRT差异无显著性(P>0.05), 表明在本实验所用剂量范围内为线性动力学过程；两剂量组 [3H]-LOF的绝对生物利用度相近, 分别为54.0%和54.7%。平均吸收时间(MAT)两剂量组相近，表明药物的吸收过程也可能是线性的, 其数值表明药物的吸收速度较快。各给药组的MRT值(相当于房室模型中的T
)相近，反映药物的消除过程以一级动力学为主。
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3 讨论
大鼠单次po [3H]-LOF(0.05 mg.kg-1,0.2 mg.kg-1)后，绝对生物利用度为54.0%和 54.7%,表明可能存在明显的首过效应或有部分药物未被吸收, 而经消化道排出体外。此点与人的实验结果不同〔3〕,人口服[14C]-LOF(0.32 mg)后，经尿排出的总放射性占所给放射性的95%,表明至少95%的药物已被吸收,这可能与实验所用标记同位素不同, 以及人与啮齿类动物肠胃结构的差异及其胃肠排空速度的差异有关。
作者简介:鲁澄宇,男,31岁，博士生;
杨世杰,男,53岁,医学博士,药理学教研室主任,基础医学院、药学院副院长
鲁澄宇(白求恩医科大学药理学教研室，长春 130021)
, 百拇医药
李红(白求恩医科大学药理学教研室，长春 130021)
杨世杰(白求恩医科大学药理学教研室，长春 130021)
杜雪荣(第三临床学院中医科，长春 130021)
参考文献
1，Brown AS, Fleming PM. A naturalistic study of home detoxification from opiates using lofexidine. J Psychopharmacol， 1998; 12(1): 93～6
2，Wagener HH, Genthe H. Characteristics of lofexidune in pharmacological screening. Arzneim-forsch/Drug Res,1982; 32(Ⅱ):918～21
3，Midgley I, Chasseaud LF,Taylor T et al. The absorption and excretion of 14C-lofexidine hydrochloride in man. Arzneim-forsch/Drug Res， 1982；32(Ⅱ):972～4
4，蒋学华, 程小宁, 陈小锐 et al. 安克干糖浆的药动学与生物利用度.中国药学杂志， 1996； 31(12): 735～9, 百拇医药
摘 要 目的 研究了[3H]-洛非西定的吸收和绝对生物利用度。方法 分二剂量组(0.2 mg.kg-1, 0.05 mg.kg-1),用统计矩法测定po及iv给予大鼠 [3H]-洛非西定后的药物动力学参数, 计算生物利用度。结果 高剂量组绝对生物利用度F为54.0%; 低剂量F为54.7%。结论 口服给药后吸收较快，吸收率较高，药物吸收呈线性。
关键词：洛非西定 生物利用度 统计矩 薄层色谱法
洛非西定(lofexidine-HCl,LOF)为新型中枢性交感神经抑制药。它能选择性激活中枢α2受体，临床上可用于治疗高血压,以及吗啡、海洛因等成瘾后的戒毒治疗[1]。现国内已合成此药，为了给临床用药提供依据, 本实验测定大鼠po[3H]-LOF的绝对生物利用度。
, 百拇医药
1 材料与方法
1.1 主要试药 洛非西定系吉林大学化学系合成,[3H]-洛非西定系北京原子能研究所曝射法标记，比活性为35.15 TBq.mmol-1, 放化纯度>95%, 溶于无水乙醇保存，用前将无水乙醇挥干, 用9 g.L-1 NaCl溶液稀释成适当浓度。2,5-二苯基恶唑(PPO)、1,4-双(5-苯基恶唑基-2)苯(POPOP):上海试剂一厂。
1.2 实验动物 ♂ Wistar大鼠，体重(201±22) g,由白求恩医科大学动物室提供。实验前禁食12 h，自由饮水。
1.3 血样中[3H]-LOF的分离和测定 大鼠尾静脉注射或灌胃给药后, 在预定时间断尾取血0.1 ml,加入酸性无水乙醇3 ml(pH≤5.9), 于旋涡震荡器上震荡3 min, 1 000×g离心10 min，取上清液2 ml于试管中,置于92℃水浴上减压蒸干，其残渣用50 μl无水乙醇溶解(内含LOF对照品6 mg.L-1),点样于GF254硅胶层析板(10 cm×20 cm),并在同一层析板上点上LOF对照品(6 mg.L-1)5 μl。层析板置于已预先饱和的层析槽中, 用展开剂(正丁醇∶冰乙酸∶水=80∶20∶20)[2]展开。 LOF对照品在紫外灯下呈暗红色, 刮取与LOF对照品等位点的硅胶, 置于含6 ml闪烁液(PPO,4 g; POPOP,0.4 g;无水乙醇,200 ml,甲苯加至1000 ml,放射效率为75%)的闪烁瓶中,用液体闪烁计数仪测定放射性强度。
, 百拇医药
1.4 [3H]-LOF在血中的绝对回收率、回归曲线 取空白大鼠血液12 ml,分成12等份，向每份血样中加入特定量的[3H]-LOF，制成药物浓度分别为4、2、1、2-1、 2-2、2-3、2-4、2-5、 2-6、2-7、2-8和2-9 mg.L-1的血样，按1.3所述方法经提取和分离测定样品放射性强度(cpm), 同时测定血样的总放射性强度。计算[3H]-LOF的绝对回收率为77.5%±1.8%。回归方程为：lgC=-2.2616+1.0359×lgA, r=0.991。其中，C为全血药物浓度(μg.L-1)，A为样品提取分离物的放射性强度(cpm)。
2 结果
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2.1 iv组血药时程 大鼠10只,随机分成两组，每组5只, 第1组每只鼠iv[3H]-LOF 0.2 mg.kg-1(相当于临床等效剂量的4倍), 第2组每只鼠各iv[3H]-LOF 0.05 mg.kg-1(相当于临床等效剂量的1倍)后，在2 min,5 min ,15 min,30 min, 1 h, 2 h, 4 h, 8 h, 24 h, 32 h, 48 h, 72 h时，断尾取血0.1 ml, 测定血样中[3H]-LOF的放射性强度，由回归方程换算为浓度(μg.L-1),结果绘成时-量曲线(见图1)。再分别用统计矩法[4]计算AUC,AUMC和MRT等参数。
, 百拇医药
Fig 1 Time-concentration curve of [3H]-lofexiding-HCl
●—●：iv 0.2 mg.kg-1；◆—◆：po 0.2 mg.kg-1；
○—○：iv 0.05 mg.kg-1；◇—◇：po 0.05 mg.kg-1
2.2 po组血药时程 大鼠10只随机分成两组, 每组5只,第1组每只鼠po[3H]-LOF 0.2 mg.kg-1；第2组每只鼠各po[3H]-LOF 0.05 mg.kg-1后,在5 min,15 min,30 min,1 h, 2 h, 4 h, 8 h, 24 h, 32 h, 48 h, 72 h 时,断尾取血0.1 ml,测定血样中[3H]-LOF的放射性强度，由回归方程换算为浓度(μg.L-1),结果绘成时-量曲线(见图1)。再分别用统计矩法计算AUC,AUMC和MRT等参数。
, http://www.100md.com
2.3 [3H]-LOF的药物动力学参数 以po及iv后的时-量数据计算的药物动力学参数，见表1。
Tab 1 Pharmacokinetic parameters of [3H]-LOF by statistical moments (X±s,n=5)
Parameters
iv 0.2 mg.kg-1
po 0.2 mg.kg-1
iv 0.05 mg.kg-1
po 0.05 mg.kg-1
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AUC/ng.h.L-1
691.11±99.17
376.75±76.39
174.87±53.29
95.70± 21.30
AUC/X0
3455.55±495.85
1883.75±381.95
3497.40±1065.80
1914.00±426.01
, 百拇医药
AUMC
4580.01±610.71
3317.52±759.06
1149.34±322.70
806.01±201.44
MRT/h
7.09±1.32
8.77±2.10
6.64±1.25
8.43±1.97
MAT/h
, 百拇医药 1.69
1.79
F/%
54.0
54.7
iv组或po组的参数AUC/X0、MRT差异无显著性(P>0.05), 表明在本实验所用剂量范围内为线性动力学过程；两剂量组 [3H]-LOF的绝对生物利用度相近, 分别为54.0%和54.7%。平均吸收时间(MAT)两剂量组相近，表明药物的吸收过程也可能是线性的, 其数值表明药物的吸收速度较快。各给药组的MRT值(相当于房室模型中的T
)相近，反映药物的消除过程以一级动力学为主。, http://www.100md.com
3 讨论
大鼠单次po [3H]-LOF(0.05 mg.kg-1,0.2 mg.kg-1)后，绝对生物利用度为54.0%和 54.7%,表明可能存在明显的首过效应或有部分药物未被吸收, 而经消化道排出体外。此点与人的实验结果不同〔3〕,人口服[14C]-LOF(0.32 mg)后，经尿排出的总放射性占所给放射性的95%,表明至少95%的药物已被吸收,这可能与实验所用标记同位素不同, 以及人与啮齿类动物肠胃结构的差异及其胃肠排空速度的差异有关。
作者简介:鲁澄宇,男,31岁，博士生;
杨世杰,男,53岁,医学博士,药理学教研室主任,基础医学院、药学院副院长
鲁澄宇(白求恩医科大学药理学教研室，长春 130021)
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李红(白求恩医科大学药理学教研室，长春 130021)
杨世杰(白求恩医科大学药理学教研室，长春 130021)
杜雪荣(第三临床学院中医科，长春 130021)
参考文献
1，Brown AS, Fleming PM. A naturalistic study of home detoxification from opiates using lofexidine. J Psychopharmacol， 1998; 12(1): 93～6
2，Wagener HH, Genthe H. Characteristics of lofexidune in pharmacological screening. Arzneim-forsch/Drug Res,1982; 32(Ⅱ):918～21
3，Midgley I, Chasseaud LF,Taylor T et al. The absorption and excretion of 14C-lofexidine hydrochloride in man. Arzneim-forsch/Drug Res， 1982；32(Ⅱ):972～4
4，蒋学华, 程小宁, 陈小锐 et al. 安克干糖浆的药动学与生物利用度.中国药学杂志， 1996； 31(12): 735～9, 百拇医药