人外周血中树突状细胞的诱导、培养及其表面标记的初步研究
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南京医科大学第一附属医院普外科 江苏南京210029 范萍；武正炎；王水；查小明；甄林林
参见附件(144kb)。
南京医科大学第一附属医院普外科 江苏南京210029 范萍；武正炎；王水；查小明；甄林林
关键词：树突状细胞；外周血；共刺激分子
摘要：目的:在人外周血中有效地诱导、培养树突状细胞(dendriticcekks,DC),并鉴定其表面分子的表达。方法:采用密度梯度离心的方法分离人外周血中的单个核细胞,在6孔板上贴壁2h,然后吸去悬浮细胞,用粒细胞 巨噬细胞集落群体刺激因子(GM CSF)、白细胞介素 4(IL 4)、肿瘤坏死因子 α(TNF α)细胞因子组合,刺激树突状细胞(DC)增殖、分化。用标有荧光素的单抗标记培养细胞,在激光共聚焦显微镜下拍摄标记有荧光素的细胞,在流式细胞仪上分析所培养的细胞。结果:该细胞直径在10～20μm,培养14天后,CD1a+48%,CD83+97%,CD40+33%,人体主要组织相容性复合物(MHC)Ⅱ+95%,CD80+98%,CD86+93%,CD83是DC的成熟标记。结论:该方法是一种可靠的诱导和培养DC的方法,对于乳腺癌患者还可通过动员等措施进一步提高DC的分离率。
南京医科大学第一附属医院普外科 江苏南京210029 范萍；武正炎；王水；查小明；甄林林
关键词：树突状细胞；外周血；共刺激分子
摘要：目的:在人外周血中有效地诱导、培养树突状细胞(dendriticcekks,DC),并鉴定其表面分子的表达。方法:采用密度梯度离心的方法分离人外周血中的单个核细胞,在6孔板上贴壁2h,然后吸去悬浮细胞,用粒细胞 巨噬细胞集落群体刺激因子(GM CSF)、白细胞介素 4(IL 4)、肿瘤坏死因子 α(TNF α)细胞因子组合,刺激树突状细胞(DC)增殖、分化。用标有荧光素的单抗标记培养细胞,在激光共聚焦显微镜下拍摄标记有荧光素的细胞,在流式细胞仪上分析所培养的细胞。结果:该细胞直径在10～20μm,培养14天后,CD1a+48%,CD83+97%,CD40+33%,人体主要组织相容性复合物(MHC)Ⅱ+95%,CD80+98%,CD86+93%,CD83是DC的成熟标记。结论:该方法是一种可靠的诱导和培养DC的方法,对于乳腺癌患者还可通过动员等措施进一步提高DC的分离率。
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