重组腺辅助病毒载体的制备、纯化及其介导的基因转移
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南京医科大学动脉粥样硬化研究中心；江苏南京210029 王立峰；范乐明；陈丙莺
参见附件(108kb)。
南京医科大学动脉粥样硬化研究中心；江苏南京210029 王立峰；范乐明；陈丙莺
关键词：重组腺辅助病毒；载体制备；载体纯化
摘要：目的 :探讨一种制备、纯化重组腺辅助病毒 (r AAV)载体的有效方法。方法 :以质粒 PDG和含有人 apo AIc DNA的AAV载体共转染 2 93T细胞 ,继以 Iodixanol密度梯度离心结合肝素亲和层析法分离、纯化 ,斑点杂交鉴定 r AAV病毒颗粒数 ;并以含人 apo AIc DNA的 r AAV感染 C2 C12细胞。结果 :r AAV颗粒数为 7× 10 1 0 / ml;r AAV成功介导了人 apo AIc DNA在 C2 C12细胞中的表达并持续了 30天 ,在分化为肌管细胞后仍有此表达能力。结论 :本实验采取的制备、纯化 r AAV的方法简便、高效 ,r AAV成功介导 apo AI基因在肌源性细胞 C2 C12中的表达。
南京医科大学动脉粥样硬化研究中心；江苏南京210029 王立峰；范乐明；陈丙莺
关键词：重组腺辅助病毒；载体制备；载体纯化
摘要：目的 :探讨一种制备、纯化重组腺辅助病毒 (r AAV)载体的有效方法。方法 :以质粒 PDG和含有人 apo AIc DNA的AAV载体共转染 2 93T细胞 ,继以 Iodixanol密度梯度离心结合肝素亲和层析法分离、纯化 ,斑点杂交鉴定 r AAV病毒颗粒数 ;并以含人 apo AIc DNA的 r AAV感染 C2 C12细胞。结果 :r AAV颗粒数为 7× 10 1 0 / ml;r AAV成功介导了人 apo AIc DNA在 C2 C12细胞中的表达并持续了 30天 ,在分化为肌管细胞后仍有此表达能力。结论 :本实验采取的制备、纯化 r AAV的方法简便、高效 ,r AAV成功介导 apo AI基因在肌源性细胞 C2 C12中的表达。
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