NF-κB_3结合位点在人TNF-α基因转录调节作用中的研究
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北京大学人类疾病基因研究中心北京100083;华中科技大学同济医学院免疫系 武汉430030 史须;李卓娅;龚非力
核因子-κB|TNF-α启动子|脂多糖|亲和力
参见附件(75kb)。
北京大学人类疾病基因研究中心北京100083;华中科技大学同济医学院免疫系 武汉430030 史须;李卓娅;龚非力;冯纬;徐勇;熊平
关键词:核因子-κB;TNF-α启动子;脂多糖;亲和力
摘要:目的 :探讨TNF α启动子中 3个κB位点在调节基因转录中的作用及其与核蛋白作用的亲和力关系。方法 :用含不同调节区域的重组报告基因进行HL 6 0细胞的基因转染 ,检测LPS刺激前后及κB3 反义寡核苷酸封闭后的报告基因表达水平 ;提取LPS刺激 6h的HL 6 0的细胞核蛋白 ,用凝胶迁移率改变实验及竞争结合实验比较NF κB与TNF α的 3个NF κB位点的亲和力。结果 :尽管TNF α基因中 3个κB位点都参与该基因的诱导和非诱导性转录调节 ,但κB3 位点的作用更为重要 ;3个κB位点能同LPS刺激和非刺激的HL 6 0细胞核蛋白发生特异性结合 ,但LPS刺激的蛋白 DNA复合物电...
北京大学人类疾病基因研究中心北京100083;华中科技大学同济医学院免疫系 武汉430030 史须;李卓娅;龚非力;冯纬;徐勇;熊平
关键词:核因子-κB;TNF-α启动子;脂多糖;亲和力
摘要:目的 :探讨TNF α启动子中 3个κB位点在调节基因转录中的作用及其与核蛋白作用的亲和力关系。方法 :用含不同调节区域的重组报告基因进行HL 6 0细胞的基因转染 ,检测LPS刺激前后及κB3 反义寡核苷酸封闭后的报告基因表达水平 ;提取LPS刺激 6h的HL 6 0的细胞核蛋白 ,用凝胶迁移率改变实验及竞争结合实验比较NF κB与TNF α的 3个NF κB位点的亲和力。结果 :尽管TNF α基因中 3个κB位点都参与该基因的诱导和非诱导性转录调节 ,但κB3 位点的作用更为重要 ;3个κB位点能同LPS刺激和非刺激的HL 6 0细胞核蛋白发生特异性结合 ,但LPS刺激的蛋白 DNA复合物电...
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