瓜蒌薤白白酒汤提取物抗心肌缺血缺氧及最佳处方的筛选
作者:吴波 陈思维 王敏伟 姜笑笈 李大凯 姚新生
单位:中国医科大学第一临床学院急诊科 沈阳110001
关键词:瓜蒌薤白白酒汤;缺氧;缺血
中草药001122 摘 要 目的:考察4种不同配比组方瓜蒌薤白白酒汤提取物抗心肌 缺 氧缺血及最佳处方的筛选。方法:采用异丙肾上腺素致小鼠常压缺氧模型、垂体后叶素致大 鼠急性心肌缺血模型。结果:4种不同配比组方瓜蒌薤白白酒汤提取物均能延长异丙肾上腺 素作用的小鼠常压缺氧存活时间,并能对抗垂体后叶素所致的大鼠急性心肌缺血作用。应用 正规机率单位法计算4种组方的半数有效量(ED50),处方1两个实验ED50都 最 小,处方1效果最佳。结论:4种不同配比组方瓜蒌薤白白酒汤提取物均能抗心肌缺氧缺血, 且处方1为最佳处方。
瓜蒌,薤白组成之方剂始见于汉代名医张仲景所著的《金匮要略》。其中瓜蒌薤白 白酒汤用于治疗“喘息咳唾,胸背痛 ,短气”,是我国中医用于治疗胸痹症的代表方剂,也是十多年来用于治疗冠心病、心绞痛 及心肌梗死的基本方剂之一,是一个 很价值的古方。近年来对该方中瓜蒌、薤白单味药的化学成分及药理研究较多,但对复方瓜 蒌、薤白的药理作用研究则未见报道[1,2]。不同医籍 记载的瓜蒌薤白白酒汤单味药的配比不相同,根据文献及多名老中医临床经验整理 中药专家选定的其中4种瓜蒌薤白白酒汤组成配比进行了最佳处方筛选[3,5] 。
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1 材料与方法
1.1 试药:瓜蒌薤白白酒汤的提取物(EFA):处方1 (EFA1),瓜蒌∶薤白为1.5∶1,每克 浸膏含药材量为3.33 g;处方2 (EFA2),瓜蒌∶薤白为1∶1,每克浸膏含药材量为3.64 g ;处方3 (EFA3),瓜蒌∶薤白为2∶1,每克浸膏含药材量为3.81 g;处方4 (EFA4)瓜 蒌∶ 薤白为1∶2,每克浸膏含药材量为3.41 g,由沈阳药科大学天然药物化学教研室提供,批 号分别为960117,960118,960119,960120。盐酸异丙肾上腺素,上海乔丰药厂产品,批号 为940901。钠石灰,北票矿务局氢氧化钙厂产品,批号为940714。戊巴比妥钠,UNION进口 分装,批号为860122。垂体后叶素注射药(Pit),上海第一生化药业公司产品,批号为950705 。
1.2 动物:昆明种小鼠,18~22 g,雄性,沈阳药科大学动物室提供,合格证号为辽实合 字018号。Wistar 大鼠,180~220 g,雌雄兼用,沈阳化工研究院农药评价中心提供,合格 证号为辽实合字001号。
, 百拇医药
1.3 仪器:ECG-6511型心电图机,上海光电医用电子仪器有限公司产品。
2 方法和结果
2.1 小鼠常压耐缺氧实验[6,7]:雄性小鼠禁食12 h后,随机分为21组,即生理 盐水组及4个处方各自均分为5个剂量组,每组10只小鼠,处方1,2,3提取物,组间剂量比 值1∶0.75;处方4提取物,组间剂量比值1∶0.8,各组小鼠分别ig等容积不同剂量的EFA 各处方(剂量均以所含原生药量计算,下同)。对照组给与等容积溶媒。40 min后ip异丙肾上 腺素20 mg/kg,15 min后将小鼠放入330 mL磨口瓶中,预先在瓶中放入10 g钠石灰,密封加 盖,记录小鼠的存活时间。
结果4种不同配比组方的EFA均能对抗异丙肾上腺素作用的小鼠常压缺氧作用,延长小鼠在常 压低氧状态下的存活时间。生理盐水组存活时间为(36.4±6.0) min,根据预试,设给药 组标准差为8.0。当P<0.05时,求得给药组X为43.0 min的小鼠即为有效,计算各组有效率。按正规法计算各配比组方EFA的半数有效量(ED 50)。由小到大依次为:EFA1 (35.1 g/kg) < EFA3 (48.6 g/kg) < EFA2 (50.4 g /kg)< EFA4 (52.0 g/kg)。由此可知,EFAI最佳。见表1。
, 百拇医药
2.2 垂体后叶素所致大鼠急性心肌缺血实验[7,8]:大鼠(雌雄兼用)禁食8 h后 ,随机分为20组,各处 方均分成5个剂量组,每组10只。各组分别ig不同处方不同的EFA剂量或等容积溶媒,60 min后ip
表1 4种不同配比组方的EFA对小鼠常压耐缺氧
实验结果(±s,n=10)
组别
剂量
(g/kg)
存活时间(min)
有效率
, 百拇医药
(%)
ED50
(g/kg)
对照
-
36.4±6.0
EFA1
21.1
33.8±8.0
10
35.1
28.1
41.8±10.6
, http://www.100md.com
40
37.5
44.9±10.2*
50
50.0
46.6±7.6**
80
66.6
52.5±9.4**
90
EFA2
24.8
, http://www.100md.com
38.2±5.1
10
50.4△
32.8
39.1±10.1
40
43.7
45.4±13.0
40
54.6
56.5±21.7
50
, 百拇医药 72.8
58.0±10.6
70
EFA3
25.9
34.0±6.6
10
48.6
34.3
38.5±8.6
40
45.7
41.0±9.7
, http://www.100md.com
50
57.2
43.1±13.1
60
76.2
44.9±7.7*
70
EFA4
32.7
35.0±8.4
10
52.0△△
, http://www.100md.com
40.9
36.1±10.6
30
51.2
45.2±8.5**
40
68.2
51.6±16.8*
70
81.8
59.2±16.7**
90
, 百拇医药
与对照组比较:*P<0.05 **P<0.01
与EFA1比较:△P<0.05 △△P<0.01
戊巴比妥钠 35 mg/kg。待麻醉后,仰位固定于鼠台上,记录胸V Ⅱ导联正常心电图。麻醉30 min后,分别舌下iv垂体后叶素0.8 U/kg,10 s注完。注射后 立 即记录0,15,30 min及1,3,8 h时心电图,观察各期心电图变化。一周后,再分别ig不同 处方不同剂量的EFA,重复上述实验过程,以未出现T波低平,倒置或双向为有效,计算各组 有效率,按正规法求出各处方的ED50。
结果4种不同配比组方的EFA均能对抗垂体后叶素所致大鼠急性心肌缺血,按正规法计算4种E FA的DE50,由小到大顺序为EFA1 (15.26 g/kg) , 百拇医药
从表1,2实验结果可知,EFA1为最佳处方。
3 讨论
胸痹症主要是由心肌缺氧、缺血所引起的[9]。心肌缺氧的解决办法有两条:① 增加供氧,②减少氧耗,或两者兼用。当心肌氧需增高时,主要是依靠冠脉流量增加来提高 氧的供应。但在某种特定情况下,依靠这种途径作为唯一的治疗原则,难以奏效。如冠 脉粥 样硬化时,除管腔狭窄妨碍血流通过外,由于管壁硬化舒缩能力降低,加之代偿 性血管扩张已接近
表2 4种不同配比组方的EFA对垂体后叶素所致
大鼠急性心肌缺血实验结果(±s,n=10)
组别
, 百拇医药
剂量(g/kg)
有效率(%)
ED50(g/kg)
EFA1
9.18
20
12.24
30
14.98
50
15.26
19.98
, http://www.100md.com 70
26.24
80
EFA2
27.30
30
36.40
40
48.41
60
42.14**
64.43
70
, 百拇医药
85.90
80
EFA3
12.00
30
16.00
40
21.43
60
18.16
28.58
70
38.10
, 百拇医药
90
EFA4
16.76
30
20.94
50
26.19
60
22.48
32.74
70
40.92
80
, 百拇医药
与EFA1比较:*P<0.05 **P< 0.01
极限,冠脉血流量再无进一步增加的余地。此时 防治原则主要是降低心肌耗氧量。 因此,作者 选择了两个典型的实验模型进行4种EFA最佳处方的筛选。结果表明,EFA1在延长小鼠常压低 氧状态下的存活时间及垂体后叶素所致的心肌缺血实验效果最佳。因此选定EFA1为最佳处方 。
目前我国的新药研制主要是开发中药资源。但由于中药配方相对不固定,有效成分含量无标 准值,阻碍了中药成为国际承认的标准药物。瓜蒌薤白白酒汤配方简单,疗效明确。作者通 过对其有效成分含量相对固定的不同配比方剂进行研究,确定其最佳处方,为中药早日与国 际接轨探索一条新路。作者所用的瓜蒌薤白白酒汤提取物是粗提物,因此给药量较大,有待 于进一步精制。
A ddress: Wu Bo, Emergency Department, The First Hospital of China Medical University, Shenyang
, 百拇医药
国家新药基金项目,编号为93-44-N-22
吴波 女,28岁,助研,主管药师。1997年毕业于沈阳药科大学药理专业,获硕士学位。 目前在中国医科大学第一临床学院从事临床药理工作,并在职攻读药理学博士学位。专业研 究方向为临床药理和心血管药理。
参 考 文 献
1,何熹延,方蕴春.陕西中医,1991,12(7):330
2,柴 峰,王玲玲.河南中医,1991,11(3):47
3,戴新民.中国方药学.台湾:启蒙书局有限公司,1976:558
4,上海中医学院中药系方剂学中药学教研室.中医方剂临床手册.上海:上海 科技出版社,1975:125
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5,矢数道明.临床应用汉方处方解说.北京:人民卫生出版社,1983:59
6,徐叔云,卞如濂,陈 修,等.药理实验方法学,第2版.北京:人民卫生出版 社,1994:891
7,孙瑞元.定量药理学.北京:人民卫生出版社,1987:169
8,徐理纳,尹钟洙,欧阳蓉.药学学报,1979,14(8):461
9,陈灏珠,李宗明,王宠林,等.内科学.第4版.北京:人民卫生出版社,1996 :237
(2000-03-13收稿), http://www.100md.com
单位:中国医科大学第一临床学院急诊科 沈阳110001
关键词:瓜蒌薤白白酒汤;缺氧;缺血
中草药001122 摘 要 目的:考察4种不同配比组方瓜蒌薤白白酒汤提取物抗心肌 缺 氧缺血及最佳处方的筛选。方法:采用异丙肾上腺素致小鼠常压缺氧模型、垂体后叶素致大 鼠急性心肌缺血模型。结果:4种不同配比组方瓜蒌薤白白酒汤提取物均能延长异丙肾上腺 素作用的小鼠常压缺氧存活时间,并能对抗垂体后叶素所致的大鼠急性心肌缺血作用。应用 正规机率单位法计算4种组方的半数有效量(ED50),处方1两个实验ED50都 最 小,处方1效果最佳。结论:4种不同配比组方瓜蒌薤白白酒汤提取物均能抗心肌缺氧缺血, 且处方1为最佳处方。
瓜蒌,薤白组成之方剂始见于汉代名医张仲景所著的《金匮要略》。其中瓜蒌薤白 白酒汤用于治疗“喘息咳唾,胸背痛 ,短气”,是我国中医用于治疗胸痹症的代表方剂,也是十多年来用于治疗冠心病、心绞痛 及心肌梗死的基本方剂之一,是一个 很价值的古方。近年来对该方中瓜蒌、薤白单味药的化学成分及药理研究较多,但对复方瓜 蒌、薤白的药理作用研究则未见报道[1,2]。不同医籍 记载的瓜蒌薤白白酒汤单味药的配比不相同,根据文献及多名老中医临床经验整理 中药专家选定的其中4种瓜蒌薤白白酒汤组成配比进行了最佳处方筛选[3,5] 。
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1 材料与方法
1.1 试药:瓜蒌薤白白酒汤的提取物(EFA):处方1 (EFA1),瓜蒌∶薤白为1.5∶1,每克 浸膏含药材量为3.33 g;处方2 (EFA2),瓜蒌∶薤白为1∶1,每克浸膏含药材量为3.64 g ;处方3 (EFA3),瓜蒌∶薤白为2∶1,每克浸膏含药材量为3.81 g;处方4 (EFA4)瓜 蒌∶ 薤白为1∶2,每克浸膏含药材量为3.41 g,由沈阳药科大学天然药物化学教研室提供,批 号分别为960117,960118,960119,960120。盐酸异丙肾上腺素,上海乔丰药厂产品,批号 为940901。钠石灰,北票矿务局氢氧化钙厂产品,批号为940714。戊巴比妥钠,UNION进口 分装,批号为860122。垂体后叶素注射药(Pit),上海第一生化药业公司产品,批号为950705 。
1.2 动物:昆明种小鼠,18~22 g,雄性,沈阳药科大学动物室提供,合格证号为辽实合 字018号。Wistar 大鼠,180~220 g,雌雄兼用,沈阳化工研究院农药评价中心提供,合格 证号为辽实合字001号。
, 百拇医药
1.3 仪器:ECG-6511型心电图机,上海光电医用电子仪器有限公司产品。
2 方法和结果
2.1 小鼠常压耐缺氧实验[6,7]:雄性小鼠禁食12 h后,随机分为21组,即生理 盐水组及4个处方各自均分为5个剂量组,每组10只小鼠,处方1,2,3提取物,组间剂量比 值1∶0.75;处方4提取物,组间剂量比值1∶0.8,各组小鼠分别ig等容积不同剂量的EFA 各处方(剂量均以所含原生药量计算,下同)。对照组给与等容积溶媒。40 min后ip异丙肾上 腺素20 mg/kg,15 min后将小鼠放入330 mL磨口瓶中,预先在瓶中放入10 g钠石灰,密封加 盖,记录小鼠的存活时间。
结果4种不同配比组方的EFA均能对抗异丙肾上腺素作用的小鼠常压缺氧作用,延长小鼠在常 压低氧状态下的存活时间。生理盐水组存活时间为(36.4±6.0) min,根据预试,设给药 组标准差为8.0。当P<0.05时,求得给药组X为43.0 min的小鼠即为有效,计算各组有效率。按正规法计算各配比组方EFA的半数有效量(ED 50)。由小到大依次为:EFA1 (35.1 g/kg) < EFA3 (48.6 g/kg) < EFA2 (50.4 g /kg)< EFA4 (52.0 g/kg)。由此可知,EFAI最佳。见表1。
, 百拇医药
2.2 垂体后叶素所致大鼠急性心肌缺血实验[7,8]:大鼠(雌雄兼用)禁食8 h后 ,随机分为20组,各处 方均分成5个剂量组,每组10只。各组分别ig不同处方不同的EFA剂量或等容积溶媒,60 min后ip
表1 4种不同配比组方的EFA对小鼠常压耐缺氧
实验结果(±s,n=10)
组别
剂量
(g/kg)
存活时间(min)
有效率
, 百拇医药
(%)
ED50
(g/kg)
对照
-
36.4±6.0
EFA1
21.1
33.8±8.0
10
35.1
28.1
41.8±10.6
, http://www.100md.com
40
37.5
44.9±10.2*
50
50.0
46.6±7.6**
80
66.6
52.5±9.4**
90
EFA2
24.8
, http://www.100md.com
38.2±5.1
10
50.4△
32.8
39.1±10.1
40
43.7
45.4±13.0
40
54.6
56.5±21.7
50
, 百拇医药 72.8
58.0±10.6
70
EFA3
25.9
34.0±6.6
10
48.6
34.3
38.5±8.6
40
45.7
41.0±9.7
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50
57.2
43.1±13.1
60
76.2
44.9±7.7*
70
EFA4
32.7
35.0±8.4
10
52.0△△
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40.9
36.1±10.6
30
51.2
45.2±8.5**
40
68.2
51.6±16.8*
70
81.8
59.2±16.7**
90
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与对照组比较:*P<0.05 **P<0.01
与EFA1比较:△P<0.05 △△P<0.01
戊巴比妥钠 35 mg/kg。待麻醉后,仰位固定于鼠台上,记录胸V Ⅱ导联正常心电图。麻醉30 min后,分别舌下iv垂体后叶素0.8 U/kg,10 s注完。注射后 立 即记录0,15,30 min及1,3,8 h时心电图,观察各期心电图变化。一周后,再分别ig不同 处方不同剂量的EFA,重复上述实验过程,以未出现T波低平,倒置或双向为有效,计算各组 有效率,按正规法求出各处方的ED50。
结果4种不同配比组方的EFA均能对抗垂体后叶素所致大鼠急性心肌缺血,按正规法计算4种E FA的DE50,由小到大顺序为EFA1 (15.26 g/kg)
从表1,2实验结果可知,EFA1为最佳处方。
3 讨论
胸痹症主要是由心肌缺氧、缺血所引起的[9]。心肌缺氧的解决办法有两条:① 增加供氧,②减少氧耗,或两者兼用。当心肌氧需增高时,主要是依靠冠脉流量增加来提高 氧的供应。但在某种特定情况下,依靠这种途径作为唯一的治疗原则,难以奏效。如冠 脉粥 样硬化时,除管腔狭窄妨碍血流通过外,由于管壁硬化舒缩能力降低,加之代偿 性血管扩张已接近
表2 4种不同配比组方的EFA对垂体后叶素所致
大鼠急性心肌缺血实验结果(±s,n=10)
组别
, 百拇医药
剂量(g/kg)
有效率(%)
ED50(g/kg)
EFA1
9.18
20
12.24
30
14.98
50
15.26
19.98
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26.24
80
EFA2
27.30
30
36.40
40
48.41
60
42.14**
64.43
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85.90
80
EFA3
12.00
30
16.00
40
21.43
60
18.16
28.58
70
38.10
, 百拇医药
90
EFA4
16.76
30
20.94
50
26.19
60
22.48
32.74
70
40.92
80
, 百拇医药
与EFA1比较:*P<0.05 **P< 0.01
极限,冠脉血流量再无进一步增加的余地。此时 防治原则主要是降低心肌耗氧量。 因此,作者 选择了两个典型的实验模型进行4种EFA最佳处方的筛选。结果表明,EFA1在延长小鼠常压低 氧状态下的存活时间及垂体后叶素所致的心肌缺血实验效果最佳。因此选定EFA1为最佳处方 。
目前我国的新药研制主要是开发中药资源。但由于中药配方相对不固定,有效成分含量无标 准值,阻碍了中药成为国际承认的标准药物。瓜蒌薤白白酒汤配方简单,疗效明确。作者通 过对其有效成分含量相对固定的不同配比方剂进行研究,确定其最佳处方,为中药早日与国 际接轨探索一条新路。作者所用的瓜蒌薤白白酒汤提取物是粗提物,因此给药量较大,有待 于进一步精制。
A ddress: Wu Bo, Emergency Department, The First Hospital of China Medical University, Shenyang
, 百拇医药
国家新药基金项目,编号为93-44-N-22
吴波 女,28岁,助研,主管药师。1997年毕业于沈阳药科大学药理专业,获硕士学位。 目前在中国医科大学第一临床学院从事临床药理工作,并在职攻读药理学博士学位。专业研 究方向为临床药理和心血管药理。
参 考 文 献
1,何熹延,方蕴春.陕西中医,1991,12(7):330
2,柴 峰,王玲玲.河南中医,1991,11(3):47
3,戴新民.中国方药学.台湾:启蒙书局有限公司,1976:558
4,上海中医学院中药系方剂学中药学教研室.中医方剂临床手册.上海:上海 科技出版社,1975:125
, http://www.100md.com
5,矢数道明.临床应用汉方处方解说.北京:人民卫生出版社,1983:59
6,徐叔云,卞如濂,陈 修,等.药理实验方法学,第2版.北京:人民卫生出版 社,1994:891
7,孙瑞元.定量药理学.北京:人民卫生出版社,1987:169
8,徐理纳,尹钟洙,欧阳蓉.药学学报,1979,14(8):461
9,陈灏珠,李宗明,王宠林,等.内科学.第4版.北京:人民卫生出版社,1996 :237
(2000-03-13收稿), http://www.100md.com