人神经生长因子cDNA的体外扩增

http://www.100md.com 中国医科大学肿瘤研究所；沈阳110001 尹元琴；任常山

    参见附件(37kb)。

     中国医科大学肿瘤研究所；沈阳110001 尹元琴；任常山

    关键词：神经生长因子；cDNA

    摘要：目的 提取人胎盘组织中RNA ,以其中的mRNA为模板 ,扩增人 βNGFcDNA ,并测定核苷酸序列 ,为进一步克隆及表达 βNGFcDNA奠定基础。方法 采用异硫氢酸胍法提取RNA ;采用RT -PCR技术扩增人 βNGFcDNA ;Sanger双脱氧链终止法测定核苷酸序列。结果 从人胎盘组织中提取RNA ,以其中的mRNA为模板 ,扩增出人 βNGFcDNA ,经琼脂糖凝胶电泳鉴定为目的片段 ,序列测定证实与实际序列相符。结论 以人胎盘组织中的mRNA为模板 ,运用RT -PCR技术扩增 βNGFcDNA ,扩增时在 5′端以限制性内切酶酶切位点加以修饰 ,以便于 βNGF基因的克隆及表达。

    http://www.100md.com/html/analecta/2002/08/01/03/729.htm

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