hERR1/HBD酵母表达质粒的构建及初步鉴定

http://www.100md.com 第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室 重庆400038 陈敏；李渝萍；陈健；陈彬；周度金

乳腺癌|雌激素受体相关受体1|酵母双杂合系统

    参见附件(43kb)。

     第三军医大学基础医学部生物化学与分子生物学教研室 重庆400038 陈敏；李渝萍；陈健；陈彬；周度金

    关键词：乳腺癌；雌激素受体相关受体1；酵母双杂合系统

    摘要：目的 构建酵母双杂合系统诱饵蛋白表达质粒pGBT9 hERR1 HBD。方法 PCR扩增hERR1 HBD(激素激活域 )cDNA ,与酵母Gal4 DBD(DNA结合域 )表达质粒pGBT9重组构建融合蛋白表达质粒 ,酶切、测序鉴定后 ,用于酵母双杂合分析 ,检查其自主转录激活作用及与已知hERR1辅活化子PNRC的相互作用。结果 该质粒有正确的阅读框 ,其表达蛋白不具有自主转录激活作用 ,与已知核受体辅活化子PNRC有明显的相互作用。结论 成功构建了表达质粒pGBT9 hERR1 HBD ,并证实该质粒可作为酵母双杂合系统的诱饵蛋白质粒 ,用于乳腺组织中与hERR1有相互作用的蛋白质基因的筛选。

    http://www.100md.com/html/analecta/2003/08/01/54/310.htm

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