山楂中牡荆素鼠李糖苷含量测定
作者：崔延萍 崔树玉
单位：西安天诚医药生物工程有限公司 710075
关键词：山楂；牡荆素鼠李糖苷；反相高效液相色谱法
中草药001214摘 要 应用反相高效液相色谱法测定山楂中牡荆素鼠李糖苷含量，方 法简便，分离重现性好，灵敏度高。
山楂是蔷薇科植物山楂Crataegus pinnatifida Bge. 的干 燥成熟果实。长期以来山楂制品广泛用于 临床，具有抑制甲状腺过氧化酶、抗癌、降压、抗炎、活血化滞、降低血脂和解痉的作用。 其牡荆素鼠李糖苷是从山楂叶中分离得到的天然活性成分之一。我们采用反相高效液相色谱 法，用外标峰面积对山楂提取物中牡荆素鼠李糖苷进行定量测定，方法简便，分离重现性好 ， 灵敏度高。
1 仪器与试剂
, http://www.100md.com
1.1 仪器：美国Waters 600高效液相色谱仪，Waters 486紫外检测，柱恒温箱，KQ-250 振荡仪，10 μL标准定量进样杯。
1.2 试药：牡荆素鼠李糖苷对照品(Sigma)、四氢呋喃、乙腈、甲醇、磷酸为AR级；水为 重蒸馏水。
2 方法和结果
2.1 色谱分析条件：Inertsil ODS-3(4.6 mm×150 mm，5 μm)；流动相为四氢呋喃- 乙 腈-甲醇-水-磷酸(19.4∶1∶1∶94∶0.1)；流速1.0 mL/min；检测波长254 nm；灵敏 度 0.1 AUFS；分离度2.02。在此条件下牡荆素鼠李糖苷与山楂中其它成分达到较好的分离， 结果见图1。
A-牡荆素鼠李糖苷 B-样品
, 百拇医药
图1 样品HPLC图
2.2 标准曲线制备：精密称取牡荆素鼠李糖苷2.63 mg，置25 mL量瓶中，加甲醇溶解 至 刻度，吸取0.1，0.2，0.3，0.4，0.6，0.8 mL，分别置于5.0 mL量瓶中，加甲醇 稀释至 刻度，分别取10 μL进样，绘制标准曲线，回归方程为Y=5.700× 1 0-8+5.15×10-2，r=0.999 6，牡荆素鼠李糖苷在0.05 9 0～0.968 4 μg具有良好线性关系。
2.3 样品溶液制备：精密称取山楂样品300 mg，置于25 mL量瓶中，加入甲醇适量， 超声波振荡提取25 min，冷却至室温，定容过滤，即得样品液。
2.4 精密度试验：精密吸取对照品溶液，先后进样6 次，牡荆素鼠李糖苷含量RS D=1.28%(n=6)。
, http://www.100md.com 2.5 回收率试验：精密称取已知含量的样品数份，精密加入一定量 的牡荆素鼠李糖苷对照品，依上法测定，计算回收率为98.87 %，RSD=2.34%(n=5)。
2.6 重复性试验：取同一批号样品6份，按溶液制备方法平行处理，依法测定，求得RSD=2.06%。2.7 稳定性试验：室温下，样品在1，2.5，4，6，12，24 h进行测定，含量不变， 说明样品在24 h内稳定。
2.8 样品含量测定：分别取本公司生产的样品按供试品溶液制备方法处理，依 法测定，结果见表1。
表1 样品中牡荆素鼠李糖苷含量测定(n=4)[ ST〗 批号
平均值(%)
RSD(%)
990103
, 百拇医药
1.88
1.53
990901
2.00
1.75
990910
2.44
1.82
991001
3.10
1.33
991201
1.63
, http://www.100md.com
1.10
991202
3.44
1.44
3 讨论
3.1 流动相的选择：山楂中牡荆素鼠李糖苷的HPLC测定方法未见报道，在试验过程中， 发现此流动相体系的选择十分困难，用甲醇-水体系、乙腈-水体系、甲醇-乙腈-水体系 等分离效果不理想，在反复摸索中，加入四氢呋喃，分离效果满意，峰对称性好，并达到基 线分离，故选择了报道的流动相。
3.2 流动相体系的配比要求比较严格，否则影响峰型及出蜂时间。
Address： Cui Yanping, Xi'an Tiancheng Drugs & Bioengineering Co . Ltd., Xi'an
参 考 文 献
1，郑虎占，董泽宏，余 靖.中药现代研究与应用.第一卷.北京：学苑出版 社，1997：597
2，高光跃，冯毓秀.药学学报，1995，30(2)：138
(2000-03-31收稿), 百拇医药
单位：西安天诚医药生物工程有限公司 710075
关键词：山楂；牡荆素鼠李糖苷；反相高效液相色谱法
中草药001214摘 要 应用反相高效液相色谱法测定山楂中牡荆素鼠李糖苷含量，方 法简便，分离重现性好，灵敏度高。
山楂是蔷薇科植物山楂Crataegus pinnatifida Bge. 的干 燥成熟果实。长期以来山楂制品广泛用于 临床，具有抑制甲状腺过氧化酶、抗癌、降压、抗炎、活血化滞、降低血脂和解痉的作用。 其牡荆素鼠李糖苷是从山楂叶中分离得到的天然活性成分之一。我们采用反相高效液相色谱 法，用外标峰面积对山楂提取物中牡荆素鼠李糖苷进行定量测定，方法简便，分离重现性好 ， 灵敏度高。
1 仪器与试剂
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1.1 仪器：美国Waters 600高效液相色谱仪，Waters 486紫外检测，柱恒温箱，KQ-250 振荡仪，10 μL标准定量进样杯。
1.2 试药：牡荆素鼠李糖苷对照品(Sigma)、四氢呋喃、乙腈、甲醇、磷酸为AR级；水为 重蒸馏水。
2 方法和结果
2.1 色谱分析条件：Inertsil ODS-3(4.6 mm×150 mm，5 μm)；流动相为四氢呋喃- 乙 腈-甲醇-水-磷酸(19.4∶1∶1∶94∶0.1)；流速1.0 mL/min；检测波长254 nm；灵敏 度 0.1 AUFS；分离度2.02。在此条件下牡荆素鼠李糖苷与山楂中其它成分达到较好的分离， 结果见图1。
A-牡荆素鼠李糖苷 B-样品
, 百拇医药
图1 样品HPLC图
2.2 标准曲线制备：精密称取牡荆素鼠李糖苷2.63 mg，置25 mL量瓶中，加甲醇溶解 至 刻度，吸取0.1，0.2，0.3，0.4，0.6，0.8 mL，分别置于5.0 mL量瓶中，加甲醇 稀释至 刻度，分别取10 μL进样，绘制标准曲线，回归方程为Y=5.700× 1 0-8+5.15×10-2，r=0.999 6，牡荆素鼠李糖苷在0.05 9 0～0.968 4 μg具有良好线性关系。
2.3 样品溶液制备：精密称取山楂样品300 mg，置于25 mL量瓶中，加入甲醇适量， 超声波振荡提取25 min，冷却至室温，定容过滤，即得样品液。
2.4 精密度试验：精密吸取对照品溶液，先后进样6 次，牡荆素鼠李糖苷含量RS D=1.28%(n=6)。
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2.6 重复性试验：取同一批号样品6份，按溶液制备方法平行处理，依法测定，求得RSD=2.06%。2.7 稳定性试验：室温下，样品在1，2.5，4，6，12，24 h进行测定，含量不变， 说明样品在24 h内稳定。
2.8 样品含量测定：分别取本公司生产的样品按供试品溶液制备方法处理，依 法测定，结果见表1。
表1 样品中牡荆素鼠李糖苷含量测定(n=4)[ ST〗 批号
平均值(%)
RSD(%)
990103
, 百拇医药
1.88
1.53
990901
2.00
1.75
990910
2.44
1.82
991001
3.10
1.33
991201
1.63
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1.10
991202
3.44
1.44
3 讨论
3.1 流动相的选择：山楂中牡荆素鼠李糖苷的HPLC测定方法未见报道，在试验过程中， 发现此流动相体系的选择十分困难，用甲醇-水体系、乙腈-水体系、甲醇-乙腈-水体系 等分离效果不理想，在反复摸索中，加入四氢呋喃，分离效果满意，峰对称性好，并达到基 线分离，故选择了报道的流动相。
3.2 流动相体系的配比要求比较严格，否则影响峰型及出蜂时间。
Address： Cui Yanping, Xi'an Tiancheng Drugs & Bioengineering Co . Ltd., Xi'an
参 考 文 献
1，郑虎占，董泽宏，余 靖.中药现代研究与应用.第一卷.北京：学苑出版 社，1997：597
2，高光跃，冯毓秀.药学学报，1995，30(2)：138
(2000-03-31收稿), 百拇医药