恶性疟原虫MSA2编码基因分枝杆菌穿梭质粒的构建及序列测定
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深圳市卫生防疫站；广东省妇幼保健医院 广东深圳518020 吴少庭；高世同；林敏；张仁利；梁驹卿
疟原虫|恶性|裂殖子表面抗原-2编码基因|克隆|序列分析
参见附件(93kb)。
深圳市卫生防疫站；广东省妇幼保健医院 广东深圳518020 吴少庭；高世同；林敏；张仁利；梁驹卿
关键词：疟原虫；恶性；裂殖子表面抗原-2编码基因；克隆；序列分析
摘要：目的 构建恶性疟原虫 FCC- 1/ HN株 MSA2编码基因分枝杆菌穿梭质粒重组子 p BCG5 .6 / MSA2 ,并进行序列测定。 方法 根据恶性疟原虫 MSA2编码基因的两侧序列设计引物 ,采用 PCR技术扩增出 MSA2编码基因全长片段 ,经低熔点琼脂糖挖块法回收纯化后 ,插入分枝杆菌穿梭质粒 p BCG5 .6 / MSA2 ,并转化大肠杆菌 DH5 α,快速酚法初筛阳性重组子 ,阳性克隆以 PCR法与限制性酶切分析鉴定后 ,双脱氧链终止法双向进行序列测定。 结果 从恶性疟原虫基因组中扩增出约 82 0 bp的基因片段 ,所构建 p BCG5 .6 / MSA2重组体阳性克隆经双酶切和 PCR鉴定与预期结果一
深圳市卫生防疫站；广东省妇幼保健医院 广东深圳518020 吴少庭；高世同；林敏；张仁利；梁驹卿
关键词：疟原虫；恶性；裂殖子表面抗原-2编码基因；克隆；序列分析
摘要：目的 构建恶性疟原虫 FCC- 1/ HN株 MSA2编码基因分枝杆菌穿梭质粒重组子 p BCG5 .6 / MSA2 ,并进行序列测定。 方法 根据恶性疟原虫 MSA2编码基因的两侧序列设计引物 ,采用 PCR技术扩增出 MSA2编码基因全长片段 ,经低熔点琼脂糖挖块法回收纯化后 ,插入分枝杆菌穿梭质粒 p BCG5 .6 / MSA2 ,并转化大肠杆菌 DH5 α,快速酚法初筛阳性重组子 ,阳性克隆以 PCR法与限制性酶切分析鉴定后 ,双脱氧链终止法双向进行序列测定。 结果 从恶性疟原虫基因组中扩增出约 82 0 bp的基因片段 ,所构建 p BCG5 .6 / MSA2重组体阳性克隆经双酶切和 PCR鉴定与预期结果一
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