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编号:10318541
人IκBα基因原核表达质粒的构建及TrxAIκBα融合蛋白的制备
http://www.100md.com 重庆医科大学附属二院神经外科;重庆医科大学病毒性肝炎研究所 陈海锋;程远;黄爱龙;刘冰榕
IκBα|基因重组|原核表达|融合蛋白
    参见附件(58kb)。

     重庆医科大学附属二院神经外科;重庆医科大学病毒性肝炎研究所 陈海锋;程远;黄爱龙;刘冰榕

    关键词:IκBα;基因重组;原核表达;融合蛋白

    摘要:目的 利用基因重组技术构建人IκBα基因原核表达质粒 ,制备TrxA IκBα融合蛋白 ,以便进一步研究IκBα的生物学功能和制备相应抗体。方法 以重组质粒pGEM T IκBα为模板 ,利用PCR方法扩增出带有BamHⅠ和HindⅢ酶切位点的人IκBα基因cDNA ,经相应酶切后插入原核表达载体pET 32a(+)。重组表达质粒pET32a(+) IκBα转化大肠杆菌BL2 1(DE3) ,经IPTG诱导表达TrxA IκBα融合蛋白。Westernblot试验鉴定表达蛋白。超声波破菌后采用Ni NTA树脂对TrxA IκBα融合蛋白进行纯化。结果 酶切鉴定证实人IκBα基因cDNA已插入原核表达载体pET 32a(+)。重组表达...

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