人神经生长因子基因在大肠杆菌中的表达
http://www.100md.com
四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学研究所；UniversityofMaryland；Baltimore；MD21201；
人基因组DNA|神经生长因子|大肠杆菌|基因表达
参见附件(158kb)。
四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学研究所；UniversityofMaryland；Baltimore；MD21201；USA (成都610041)广州市中国人民解放军第四五八医院肝病研究所免疫生化室 ；(成都610041) 何晓嫱；陈俊杰；王若菡；游乐然；刘戟；陈建业；林佳
关键词：人基因组DNA；神经生长因子；大肠杆菌；基因表达
摘要：目的 为进一步研究神经生长因子 (β- NGF)及其基因的结构及功能奠定基础。方法 自行设计合成一对特异引物 ,直接从人血细胞基因组 DNA中 PCR扩增出 NGF基因片段 ,克隆至 p GEM- T Easy载体 ,p GEM- T- NGF克隆片段再定向插入原核表达载体 p GEX- 5 T,构建的重组体 p5 TNF转化大肠杆菌 JM10 9并经IPTG诱导表达。结果 经限制性酶谱和 DNA测序确证 ,p GEM- T- NGF克隆片段为 β- NGF全长编码序列(380 bp) ;SDS- PAGE、分光光度计扫描和 Western印迹显示 ,p5 TNF转化菌有 40 .5× 10 3u特异区带 ,融合蛋白表达量为 5 0 3.2 mg/ L,占菌体可溶性蛋白总量。
四川大学华西基础医学与法医学院生物化学与分子生物学研究所；UniversityofMaryland；Baltimore；MD21201；USA (成都610041)广州市中国人民解放军第四五八医院肝病研究所免疫生化室 ；(成都610041) 何晓嫱；陈俊杰；王若菡；游乐然；刘戟；陈建业；林佳
关键词：人基因组DNA；神经生长因子；大肠杆菌；基因表达
摘要：目的 为进一步研究神经生长因子 (β- NGF)及其基因的结构及功能奠定基础。方法 自行设计合成一对特异引物 ,直接从人血细胞基因组 DNA中 PCR扩增出 NGF基因片段 ,克隆至 p GEM- T Easy载体 ,p GEM- T- NGF克隆片段再定向插入原核表达载体 p GEX- 5 T,构建的重组体 p5 TNF转化大肠杆菌 JM10 9并经IPTG诱导表达。结果 经限制性酶谱和 DNA测序确证 ,p GEM- T- NGF克隆片段为 β- NGF全长编码序列(380 bp) ;SDS- PAGE、分光光度计扫描和 Western印迹显示 ,p5 TNF转化菌有 40 .5× 10 3u特异区带 ,融合蛋白表达量为 5 0 3.2 mg/ L,占菌体可溶性蛋白总量。
您现在查看是摘要介绍页，详见CAJ附件(158kb)。