人顶体蛋白酶原基因片段的克隆及与β-半乳糖苷酶基因(LacZ)的融合基因载体的构建
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盛毅；纪亚忠；张其；赵亚南；李建秀；傅继梁
人顶体蛋白酶原基因|报告基因|载体构建
参见附件(52kb)。
盛毅；纪亚忠；张其；赵亚南；李建秀；傅继梁
关键词：人顶体蛋白酶原基因；报告基因；载体构建
摘要：为确定人顶体蛋白酶原基因特异的基因表达调控和蛋白分选的序列 ,从血白细胞中抽提人基因组 ,聚合酶链式反应 (PCR)扩增该基因 5’侧翼序列和第 1外显子。将扩增获得的 1.3Kb片段克隆到 pGEM T中 ,经酶切鉴定和DNA序列测定确定为人顶体蛋白酶基因片段。将上述基因片段克隆到pGEM 4Z中 ,适当酶切后与pSV β Galactosidase中经酶切去除SV40早期启动子的两片段连接 ,最终获得人顶体蛋白酶基因的 5’侧翼序列和第 1外显子与LacZ的融合基因载体 ,以及人顶体蛋白酶原基因 5’侧翼序列与LacZ的融合基因载体。
盛毅；纪亚忠；张其；赵亚南；李建秀；傅继梁
关键词：人顶体蛋白酶原基因；报告基因；载体构建
摘要：为确定人顶体蛋白酶原基因特异的基因表达调控和蛋白分选的序列 ,从血白细胞中抽提人基因组 ,聚合酶链式反应 (PCR)扩增该基因 5’侧翼序列和第 1外显子。将扩增获得的 1.3Kb片段克隆到 pGEM T中 ,经酶切鉴定和DNA序列测定确定为人顶体蛋白酶基因片段。将上述基因片段克隆到pGEM 4Z中 ,适当酶切后与pSV β Galactosidase中经酶切去除SV40早期启动子的两片段连接 ,最终获得人顶体蛋白酶基因的 5’侧翼序列和第 1外显子与LacZ的融合基因载体 ,以及人顶体蛋白酶原基因 5’侧翼序列与LacZ的融合基因载体。
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