柯萨奇B1病毒VP1基因DNA免疫的研究
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中国预防医学科学院病毒 赵铁强；田野；钟照华；梁瑛娟；韩福生；钟学宽；皮国华；孟繁超
柯萨奇B1病毒|DNA疫苗|免疫应答
参见附件(113kb)。
中国预防医学科学院病毒 赵铁强；田野；钟照华；梁瑛娟；韩福生；钟学宽；皮国华；孟繁超
关键词：柯萨奇B1病毒；DNA疫苗；免疫应答
摘要：目的 构建柯萨奇 B1病毒 (CVB1)的 DNA疫苗 ,评价其免疫学性状。方法 将重组质粒 p MD18-T- VPl中的 CVB1VP1基因亚克隆至 p CEP4载体 ,构建真核表达系统 p CEP4 - VP1作为 DNA疫苗 ,经酶切、PCR和测序鉴定后转染至 He L a细胞 ,用间接免疫荧光法检测 CVB1抗原的体外表达。提纯制备 p CEP4 - VP1接种 BAL B/ C小鼠 ,取血清用 EL ISA法检测抗 CVB1Ig M和 Ig G,用 51 Cr释放法测定 CTL反应。结果 酶切、PCR和测序证明 VP1DNA疫苗构建正确 ;转染 p CEP4 - VP1的 He L a细胞中可见到荧光标记 ,提示表达了 VP1蛋白 ;接种 p CEP4 - VP1的小鼠可检测到抗 CV.
中国预防医学科学院病毒 赵铁强；田野；钟照华；梁瑛娟；韩福生；钟学宽；皮国华；孟繁超
关键词：柯萨奇B1病毒；DNA疫苗；免疫应答
摘要：目的 构建柯萨奇 B1病毒 (CVB1)的 DNA疫苗 ,评价其免疫学性状。方法 将重组质粒 p MD18-T- VPl中的 CVB1VP1基因亚克隆至 p CEP4载体 ,构建真核表达系统 p CEP4 - VP1作为 DNA疫苗 ,经酶切、PCR和测序鉴定后转染至 He L a细胞 ,用间接免疫荧光法检测 CVB1抗原的体外表达。提纯制备 p CEP4 - VP1接种 BAL B/ C小鼠 ,取血清用 EL ISA法检测抗 CVB1Ig M和 Ig G,用 51 Cr释放法测定 CTL反应。结果 酶切、PCR和测序证明 VP1DNA疫苗构建正确 ;转染 p CEP4 - VP1的 He L a细胞中可见到荧光标记 ,提示表达了 VP1蛋白 ;接种 p CEP4 - VP1的小鼠可检测到抗 CV.
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