真核表达载体pcDNA3.1-h转化生长因子-β1的构建
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上海第二医科大学组织工程研究中心 200011 刘方军；曹谊林；商庆新；崔磊；刘伟
组织工程|基因重组|转化生长因子-β1|质粒
参见附件(122kb)。
上海第二医科大学组织工程研究中心 200011 刘方军；曹谊林；商庆新；崔磊；刘伟
关键词：组织工程；基因重组；转化生长因子-β1；质粒
摘要：目的 为研究软骨细胞基因转染的可行性创造条件 ,从而为基因修饰的软骨组织工程研究奠定基础。方法 应用基因重组技术和限制性内切酶酶切构建并鉴定 pcDNA3 .1 TGF β1真核表达载体 ,经Fugene6介导质粒转染 3T3细胞后应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测hTGF β1mRNA在真核细胞中的表达。结果 重组真核表达载体 pcDNA3 .1 TGF β1经限制性内切酶XhoⅠ和HindⅢ酶切 ,电泳后显示 1 .35kb的hTGF β1目的片段和 5 .40kb的 pcDNA3 .1载体片段 ,证明重组质粒连接正确 ;经RT PCR检测了hTGF β1在转录水平mRNA的表达情况 ,表明质粒转染 3T3细胞后hTGF β...
上海第二医科大学组织工程研究中心 200011 刘方军；曹谊林；商庆新；崔磊；刘伟
关键词：组织工程；基因重组；转化生长因子-β1；质粒
摘要：目的 为研究软骨细胞基因转染的可行性创造条件 ,从而为基因修饰的软骨组织工程研究奠定基础。方法 应用基因重组技术和限制性内切酶酶切构建并鉴定 pcDNA3 .1 TGF β1真核表达载体 ,经Fugene6介导质粒转染 3T3细胞后应用逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)检测hTGF β1mRNA在真核细胞中的表达。结果 重组真核表达载体 pcDNA3 .1 TGF β1经限制性内切酶XhoⅠ和HindⅢ酶切 ,电泳后显示 1 .35kb的hTGF β1目的片段和 5 .40kb的 pcDNA3 .1载体片段 ,证明重组质粒连接正确 ;经RT PCR检测了hTGF β1在转录水平mRNA的表达情况 ,表明质粒转染 3T3细胞后hTGF β...
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