丙型肝炎病毒非结构区NS3基因在大肠埃希菌中的可诱导性表达
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解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心 成军;钟彦伟;刘妍;董菁;杨继珍;杨守纯
肝炎病毒|丙型|NS3|基因表达|聚合酶链反应|大肠埃希菌
参见附件(34kb)。
解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心 成军;钟彦伟;刘妍;董菁;杨继珍;杨守纯
关键词:肝炎病毒;丙型;NS3;基因表达;聚合酶链反应;大肠埃希菌
摘要:目的 构建丙型肝炎病毒 (HCV)NS3基因的原核细胞表达载体 ,实现在大肠埃希菌中的可诱导性表达。方法 应用聚合酶链反应 (PCR)技术 ,以美国HCV H株全长cDNA质粒为模板 ,扩增获得NS3基因片段 ,克隆到原核表达载体pET 30C(+)中 ,构建原核表达载体pET NS3,转化BL2 1(DE3)宿主菌 ,以IPTG诱导 ,获得NS3蛋白的可诱导性表达 ,以HCVNS3的单链可变区抗体 (ScFv)证实表达的NS3蛋白的特异性。结果 以HCVNS3基因序列特异性引物 ,PCR扩增获得 1893bp的NS3DNA片段 ,插入pET 30C(+)表达载体。转化BL 2 1(DE3)受体菌 ,经培养、IPTG诱导 ,获得了重组HCVNS3蛋白的表达...
解放军第三○二医院传染病研究所基因治疗研究中心 成军;钟彦伟;刘妍;董菁;杨继珍;杨守纯
关键词:肝炎病毒;丙型;NS3;基因表达;聚合酶链反应;大肠埃希菌
摘要:目的 构建丙型肝炎病毒 (HCV)NS3基因的原核细胞表达载体 ,实现在大肠埃希菌中的可诱导性表达。方法 应用聚合酶链反应 (PCR)技术 ,以美国HCV H株全长cDNA质粒为模板 ,扩增获得NS3基因片段 ,克隆到原核表达载体pET 30C(+)中 ,构建原核表达载体pET NS3,转化BL2 1(DE3)宿主菌 ,以IPTG诱导 ,获得NS3蛋白的可诱导性表达 ,以HCVNS3的单链可变区抗体 (ScFv)证实表达的NS3蛋白的特异性。结果 以HCVNS3基因序列特异性引物 ,PCR扩增获得 1893bp的NS3DNA片段 ,插入pET 30C(+)表达载体。转化BL 2 1(DE3)受体菌 ,经培养、IPTG诱导 ,获得了重组HCVNS3蛋白的表达...
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