鼠白细胞介素-12双亚基共表达质粒的构建及在体内外的表达
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浙江大学医学院；浙江大学医学院 浙江杭州310031 陈玮；邵传森；沈建根；鲍建芳；潘建平；韩伟；寿林；项哨
白细胞介素-12,生物合成|质粒|基因表达|杀伤细胞|天然|遗传载体|克隆|分子|双亚基共表达|小鼠
参见附件(109kb)。
浙江大学医学院；浙江大学医学院 浙江杭州310031 陈玮；邵传森；沈建根；鲍建芳；潘建平；韩伟；寿林；项哨；郑树
关键词：白细胞介素-12/生物合成；质粒；基因表达；杀伤细胞；天然；遗传载体；克隆；分子；双亚基共表达；小鼠
摘要：目的:构建双亚基共表达鼠白细胞介素-12(mIL-12)真核表达质粒,并观察其在体内外的表达。方法:将mIL-12p35和p40全长编码cDNA构建在pcDNA3.1载体上,然后把p35表达单元(CMV-p35-BGHPA)插入pcDNA3.1/p40载体,使两个目的基因均受各自的启动子CMV控制,构建成mIL-12双亚基共表达质粒pCmIL-12,并进行体内外表达。结果:pCmIL-12在体外转染COS-7细胞后,经ELISA证实有mIL-12表达,其表达上清能在体外明显增强小鼠NK细胞活性。小鼠皮内注射pCmIL-12亦能增强小鼠NK细胞活性。结论:所构建的质粒在体内外均能表达有生物学活性的mIL-12。
浙江大学医学院；浙江大学医学院 浙江杭州310031 陈玮；邵传森；沈建根；鲍建芳；潘建平；韩伟；寿林；项哨；郑树
关键词：白细胞介素-12/生物合成；质粒；基因表达；杀伤细胞；天然；遗传载体；克隆；分子；双亚基共表达；小鼠
摘要：目的:构建双亚基共表达鼠白细胞介素-12(mIL-12)真核表达质粒,并观察其在体内外的表达。方法:将mIL-12p35和p40全长编码cDNA构建在pcDNA3.1载体上,然后把p35表达单元(CMV-p35-BGHPA)插入pcDNA3.1/p40载体,使两个目的基因均受各自的启动子CMV控制,构建成mIL-12双亚基共表达质粒pCmIL-12,并进行体内外表达。结果:pCmIL-12在体外转染COS-7细胞后,经ELISA证实有mIL-12表达,其表达上清能在体外明显增强小鼠NK细胞活性。小鼠皮内注射pCmIL-12亦能增强小鼠NK细胞活性。结论:所构建的质粒在体内外均能表达有生物学活性的mIL-12。
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