自发性炎性疾病双转基因小鼠的研究
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100044北京大学人民医院关节病诊疗研究中心 王东 吕厚山 张斌 陈占昆 蒋东芳 艾京
参见附件(32kb)。
100044北京大学人民医院关节病诊疗研究中心 王东 吕厚山 张斌 陈占昆 蒋东芳 艾京
关键词：脊柱炎；强直性；小鼠；转基因；炎症
摘要：目的 通过建立强直性脊柱炎HLA B2704和hβ2m双转基因动物模型,证实HLA B2704和hβ2m基因在双转基因小鼠自发性炎性疾病发病过程中的作用,为研究B27相关性疾病的病因学、预防和治疗提供有力的工具。 方法 将HLA B2704和hβ2m转基因阳性小鼠交配后出生的子代,应用PCR、斑点杂交、Southern杂交、RT PCR、流式细胞术和免疫组织化学等方法进行筛选鉴定和表达检测。同时隔日观察小鼠的发病情况,发病鼠行HE染色观察病理变化。 结果 有8只高拷贝双转基因小鼠2周左右出现皮肤病变,关节炎和趾甲变化等自发性炎性疾病表现,正常小鼠、B27单转基因小鼠和HLA B27/hβ2m双转基因小鼠流式细胞计的检测结果分别为0 63%、7 87%、35 87%,双转基因小鼠的细胞膜表面可见HLA B2704高表达,而在B27单转基因小鼠表达不明显。 结论 HLA B2704重链可诱发转基因小鼠发生自发性炎性疾病,hβ2m可与B27形成稳定的复合体,从而稳定和增强HLA B2704在细胞膜表面的表达。
100044北京大学人民医院关节病诊疗研究中心 王东 吕厚山 张斌 陈占昆 蒋东芳 艾京
关键词：脊柱炎；强直性；小鼠；转基因；炎症
摘要：目的 通过建立强直性脊柱炎HLA B2704和hβ2m双转基因动物模型,证实HLA B2704和hβ2m基因在双转基因小鼠自发性炎性疾病发病过程中的作用,为研究B27相关性疾病的病因学、预防和治疗提供有力的工具。 方法 将HLA B2704和hβ2m转基因阳性小鼠交配后出生的子代,应用PCR、斑点杂交、Southern杂交、RT PCR、流式细胞术和免疫组织化学等方法进行筛选鉴定和表达检测。同时隔日观察小鼠的发病情况,发病鼠行HE染色观察病理变化。 结果 有8只高拷贝双转基因小鼠2周左右出现皮肤病变,关节炎和趾甲变化等自发性炎性疾病表现,正常小鼠、B27单转基因小鼠和HLA B27/hβ2m双转基因小鼠流式细胞计的检测结果分别为0 63%、7 87%、35 87%,双转基因小鼠的细胞膜表面可见HLA B2704高表达,而在B27单转基因小鼠表达不明显。 结论 HLA B2704重链可诱发转基因小鼠发生自发性炎性疾病,hβ2m可与B27形成稳定的复合体,从而稳定和增强HLA B2704在细胞膜表面的表达。
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