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编号:10202166
HIV-1整合酶酶联免疫吸附试验及其抑制剂的研究
http://www.100md.com 中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所病毒室 100050北京 郭志敏;陈鸿珊
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     中国医学科学院中国协和医科大学医药生物技术研究所病毒室 100050北京 郭志敏;陈鸿珊

    关键词:HIV;酶联免疫吸附测定;抑制剂

    摘要:目的 建立一种检测人类免疫缺陷病毒 1型 (HIV - 1 )整合酶的酶联免疫吸附试验(ELISA)方法 ,用于筛选和研究HIV - 1整合酶抑制剂。方法 将质粒F1 85K C2 80SIN1 2 88转化到大肠埃希菌中 ,经IPTG诱导表达 ,柱亲和层析纯化 ,获得HIV 1整合酶融合蛋白。建立酶联免疫吸附试验方法测定其生物学活性 ,与3 2 P同位素标记方法比较 ,并用ELISA方法筛选HIV 1整合酶的抑制剂。结果 SDS PAGE电泳分析显示 ,相对分子质量 30 0 0 0上方有HIV 1整合酶融合蛋白条带出现。ELISA及3 2 P同位素标记法证实 ,此融合蛋白对于特异底物具有 3′切割和链转移活性。ELISA反应 ...

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