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编号:10196840
重组人内皮细胞抑制素腺病毒载体的构建及其应用
http://www.100md.com 第二军医大学附属长征医院普外科 200003上海 倪之嘉;潘卫;王元和;戚中田;施靖华;付志仁;王强
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     第二军医大学附属长征医院普外科 200003上海 倪之嘉;潘卫;王元和;戚中田;施靖华;付志仁;王强

    关键词:腺病毒;基因表达;血管形成抑制剂

    摘要:目的 构建表达人内皮细胞抑制素 (Endostatin)的重组腺病毒载体 ,并进行活性检测。方法 将含有IL3分泌肽的人Endostatin全长cDNA插入穿梭质粒pAdCMV产生重组质粒pAd IL3 Endo ,通过脂质体介导与 pBHG1 0共转染 2 93细胞 ,经同源重组产生重组腺病毒Ad IL3 Endo。体外转染人结肠癌SW62 0细胞并观察其上清对人脐静脉内皮细胞 (HUVEC)生长的影响。结果 扩增到的Ad IL3 Endo的滴度为 4 .3× 1 0 1 2 空斑形成单位 (pfu) /L ,多聚酶链反应 (PCR)显示在转染的细胞中有人EndostatincDNA的存在 ,Westernblot显示转染细胞上清中有人Endostatin蛋白表达 ,台盼蓝...

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