临床分离耐喹诺酮类铜绿假单胞菌gyrA基因单点突变研究
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四川大学华西医学中心微生物学教研室 刘莉；朱雯；贾文祥；李学如；曾蔚；张再容；马巨辉
铜绿假单胞菌|限制性片段多态性分析(RFLP)|DNA单链构象多态性分析(SSCP)
参见附件(59kb)。
四川大学华西医学中心微生物学教研室 刘莉；朱雯；贾文祥；李学如；曾蔚；张再容；马巨辉
关键词：铜绿假单胞菌；限制性片段多态性分析(RFLP)；DNA单链构象多态性分析(SSCP)
摘要：目的 研究临床分离铜绿假单胞菌耐喹诺酮类药物的分子机制 ,对PCR RFLP SSCP分析铜绿假单胞菌gyrA基因突变的可行性评价。方法 以铜绿假单胞菌gyrA基因序列为靶序列 ,用PCR、PCR SSCP、PCR RFLP、DNA测序、OMIGA软件分析等方法 ,对铜绿假单胞菌gyrA基因突变进行研究。结果 在铜绿假单胞菌 10株耐药突变株中 ,有 8株的gyrA基因的 83位表现出高频的单点突变 ,其突变方式全为ACC→ATC。gyrA的PCR扩增产物SacⅡ酶切片段与测序结果一致。SSCP带谱与测序结果比较 ,除 1株 (PSA2 )其SSCP带谱与标准株相同 ,但测序结果有点突变外 ,其余菌株与测序结果一致。
四川大学华西医学中心微生物学教研室 刘莉；朱雯；贾文祥；李学如；曾蔚；张再容；马巨辉
关键词：铜绿假单胞菌；限制性片段多态性分析(RFLP)；DNA单链构象多态性分析(SSCP)
摘要：目的 研究临床分离铜绿假单胞菌耐喹诺酮类药物的分子机制 ,对PCR RFLP SSCP分析铜绿假单胞菌gyrA基因突变的可行性评价。方法 以铜绿假单胞菌gyrA基因序列为靶序列 ,用PCR、PCR SSCP、PCR RFLP、DNA测序、OMIGA软件分析等方法 ,对铜绿假单胞菌gyrA基因突变进行研究。结果 在铜绿假单胞菌 10株耐药突变株中 ,有 8株的gyrA基因的 83位表现出高频的单点突变 ,其突变方式全为ACC→ATC。gyrA的PCR扩增产物SacⅡ酶切片段与测序结果一致。SSCP带谱与测序结果比较 ,除 1株 (PSA2 )其SSCP带谱与标准株相同 ,但测序结果有点突变外 ,其余菌株与测序结果一致。
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