日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30重链可变区基因的体外扩增克隆及序列分析

http://www.100md.com 南京医科大学生殖医学研究中心；南京医科大学医学分子生物研究所 南京210029 宋晓彤；冯振卿；仇镇宁；李芸

日本血吸虫|抗独特型抗体|单克隆抗体|基因扩增|序列分析

    参见附件(91kb)。

     南京医科大学生殖医学研究中心；南京医科大学医学分子生物研究所 南京210029 宋晓彤；冯振卿；仇镇宁；李芸茜；林敏；柏慧；沙家豪；管晓虹

    关键词：日本血吸虫；抗独特型抗体；单克隆抗体；基因扩增；序列分析

    摘要：目的 分离日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30重链可变区(VH)基因并测定其序列。方法 根据鼠免疫球蛋白重链可变区基因FR1和FR4序列的保守性,化学合成体外扩增Ig重链可变区基因的数对引物。以日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30的杂交瘤细胞株基因组DNA为模板,扩增VH基因,将其克隆入pUC19载体,重组子用Sanger's双脱氧链终止法测定序列,将序列与GeneBank中已发表的抗体序列比较。结果 VH基因全长357bp,属鼠免疫球蛋白重链第 亚类,由种系基因V、Dsp2.8与JH4重排而来。该VH基因序列已被GeneBank收录(accessionNoAF282622)。结论 该VH基因为日本血吸虫单克隆抗独特型抗体NP30重链可变区基因。

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