2型糖尿病与内皮素、一氧化氮相关性研究
作者：孙金凤 尹晓 宋志民 肖正大 颜淑红 逄曙光
单位：济南市中心医院 山东济南 250013
关键词：2型糖尿病 内皮素 一氧化氮
山东医药002402 摘要 用RIA法、ELASAI等方法测定92例2型糖尿病并血管并发症患者、90例单纯2型糖尿病患者及40例正常人的血浆ET、NO、IAI等指标并进行比较。结果：2型糖尿病并血管并发症组较单纯2型糖尿病组及正常对照组IAI显著降低，血浆ET水平升高，NO水平降低，IAI与ET水平呈负相关，与NO呈正相关，ET与NO呈负相关。结论：胰岛素抵抗、血浆ET水平升高、NO水平降低与2型糖尿病血管并发症的发生、发展关系密切。
中图分类号：R58 文献标识码：A
Abstract The levels of plasma ET，NO and IAI of 92 cases type 2 diabetes with vascular complication，90 cases without complication and 40 cases normal persons were measured and compared by a RIA or on ELASAI mothod.Result showed the levels of NO and IAI were significantly lower and levels of ET were higher in diabetes with vascular complication than that in normal persons and diabetes without vascular complication.These suggested insulin resistance，increased plasma ET and decreased plasma NO R58 played an important role in the progress of vascular complication in type 2 diabets.
, 百拇医药
Key words Type 2 diabetes ET NO
2型糖尿病慢性并发症是糖尿病患者致残、早亡的主要原因。胰岛素抵抗、内皮素(ET)、一氧化氮(NO)与糖尿病血管病变的发生、发展密切相关。本研究通过测定糖尿病患者胰岛素敏感指数(IAI)、ET、NO水平变化来探讨血管病变与IAI、ET、NO的相关性。现报告如下。
1 一般资料
182例2型糖尿病患者均为我院内分泌科门诊及住院患者，符合1985年WHO糖尿病诊断标准。其中男89例，女93例，年龄49.6±13.2岁，病程9.06±5.47年。按有无血管并发症(心、脑、肾、视网膜)分为糖尿病无血管并发症组(B组)、糖尿病血管并发症组(C组)，另设对照组(A组)，三组年龄、性别、体重指数相匹配。A组：正常对照组40例，男22例，女18例，年龄44.2±12.5岁。B组：糖尿病无血管并发症组90例，男38例，女52例，年龄47.2±9.5岁，病程4～8年。C组：糖尿病并血管并发症组92例，男53例，女39例，年龄49±11.57岁，病程6～12年。
, http://www.100md.com
2 方法
2.1 糖耐量-胰岛素-C肽释放试验 采用放免分析法。药盒由中国原子能研究所提供，使用西安产的FJ-2003全自动γ-免疫计数仪进行测定空腹及馒头餐后30min、60min、120min、180min血糖、胰岛素、C肽水平。
2.2 ET测定 采用放射免疫分析法。取静脉血2ml，注入10%EDTA二钠30μl和抑肽酶40μl于试管中，混匀，4℃，3000r/min离心10分钟，分离血浆，置-20℃冰箱备用，测定前将样品置室温复融，再次4℃，3000r/min离心5分钟，取上清液测定。药盒由解放军总院东亚免疫技术研究所提供。使用西安产EJ-2003全自动?免疫计数器进行测定，ET正常值为50.8±7.58pg/ml。
2.3 NO测定 采用酶法高密度测定(ELASAI)。药盒由深圳晶美生物工程有限公司提供。设置测定管与标准管。测定管样品0.1ml，试剂10.1ml，试剂20.1ml，轻轻混匀，37℃水浴1小时，另加试剂30.5ml，试剂40.5ml混匀，室温放置10分钟后，530nm波长，0.5cm比色杯，空白调零，分别读取测定管与标准管OD值，按公式计算：NO(μmol/L)＝测定管OD/标准管OD×100μmol/L(NO正常值＝37.6±17.2μmol/L)
, 百拇医药
2.4 血糖、血胆固醇、血甘油三酯、血尿酸 采用BECKMAN全自动分析仪测定，HbAlc采用U.S.A.B10-RAD公司生产的分光光度仪测定。
2.5 IAI的测定 应用空腹血糖与胰岛素乘积的倒数计算[1]。
2.6 统计学处理 采用SAS统计分析软件，计算资料所得数据以x±s表示，组间均值差异及治疗后均值的差异比较采用t检验，NO、ET与IR相关关系采用直线回归分析。
3 结果
3.1 各组生化指标的改变见表1。
表1 三组人群生化指标的变化(
±s) 组别
, 百拇医药
n
HbAlc%
IAI
Ch(mmol/L)
Tg(mmol/L)
BMI(kg/m2)
ET(pg/ml)
NO(μmol/L)
A
B
C
40
, 百拇医药
90
92
4.8±1.3
7.41±2.35
8.36±3.52
-5.43±1.18
-7.6±1.19
-8.32±1.35
4.37±0.82
6.48±1.18
6.73±1.08
1.31±0.75
, 百拇医药
2.53±1.62
2.57±1.34
26.27±1.37
26.92±1.89
27.83±2.32
50.8±1.35
74.15±28.36
98.76±32.51?
37.6±17.2
34.24±15.31
23.48±9.21?
, 百拇医药
注：C组与A组、B组比较 ? P<0.013.2 各组血浆ET、NO浓度的改变 见表1，结果显示，B组与C组的糖尿病患者血浆ET浓度较对照组明显升高(P<0.01)，而C组又较B组显著升高(P<0.01)。B组与A组NO浓度相比较无明显差异(P>0.05)，而C组NO浓度显著下降。
3.3 胰岛素抵抗与血浆ET及NO的相关性 胰岛素抵抗以胰岛素敏感指数(IAI)来表示，IAI越低，胰岛素抵抗越明显，相关分析表明B组与C组患者的IAI与ET呈负相关(相关系数r＝-0.34，P<0.01)，IAI与NO呈正相关(r＝0.45，P<0.01)，而血浆ET与NO呈显著负相关(r＝-0.57，P<0.01)。
4 讨论
ET由内皮细胞合成，首先作用于相邻的平滑肌细胞，属旁分泌可调节局部血流，同时一部分释放入血，起循环激素的作用，促进平滑肌细胞有丝分裂和增殖，具有强烈缩血管作用。糖尿病患者血糖升高，红细胞膜和血红蛋白糖化，使其变形和携氧能力下降，长期所致血管内皮细胞缺血、缺氧及损伤，并激活内源性凝血系统，使糖尿病患者长期处于高凝状态，血循环内凝血酶增加，因而导致糖尿病患者ET升高，ET长期升高，可引起心、脑、肾大中血管及微血管持久性收缩痉挛，导致血管平滑肌增殖和血管管腔狭窄，冠状动脉、脑动脉、肾动脉毛细血管内皮损伤，加重缺血、缺氧，使ET进一步升高[2、3]。经研究糖尿病患者血浆ET和血糖水平呈正相关，与血管并发症的发生发展密切相关。本文结果显示，C组(糖尿病并发症组)血浆ET浓度较B组血浆ET浓度明显升高(P<0.01)由此可见，ET水平在糖尿病血管并发症的发病机制中起重要作用。有血管并发症时，血浆ET升高的水平在一定程度上能反映血管内皮细胞的损伤程度。
, 百拇医药
一氧化氮(NO)是近年来发现的一种血管活性物质，具有舒张血管，松弛血管平滑肌和抑制内皮细胞增殖的作用。NO在糖尿病及其并发症的发生发展中发挥重要作用。本研究表明，血浆NO水平在糖尿病组明显低于对照组，并且随血管并发症的加重而逐渐减少。C组NO浓度显著低于A组(P<0.01)，也明显低于B组，说明糖尿病人血糖控制不好可造成内皮损伤，内皮损伤减少了NO合成与释放，其舒张血管作用减弱，又加重了微循环障碍，促使微血栓形成，大量微血栓形成又加重了各组织器官的缺血、缺氧性损害，表明糖尿病血管功能和结构的改变，糖尿病血管并发症的发生发展与NO水平下降密切相关，与Husika及Kihra等的研究基本一致。本研究还表明，胰岛素抵抗与血浆ET及NO有相关性：胰岛素抵抗与ET正相关，与NO呈负相关，而血浆ET与NO呈显著负相关。
参考文献
1，李光伟，潘孝仁.检测人群胰岛素敏感性的一项新指数.中华内科杂志，1993，32：656.
, 百拇医药
2，Porta M，Selba MC，Molirattip，et al.Endotheloal cell function in diabetic microangiopathy.Diabetologia，1994，5：161～165.
3，Lgnarro Lj，Baga GM，Wood KS，et al.Endothelium―derived relaxing factor produced and released from artery and vein is nitric oxide.Proc Natl Acad Sci USA，1997，84：9265～9269.
(收稿日期：2000-11-03), http://www.100md.com
单位：济南市中心医院 山东济南 250013
关键词：2型糖尿病 内皮素 一氧化氮
山东医药002402 摘要 用RIA法、ELASAI等方法测定92例2型糖尿病并血管并发症患者、90例单纯2型糖尿病患者及40例正常人的血浆ET、NO、IAI等指标并进行比较。结果：2型糖尿病并血管并发症组较单纯2型糖尿病组及正常对照组IAI显著降低，血浆ET水平升高，NO水平降低，IAI与ET水平呈负相关，与NO呈正相关，ET与NO呈负相关。结论：胰岛素抵抗、血浆ET水平升高、NO水平降低与2型糖尿病血管并发症的发生、发展关系密切。
中图分类号：R58 文献标识码：A
Abstract The levels of plasma ET，NO and IAI of 92 cases type 2 diabetes with vascular complication，90 cases without complication and 40 cases normal persons were measured and compared by a RIA or on ELASAI mothod.Result showed the levels of NO and IAI were significantly lower and levels of ET were higher in diabetes with vascular complication than that in normal persons and diabetes without vascular complication.These suggested insulin resistance，increased plasma ET and decreased plasma NO R58 played an important role in the progress of vascular complication in type 2 diabets.
, 百拇医药
Key words Type 2 diabetes ET NO
2型糖尿病慢性并发症是糖尿病患者致残、早亡的主要原因。胰岛素抵抗、内皮素(ET)、一氧化氮(NO)与糖尿病血管病变的发生、发展密切相关。本研究通过测定糖尿病患者胰岛素敏感指数(IAI)、ET、NO水平变化来探讨血管病变与IAI、ET、NO的相关性。现报告如下。
1 一般资料
182例2型糖尿病患者均为我院内分泌科门诊及住院患者，符合1985年WHO糖尿病诊断标准。其中男89例，女93例，年龄49.6±13.2岁，病程9.06±5.47年。按有无血管并发症(心、脑、肾、视网膜)分为糖尿病无血管并发症组(B组)、糖尿病血管并发症组(C组)，另设对照组(A组)，三组年龄、性别、体重指数相匹配。A组：正常对照组40例，男22例，女18例，年龄44.2±12.5岁。B组：糖尿病无血管并发症组90例，男38例，女52例，年龄47.2±9.5岁，病程4～8年。C组：糖尿病并血管并发症组92例，男53例，女39例，年龄49±11.57岁，病程6～12年。
, http://www.100md.com
2 方法
2.1 糖耐量-胰岛素-C肽释放试验 采用放免分析法。药盒由中国原子能研究所提供，使用西安产的FJ-2003全自动γ-免疫计数仪进行测定空腹及馒头餐后30min、60min、120min、180min血糖、胰岛素、C肽水平。
2.2 ET测定 采用放射免疫分析法。取静脉血2ml，注入10%EDTA二钠30μl和抑肽酶40μl于试管中，混匀，4℃，3000r/min离心10分钟，分离血浆，置-20℃冰箱备用，测定前将样品置室温复融，再次4℃，3000r/min离心5分钟，取上清液测定。药盒由解放军总院东亚免疫技术研究所提供。使用西安产EJ-2003全自动?免疫计数器进行测定，ET正常值为50.8±7.58pg/ml。
2.3 NO测定 采用酶法高密度测定(ELASAI)。药盒由深圳晶美生物工程有限公司提供。设置测定管与标准管。测定管样品0.1ml，试剂10.1ml，试剂20.1ml，轻轻混匀，37℃水浴1小时，另加试剂30.5ml，试剂40.5ml混匀，室温放置10分钟后，530nm波长，0.5cm比色杯，空白调零，分别读取测定管与标准管OD值，按公式计算：NO(μmol/L)＝测定管OD/标准管OD×100μmol/L(NO正常值＝37.6±17.2μmol/L)
, 百拇医药
2.4 血糖、血胆固醇、血甘油三酯、血尿酸 采用BECKMAN全自动分析仪测定，HbAlc采用U.S.A.B10-RAD公司生产的分光光度仪测定。
2.5 IAI的测定 应用空腹血糖与胰岛素乘积的倒数计算[1]。
2.6 统计学处理 采用SAS统计分析软件，计算资料所得数据以x±s表示，组间均值差异及治疗后均值的差异比较采用t检验，NO、ET与IR相关关系采用直线回归分析。
3 结果
3.1 各组生化指标的改变见表1。
表1 三组人群生化指标的变化(
±s) 组别, 百拇医药
n
HbAlc%
IAI
Ch(mmol/L)
Tg(mmol/L)
BMI(kg/m2)
ET(pg/ml)
NO(μmol/L)
A
B
C
40
, 百拇医药
90
92
4.8±1.3
7.41±2.35
8.36±3.52
-5.43±1.18
-7.6±1.19
-8.32±1.35
4.37±0.82
6.48±1.18
6.73±1.08
1.31±0.75
, 百拇医药
2.53±1.62
2.57±1.34
26.27±1.37
26.92±1.89
27.83±2.32
50.8±1.35
74.15±28.36
98.76±32.51?
37.6±17.2
34.24±15.31
23.48±9.21?
, 百拇医药
注：C组与A组、B组比较 ? P<0.013.2 各组血浆ET、NO浓度的改变 见表1，结果显示，B组与C组的糖尿病患者血浆ET浓度较对照组明显升高(P<0.01)，而C组又较B组显著升高(P<0.01)。B组与A组NO浓度相比较无明显差异(P>0.05)，而C组NO浓度显著下降。
3.3 胰岛素抵抗与血浆ET及NO的相关性 胰岛素抵抗以胰岛素敏感指数(IAI)来表示，IAI越低，胰岛素抵抗越明显，相关分析表明B组与C组患者的IAI与ET呈负相关(相关系数r＝-0.34，P<0.01)，IAI与NO呈正相关(r＝0.45，P<0.01)，而血浆ET与NO呈显著负相关(r＝-0.57，P<0.01)。
4 讨论
ET由内皮细胞合成，首先作用于相邻的平滑肌细胞，属旁分泌可调节局部血流，同时一部分释放入血，起循环激素的作用，促进平滑肌细胞有丝分裂和增殖，具有强烈缩血管作用。糖尿病患者血糖升高，红细胞膜和血红蛋白糖化，使其变形和携氧能力下降，长期所致血管内皮细胞缺血、缺氧及损伤，并激活内源性凝血系统，使糖尿病患者长期处于高凝状态，血循环内凝血酶增加，因而导致糖尿病患者ET升高，ET长期升高，可引起心、脑、肾大中血管及微血管持久性收缩痉挛，导致血管平滑肌增殖和血管管腔狭窄，冠状动脉、脑动脉、肾动脉毛细血管内皮损伤，加重缺血、缺氧，使ET进一步升高[2、3]。经研究糖尿病患者血浆ET和血糖水平呈正相关，与血管并发症的发生发展密切相关。本文结果显示，C组(糖尿病并发症组)血浆ET浓度较B组血浆ET浓度明显升高(P<0.01)由此可见，ET水平在糖尿病血管并发症的发病机制中起重要作用。有血管并发症时，血浆ET升高的水平在一定程度上能反映血管内皮细胞的损伤程度。
, 百拇医药
一氧化氮(NO)是近年来发现的一种血管活性物质，具有舒张血管，松弛血管平滑肌和抑制内皮细胞增殖的作用。NO在糖尿病及其并发症的发生发展中发挥重要作用。本研究表明，血浆NO水平在糖尿病组明显低于对照组，并且随血管并发症的加重而逐渐减少。C组NO浓度显著低于A组(P<0.01)，也明显低于B组，说明糖尿病人血糖控制不好可造成内皮损伤，内皮损伤减少了NO合成与释放，其舒张血管作用减弱，又加重了微循环障碍，促使微血栓形成，大量微血栓形成又加重了各组织器官的缺血、缺氧性损害，表明糖尿病血管功能和结构的改变，糖尿病血管并发症的发生发展与NO水平下降密切相关，与Husika及Kihra等的研究基本一致。本研究还表明，胰岛素抵抗与血浆ET及NO有相关性：胰岛素抵抗与ET正相关，与NO呈负相关，而血浆ET与NO呈显著负相关。
参考文献
1，李光伟，潘孝仁.检测人群胰岛素敏感性的一项新指数.中华内科杂志，1993，32：656.
, 百拇医药
2，Porta M，Selba MC，Molirattip，et al.Endotheloal cell function in diabetic microangiopathy.Diabetologia，1994，5：161～165.
3，Lgnarro Lj，Baga GM，Wood KS，et al.Endothelium―derived relaxing factor produced and released from artery and vein is nitric oxide.Proc Natl Acad Sci USA，1997，84：9265～9269.
(收稿日期：2000-11-03), http://www.100md.com