抗人IL-2Rα基因工程抗体Fab的构建和表达
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吉林大学基础医学院免疫教研室 长春 130021 李佳莉;朱迅
参见附件(1390kb)。
吉林大学基础医学院免疫教研室 长春 130021 李佳莉;朱迅
关键词:IL-2Rα;基因工程抗体;Fab
摘要:目的:构建和表达抗人IL-2Rα基因工程抗体Fab片段,并测定该抗体片段的生物学活性。方法:采用连续PCR方法构建抗人 IL-2Rα抗体 Fab克隆载体5G1-pA22,并通过限制性酶切反应将抗人 IL-2Rα抗体 Fab基因从克隆载体 5G1-pA22重组人表达载体pET-28b,并在大肠杆菌BL21(DE3)中用IPTG诱导以包含体形式高效表达,该表达产物约占菌体蛋白20%以上。经超声破碎、洗涤、变性和复性后,采用双抗体夹心ELISA法及体外抗体竞争抑制试验鉴定表达产物的生物学活性。结果:抗人IL-2Rα基因工程抗体Fab成功构建,并以包含体形式表达,表达产物的产量达1mg/ml。双抗体 ...
吉林大学基础医学院免疫教研室 长春 130021 李佳莉;朱迅
关键词:IL-2Rα;基因工程抗体;Fab
摘要:目的:构建和表达抗人IL-2Rα基因工程抗体Fab片段,并测定该抗体片段的生物学活性。方法:采用连续PCR方法构建抗人 IL-2Rα抗体 Fab克隆载体5G1-pA22,并通过限制性酶切反应将抗人 IL-2Rα抗体 Fab基因从克隆载体 5G1-pA22重组人表达载体pET-28b,并在大肠杆菌BL21(DE3)中用IPTG诱导以包含体形式高效表达,该表达产物约占菌体蛋白20%以上。经超声破碎、洗涤、变性和复性后,采用双抗体夹心ELISA法及体外抗体竞争抑制试验鉴定表达产物的生物学活性。结果:抗人IL-2Rα基因工程抗体Fab成功构建,并以包含体形式表达,表达产物的产量达1mg/ml。双抗体 ...
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