HAV3a与3d融合蛋白在原核系统中的表达及其抗原活性的研究
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中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所肝炎室 100052北京 程菡茵；周永东；郭瑜；毕胜利
参见附件(111kb)。
中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所肝炎室 100052北京 程菡茵；周永东；郭瑜；毕胜利
关键词：肝炎病毒；甲型；表达；纯化；抗原性
摘要：目的 研究HAV 3a(位于 14 0 3～ 14 5 6aa)与 3d(位于 1719～ 176 4aa)融合蛋白在原核系统中的表达 ,并探讨该重组蛋白的抗原活性及其应用价值。方法 采用常规PCR方法 ,从克隆有HAVHM175株全长cDNA基因的克隆载体pHAV16H1上扩增出目的基因 ,以pET 30a作为表达载体 ,构建重组表达质粒pET 3ad。该重组质粒在大肠埃希菌BL2 1(DE3)中经IPTG诱导表达。采用镍金属柱螯和亲和层析纯化的方法对重组蛋白进行纯化。以Westernblot和间接ELISA的方法检测重组蛋白的抗原活性。结果 重组质粒pET 3ad经双酶切 (NcoⅠ /HindⅢ )鉴定和序列测定证实构建成功。在大肠埃...
中国疾病预防控制中心病毒病预防控制所肝炎室 100052北京 程菡茵；周永东；郭瑜；毕胜利
关键词：肝炎病毒；甲型；表达；纯化；抗原性
摘要：目的 研究HAV 3a(位于 14 0 3～ 14 5 6aa)与 3d(位于 1719～ 176 4aa)融合蛋白在原核系统中的表达 ,并探讨该重组蛋白的抗原活性及其应用价值。方法 采用常规PCR方法 ,从克隆有HAVHM175株全长cDNA基因的克隆载体pHAV16H1上扩增出目的基因 ,以pET 30a作为表达载体 ,构建重组表达质粒pET 3ad。该重组质粒在大肠埃希菌BL2 1(DE3)中经IPTG诱导表达。采用镍金属柱螯和亲和层析纯化的方法对重组蛋白进行纯化。以Westernblot和间接ELISA的方法检测重组蛋白的抗原活性。结果 重组质粒pET 3ad经双酶切 (NcoⅠ /HindⅢ )鉴定和序列测定证实构建成功。在大肠埃...
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