纤状蛇纹石石棉对兔肺泡巨噬细胞影响的体外研究
作者：邓建军 董发勤 蒲晓允 方育琼 蒋惠芝 董跃君 李德知
单位：邓建军 方育琼 蒋惠芝 董跃君 李德知(四川省绵阳市第四人民医院检验科，绵阳 621000)；董发勤(西南工学院资源工程系，绵阳 621003)；蒲晓允(第三军医大学医学检验系临床血液学教研室，重庆 400038)
关键词：纤状蛇纹石石棉；细胞毒性；肺泡巨噬细胞；表面活性基团
第三军医大学学报001215
提 要： 目的 探讨纤状蛇纹石石棉致肺泡巨噬细胞受损的机制。方法 采用体外细胞培养技术，以兔肺泡巨噬细胞死亡率、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量变化来表示不同剂量、不同培养时间的纤状蛇纹石石棉对巨噬细胞的毒性。结果 纤状蛇纹石石棉对肺泡巨噬细胞的毒性存在着剂量-效应关系、时间-效应关系；125 μg/ml培养18 h后，细胞死亡率及LDH增加，500 μg/ml培养5 h后，细胞死亡率、LDH、MDA均明显增加，而SOD活力明显降低。随粉尘剂量的增加及培养时间的延长，细胞毒性也增加。结论 纤状蛇纹石石棉对肺泡巨噬细胞的毒性可能与其表面活性基团有关。
, http://www.100md.com
中图法分类号： R322.35 文献标识码： A
文章编号：1000-5404(2000)12-1170-03
Study on the effect of chrysotile asbestos on rabbit pulmonary alveolar macrophages injury in vitro
DENG Jian-jun, DONG Fa-qing, PU Xiao-yun, FANG Yu-qiong, JIANG Hui-zhi, DONG Yue-jun, LI De-zhi
(Department of Laboratory Medicine, 4th Hospital of Mianyang City, Mianyang 621000, China)
, 百拇医药
Abstract： Objective To study the mechanism of damages of pulmonary alveolar macrophages caused by chrysotile asbestos. Methods Rabbit pulmonary alveolar macrophages were cultured in vitro. The cell death rate, the malandialdehyde (MDA), lactate dehydrogenate (LDH) and superoxide dismitase(SOD) contents in the cultured cells were determined at different incubation time and different dose of chrysotile asbestos for the cytotoxicity of the material. Results The cytotoxicity of chrysotile asbestos was in a dose and incubation time dependent manner. After 18 h incubation and at the dose of 250 μg/ml, the cell death rate and LDH content were increased significantly. In 5 h incubation and 500 μg/ml dose, the cell death rate, LDH and MDA all had a significant increase. Conclusion The cytotoxicity of chrysotile asdestos on pulmonary alveolar macrophages maybe related to the surface free radicals of chrysotile asbedtos.
, 百拇医药
Key words： chrysotile asdestos;cytotoxicity;pulmonary alveolar macrophages;surface free radicals
石棉纤维能引起肺部的严重疾病[1]，几十年来，国内外学者进行了长期而深入的研究，至今其致病机制仍不清楚。我们的前期研究结果认为：矿物的生物活
性是由表面的活性基团决定的，国内尚无此报道。本研究采用体外细胞培养技术，观察不同剂量、不同培养时间的纤状蛇纹石石棉对兔肺泡巨噬细胞损伤中所起的作用，为寻找纤状蛇纹石石棉表面的安全改造剂，减少及预防该类粉尘造成的肺部疾病提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 粉尘制备 纤状蛇纹石石棉采自四川石棉县，由超声粉碎制成超细粉尘(由西南工学院资源系提供)用RPMI1640培养液制成悬液，直接于玻片上在光镜下计算分散度，其中直径<15 μm的纤维占90%以上。用电子天平准确称取25 mg超细粉尘于青霉素小瓶内，高压蒸汽灭菌。用前加1640培养液5 ml，磁场力搅拌器上充分分散4 h备用。
, 百拇医药
1.2 细胞培养
选用2kg左右的健康雄兔，耳缘静脉注入空气处死，腹主动脉放血，立即超净工作台上进行支气管，肺灌洗[2] 。灌洗液1 500 r/min离心10 min，细胞用培养体系(20%小牛血清+80%1640培养液+100 U/ml青霉素+100 μg/ml链霉素)调整浓度至3×106/ml，分装于直径35 mm的无菌培养皿，37°C，5%CO2培养3 h后取出，洗去未贴壁的细胞,贴壁的几乎都是巨噬细胞。
1.2.1 培养时间与细胞毒性的关系 实验组0.1 ml粉尘悬液与0.9 ml的培养体系加入到上述培养皿中(使粉尘悬液的终浓度为500 μg/ ml),对照组加0.1 ml 1640培养夜代替粉尘悬液,放37°C、5%CO2分别培养1.5、3、5、7、15、18 h后取出，收集上清液，细胞用pH 7.3 PBS配成1×106/ml悬液。
, http://www.100md.com
1.2.2 粉尘剂量与细胞毒性的关系 实验组分别加入粉尘悬液与培养体系，使粉尘悬液的最终浓度分别为125、250、500、1 000、1 500 μg/ ml、放37°C、5% CO2培养箱18 h后取出，收集上清液，细胞用pH 7.3的PBS配成1×106/ml的悬液。上述实验每次做平行实验,重复4次。
1.3 观察指标
1.3.1细胞膜通透性变化指标 0.4%台盼蓝染色,计算细胞死亡率;培养上清液测乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogonate,LDH)活力,试剂由英国Randox公司提供,按说明书操作,仪器为日本7060型全自动生化分析仪。
1.3.2 脂质过氧化损伤的指标 细胞悬液做丙二醛(Malandialdehyde,MDA)含量及超氧化物歧化酶(Superoxide dismitase,SOD)活力分析，试剂由南京建成生物研究所提供，操作按说明书，仪器为美国贝克曼DU-65型紫外分光光度计。
, 百拇医药
1.3.3 细胞形态观察 细胞悬液滴于玻片上,瑞氏-姬姆萨染色，光学显微镜下观察细胞形态变化。
1.4 统计学处理
数据用
±s表示，采用t检验。
2 结果
纤状蛇纹石石棉对肺泡巨噬细胞的毒性存在着时间-效应关系，随培养时间的延长，毒性增大。从表1可看出，粉尘悬液与巨噬细胞共同培养5 h后，即出现了明显的细胞毒性：细胞死亡率增加，细胞膜通透性增高(LDH漏出细胞外，培养液LDH增高)，同时MDA增加，SOD降低，与对照组相比差异显著，粉尘悬液与巨噬细胞共同培养7、15、18 h细胞毒性有明显增加的趋势。
表1 不同培养时间对肺泡巨噬细胞毒性的影响(±s)
, 百拇医药
Tab 1 Effects of incubation time on cytotoxicity of pulmonary
alveolar macrophages(±s) Incubation
time(t/h)
n
Death
rate(%)
LDH(IU/L)
SOD(U/L)
MDA
, 百拇医药
(CB/nmol*L-1)
Control
4
12.4±1.6
36.5±3.5
12.5±3.0
3.02±0.2
1.5
4
13.6±2.0
38.0±4.0
13.7±2.3
, http://www.100md.com
3.10±0.26
3
4
15.0±3.7
40.1±2.9
11.7±2.7
3.17±0.28
5
4
30.5±5.0* *
60.8±5.7* *
8.03±0.64*
, http://www.100md.com
3.89±0.22*
7
4
35.5±2.6* *
76.0±4.1* *
6.44±1.03* *
4.52±0.11* *
15
4
43.2±3.3* *
114.0±8.5* *
, 百拇医药
4.6±0.89* *
4.58±0.06* *
18
4
60.8±5.7* *
120.0±3.9* *
3.07±0.76* *
5.04±0.49* *
*:P<0.05, * *:P<0.01 vs control
纤状蛇纹石石棉对肺泡巨噬细胞的毒性存在着剂量-效应关系，随剂量的增加，毒性增大。从表2可看出，当剂量为125 μg/ml的粉尘悬液与巨噬细胞共同培养18 h后，就出现了细胞毒性，细胞死亡率及LDH增加，与对照组相比差异显著，当粉尘剂量增加至250 μg/mL，细胞毒性非常明显，不仅死亡率LDH明显增加，SOD与MDA均出现了明显变化，与对照组相比差异非常显著，随着剂量的增加毒性增加。
, 百拇医药
表2 不同粉尘剂量对肺泡巨噬细胞毒性的影响(±s)
Tab 2 Effects of dust dose on cytotoxicity of pulmonary
alveolar macrophages (±s) Dust dose
(ρB/μg*ml-1)
n
Death
rate(%)
, 百拇医药
LDH(IU/L)
SOD(U/L)
MDA
(CB/nmol*L-1)
Control
4
12.4±1.6
36.5±3.5
12.5±3.0
3.02±0.2
125
4
, 百拇医药
30.05±3.7* *
48.0±5.1*
13.4±2.2
3.22±0.16
250
4
41.24±5.5* *
65.6±3.9* *
6.85±1.0* *
3.75±0.20*
, http://www.100md.com
500
4
48.9±5.0* *
100.8±13.0* *
3.07±0.76* *
5.04±0.49* *
1 000
4
56.3±4.17* *
143.4±20.5* *
, http://www.100md.com
3.43±0.81* *
5.38±0.11* *
1 500
4
70.7±8.7* *
156.8±18.6* *
3.01±20.80* *
5.29±0.17* *
*:P<0.05, * *:P<0.01 vs control
, http://www.100md.com 瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态的变化，对照组巨噬细胞多为圆形，表面光滑，膜完整，细胞核与浆边界清楚，核染成紫色，胞浆均匀染成紫红色。与粉尘悬液共同培养后巨噬细胞形态发生不同程度的毒性变化：细胞体积增大，聚集成团，形态不规则，出现梭形细胞，巨大巨噬细胞,粉尘悬液与细胞共同培养5 h后，细胞核出现疏松，固缩基至溶解，只剩网状结构，细胞浆变浅，胞浆内出现吞噬颗粒，细胞膜不完整，随培养时间的延长以及粉尘剂量的增加毒性变化更明显。
3 讨论
纤状蛇纹石石棉是一类以硅酸盐为支架，表面覆盖有Mg-OH层的纤维状硅酸盐矿物，分子式为Mg3[Si5O2](OH)4，其细胞毒性国内外的研究很多，与纤维的大小、形态、化学组成、结构、耐久性、有无污染等有关。而我们的前期研究结果认为：具有重要意义的矿物生物活性与矿物表面的活性基团有关，活性基团决定了它在生物体内的持久性、溶解性，活性基团也决定了矿物生物活性及其大小[2,3]。
, 百拇医药
根据我们前期的研究结果：作为一种碱性纤维，来源于四川石棉县的纤状蛇纹石石棉经超声粉碎制成超细粉尘后，在中性液体环境中(如体液、培养液)有一定的溶解能力，能电离出OH-、O-2、Si-O-等活性基团，我们认为OH-、O-2及Si-O-是OH·、O-*2、及SiO·(硅载自由基)在溶液中存在的形式即流体自由基，这些活性基团攻击细胞聚不饱和脂肪酸(Polyunsturated fazty acid,PUFA)发生一系列氧化连锁反应即脂质过氧化。从实验结果可以看出，当纤维与巨噬细胞相互作用5 h后，细胞死亡率、LDH及脂质过氧化的主要产物MDA明显增高，自由基清除剂SOD被消耗，随培养时间的延长及粉尘剂量的增加，细胞毒性越明显：细胞死亡率增高、细胞膜破坏、核疏松、固缩甚至破裂、溶解。可见纤状蛇纹石石棉的细胞毒性存在着时间依赖关系、剂量依赖关系[4～6]。
, http://www.100md.com
我们采用低浓度的弱酸(醋酸、柠檬酸、酒石酸等)处理纤维水镁石，中和其表面的部分OH-，已显著地降低了纤维水镁石的细胞毒性[7]，这也充分证明了石棉纤维矿物的细胞毒性与表面活性基团有关，若改变纤状蛇纹石石棉的表面离子基团种类，能否降低其细胞毒性，将有待与进一步研究。
基金项目：国家自然科学基金资助项目(49502025)
作者简介：邓建军(1972-)，女，四川省绵阳市人，主管技师，主要从事环境医学方面的研究，发表论文10篇。电话：(0816)2333342-232
参考文献：
[1] 樊晶光，王起恩，吴卫东，等.几种化合物对石棉诱发肺泡巨噬细胞产生一氧化氮的抑制作用[J].中华预防医学杂志，1997，31(1)：31-34.
, 百拇医药
[2] 邓建军，董发勤，蒲小允，等.纤维状矿物粉尘对肺泡巨噬细胞膜的损伤机制研究[J].川北医学院学报，1999，14(1)：3-5.
[3] 邓建军，董发勤，蒲小允，等.工业矿物粉尘对肺泡巨噬细胞影响的体外研究[J].中国环境科学，1999，19(5)：466-468.
[4] 李国武，董发勤，庄 稼，等.纤维矿物生物活性研究的新进展[J].四川地质学报，1998，18(1)：48-52.
[5] 董发勤，万 朴，宋功宝，等.矿物纤维粉尘的表面特性及对生物活性的影响[J].地质科技情报，1997，16(3)：77-81.
[6] 董发勤，万 朴，周开灿，等.陕南水镁石的环境安全性评估[J].中国环境科学，1998，18(1)：29-33.
[7] 邓建军，董发勤，吴逢春，等.酸处理纤维水镁石对红细胞溶血能力的影响[J].工业卫生与职业病，2000，26(2)：76-78.
收稿日期：1999-12-30；修回日期：2000-09-10, http://www.100md.com
单位：邓建军 方育琼 蒋惠芝 董跃君 李德知(四川省绵阳市第四人民医院检验科，绵阳 621000)；董发勤(西南工学院资源工程系，绵阳 621003)；蒲晓允(第三军医大学医学检验系临床血液学教研室，重庆 400038)
关键词：纤状蛇纹石石棉；细胞毒性；肺泡巨噬细胞；表面活性基团
第三军医大学学报001215
提 要： 目的 探讨纤状蛇纹石石棉致肺泡巨噬细胞受损的机制。方法 采用体外细胞培养技术，以兔肺泡巨噬细胞死亡率、乳酸脱氢酶(LDH)、超氧化物歧化酶(SOD)活力及丙二醛(MDA)含量变化来表示不同剂量、不同培养时间的纤状蛇纹石石棉对巨噬细胞的毒性。结果 纤状蛇纹石石棉对肺泡巨噬细胞的毒性存在着剂量-效应关系、时间-效应关系；125 μg/ml培养18 h后，细胞死亡率及LDH增加，500 μg/ml培养5 h后，细胞死亡率、LDH、MDA均明显增加，而SOD活力明显降低。随粉尘剂量的增加及培养时间的延长，细胞毒性也增加。结论 纤状蛇纹石石棉对肺泡巨噬细胞的毒性可能与其表面活性基团有关。
, http://www.100md.com
中图法分类号： R322.35 文献标识码： A
文章编号：1000-5404(2000)12-1170-03
Study on the effect of chrysotile asbestos on rabbit pulmonary alveolar macrophages injury in vitro
DENG Jian-jun, DONG Fa-qing, PU Xiao-yun, FANG Yu-qiong, JIANG Hui-zhi, DONG Yue-jun, LI De-zhi
(Department of Laboratory Medicine, 4th Hospital of Mianyang City, Mianyang 621000, China)
, 百拇医药
Abstract： Objective To study the mechanism of damages of pulmonary alveolar macrophages caused by chrysotile asbestos. Methods Rabbit pulmonary alveolar macrophages were cultured in vitro. The cell death rate, the malandialdehyde (MDA), lactate dehydrogenate (LDH) and superoxide dismitase(SOD) contents in the cultured cells were determined at different incubation time and different dose of chrysotile asbestos for the cytotoxicity of the material. Results The cytotoxicity of chrysotile asbestos was in a dose and incubation time dependent manner. After 18 h incubation and at the dose of 250 μg/ml, the cell death rate and LDH content were increased significantly. In 5 h incubation and 500 μg/ml dose, the cell death rate, LDH and MDA all had a significant increase. Conclusion The cytotoxicity of chrysotile asdestos on pulmonary alveolar macrophages maybe related to the surface free radicals of chrysotile asbedtos.
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Key words： chrysotile asdestos;cytotoxicity;pulmonary alveolar macrophages;surface free radicals
石棉纤维能引起肺部的严重疾病[1]，几十年来，国内外学者进行了长期而深入的研究，至今其致病机制仍不清楚。我们的前期研究结果认为：矿物的生物活
性是由表面的活性基团决定的，国内尚无此报道。本研究采用体外细胞培养技术，观察不同剂量、不同培养时间的纤状蛇纹石石棉对兔肺泡巨噬细胞损伤中所起的作用，为寻找纤状蛇纹石石棉表面的安全改造剂，减少及预防该类粉尘造成的肺部疾病提供理论依据。
1 材料与方法
1.1 粉尘制备 纤状蛇纹石石棉采自四川石棉县，由超声粉碎制成超细粉尘(由西南工学院资源系提供)用RPMI1640培养液制成悬液，直接于玻片上在光镜下计算分散度，其中直径<15 μm的纤维占90%以上。用电子天平准确称取25 mg超细粉尘于青霉素小瓶内，高压蒸汽灭菌。用前加1640培养液5 ml，磁场力搅拌器上充分分散4 h备用。
, 百拇医药
1.2 细胞培养
选用2kg左右的健康雄兔，耳缘静脉注入空气处死，腹主动脉放血，立即超净工作台上进行支气管，肺灌洗[2] 。灌洗液1 500 r/min离心10 min，细胞用培养体系(20%小牛血清+80%1640培养液+100 U/ml青霉素+100 μg/ml链霉素)调整浓度至3×106/ml，分装于直径35 mm的无菌培养皿，37°C，5%CO2培养3 h后取出，洗去未贴壁的细胞,贴壁的几乎都是巨噬细胞。
1.2.1 培养时间与细胞毒性的关系 实验组0.1 ml粉尘悬液与0.9 ml的培养体系加入到上述培养皿中(使粉尘悬液的终浓度为500 μg/ ml),对照组加0.1 ml 1640培养夜代替粉尘悬液,放37°C、5%CO2分别培养1.5、3、5、7、15、18 h后取出，收集上清液，细胞用pH 7.3 PBS配成1×106/ml悬液。
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1.2.2 粉尘剂量与细胞毒性的关系 实验组分别加入粉尘悬液与培养体系，使粉尘悬液的最终浓度分别为125、250、500、1 000、1 500 μg/ ml、放37°C、5% CO2培养箱18 h后取出，收集上清液，细胞用pH 7.3的PBS配成1×106/ml的悬液。上述实验每次做平行实验,重复4次。
1.3 观察指标
1.3.1细胞膜通透性变化指标 0.4%台盼蓝染色,计算细胞死亡率;培养上清液测乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogonate,LDH)活力,试剂由英国Randox公司提供,按说明书操作,仪器为日本7060型全自动生化分析仪。
1.3.2 脂质过氧化损伤的指标 细胞悬液做丙二醛(Malandialdehyde,MDA)含量及超氧化物歧化酶(Superoxide dismitase,SOD)活力分析，试剂由南京建成生物研究所提供，操作按说明书，仪器为美国贝克曼DU-65型紫外分光光度计。
, 百拇医药
1.3.3 细胞形态观察 细胞悬液滴于玻片上,瑞氏-姬姆萨染色，光学显微镜下观察细胞形态变化。
1.4 统计学处理
数据用
±s表示，采用t检验。2 结果
纤状蛇纹石石棉对肺泡巨噬细胞的毒性存在着时间-效应关系，随培养时间的延长，毒性增大。从表1可看出，粉尘悬液与巨噬细胞共同培养5 h后，即出现了明显的细胞毒性：细胞死亡率增加，细胞膜通透性增高(LDH漏出细胞外，培养液LDH增高)，同时MDA增加，SOD降低，与对照组相比差异显著，粉尘悬液与巨噬细胞共同培养7、15、18 h细胞毒性有明显增加的趋势。
表1 不同培养时间对肺泡巨噬细胞毒性的影响(
±s), 百拇医药
Tab 1 Effects of incubation time on cytotoxicity of pulmonary
alveolar macrophages(
±s) Incubationtime(t/h)
n
Death
rate(%)
LDH(IU/L)
SOD(U/L)
MDA
, 百拇医药
(CB/nmol*L-1)
Control
4
12.4±1.6
36.5±3.5
12.5±3.0
3.02±0.2
1.5
4
13.6±2.0
38.0±4.0
13.7±2.3
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3.10±0.26
3
4
15.0±3.7
40.1±2.9
11.7±2.7
3.17±0.28
5
4
30.5±5.0* *
60.8±5.7* *
8.03±0.64*
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3.89±0.22*
7
4
35.5±2.6* *
76.0±4.1* *
6.44±1.03* *
4.52±0.11* *
15
4
43.2±3.3* *
114.0±8.5* *
, 百拇医药
4.6±0.89* *
4.58±0.06* *
18
4
60.8±5.7* *
120.0±3.9* *
3.07±0.76* *
5.04±0.49* *
*:P<0.05, * *:P<0.01 vs control
纤状蛇纹石石棉对肺泡巨噬细胞的毒性存在着剂量-效应关系，随剂量的增加，毒性增大。从表2可看出，当剂量为125 μg/ml的粉尘悬液与巨噬细胞共同培养18 h后，就出现了细胞毒性，细胞死亡率及LDH增加，与对照组相比差异显著，当粉尘剂量增加至250 μg/mL，细胞毒性非常明显，不仅死亡率LDH明显增加，SOD与MDA均出现了明显变化，与对照组相比差异非常显著，随着剂量的增加毒性增加。
, 百拇医药
表2 不同粉尘剂量对肺泡巨噬细胞毒性的影响(
±s)Tab 2 Effects of dust dose on cytotoxicity of pulmonary
alveolar macrophages (
±s) Dust dose(ρB/μg*ml-1)
n
Death
rate(%)
, 百拇医药
LDH(IU/L)
SOD(U/L)
MDA
(CB/nmol*L-1)
Control
4
12.4±1.6
36.5±3.5
12.5±3.0
3.02±0.2
125
4
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30.05±3.7* *
48.0±5.1*
13.4±2.2
3.22±0.16
250
4
41.24±5.5* *
65.6±3.9* *
6.85±1.0* *
3.75±0.20*
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500
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48.9±5.0* *
100.8±13.0* *
3.07±0.76* *
5.04±0.49* *
1 000
4
56.3±4.17* *
143.4±20.5* *
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3.43±0.81* *
5.38±0.11* *
1 500
4
70.7±8.7* *
156.8±18.6* *
3.01±20.80* *
5.29±0.17* *
*:P<0.05, * *:P<0.01 vs control
, http://www.100md.com 瑞氏-姬姆萨染色观察细胞形态的变化，对照组巨噬细胞多为圆形，表面光滑，膜完整，细胞核与浆边界清楚，核染成紫色，胞浆均匀染成紫红色。与粉尘悬液共同培养后巨噬细胞形态发生不同程度的毒性变化：细胞体积增大，聚集成团，形态不规则，出现梭形细胞，巨大巨噬细胞,粉尘悬液与细胞共同培养5 h后，细胞核出现疏松，固缩基至溶解，只剩网状结构，细胞浆变浅，胞浆内出现吞噬颗粒，细胞膜不完整，随培养时间的延长以及粉尘剂量的增加毒性变化更明显。
3 讨论
纤状蛇纹石石棉是一类以硅酸盐为支架，表面覆盖有Mg-OH层的纤维状硅酸盐矿物，分子式为Mg3[Si5O2](OH)4，其细胞毒性国内外的研究很多，与纤维的大小、形态、化学组成、结构、耐久性、有无污染等有关。而我们的前期研究结果认为：具有重要意义的矿物生物活性与矿物表面的活性基团有关，活性基团决定了它在生物体内的持久性、溶解性，活性基团也决定了矿物生物活性及其大小[2,3]。
, 百拇医药
根据我们前期的研究结果：作为一种碱性纤维，来源于四川石棉县的纤状蛇纹石石棉经超声粉碎制成超细粉尘后，在中性液体环境中(如体液、培养液)有一定的溶解能力，能电离出OH-、O-2、Si-O-等活性基团，我们认为OH-、O-2及Si-O-是OH·、O-*2、及SiO·(硅载自由基)在溶液中存在的形式即流体自由基，这些活性基团攻击细胞聚不饱和脂肪酸(Polyunsturated fazty acid,PUFA)发生一系列氧化连锁反应即脂质过氧化。从实验结果可以看出，当纤维与巨噬细胞相互作用5 h后，细胞死亡率、LDH及脂质过氧化的主要产物MDA明显增高，自由基清除剂SOD被消耗，随培养时间的延长及粉尘剂量的增加，细胞毒性越明显：细胞死亡率增高、细胞膜破坏、核疏松、固缩甚至破裂、溶解。可见纤状蛇纹石石棉的细胞毒性存在着时间依赖关系、剂量依赖关系[4～6]。
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我们采用低浓度的弱酸(醋酸、柠檬酸、酒石酸等)处理纤维水镁石，中和其表面的部分OH-，已显著地降低了纤维水镁石的细胞毒性[7]，这也充分证明了石棉纤维矿物的细胞毒性与表面活性基团有关，若改变纤状蛇纹石石棉的表面离子基团种类，能否降低其细胞毒性，将有待与进一步研究。
基金项目：国家自然科学基金资助项目(49502025)
作者简介：邓建军(1972-)，女，四川省绵阳市人，主管技师，主要从事环境医学方面的研究，发表论文10篇。电话：(0816)2333342-232
参考文献：
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收稿日期：1999-12-30；修回日期：2000-09-10, http://www.100md.com